Imunitní odpověď na úrovni jednotlivých buněk na kontrolovaný příjem lepku u dětské celiakie (CELLiomicS)

Celiakie je chronické, imunologicky podmíněné onemocnění tenkého střeva vyvolané konzumací lepku u geneticky predisponovaných jedinců. U dětských pacientů vede přísné dodržování bezlepkové diety (GFD) k obnově sliznice a klinickému zlepšení; nicméně systémový imunologický stav během dlouhodobé GFD není zcela objasněn. Náhodná expozice lepku je běžná v každodenním životě a může vyvolat subklinickou imunitní aktivaci i v nepřítomnosti zjevných příznaků. Biologické důsledky takových nízkodávkových expozic, zejména na úrovni jednotlivých buněk, nejsou u dětí plně charakterizovány.

CELLiomicS (Jednobuněčná imunitní odpověď na kontrolovanou konzumaci lepku u dětské celiakie) je randomizovaná, kontrolovaná klinická studie s paralelními skupinami navržená k charakterizaci systémových imunitních odpovědí na kontrolovanou konzumaci lepku u dětských pacientů s prokázanou celiakií. Způsobilí účastníci jsou děti ve věku 8–14 let, které dodržovaly přísnou GFD po dobu nejméně 18 měsíců před zařazením do studie. Studie plánuje zařadit přibližně 45 účastníků s biopsií nebo sérologicky potvrzenou celiakií.

Účastníci jsou randomizováni do tří intervenčních skupin: placebo, 50 mg lepku nebo 5 g lepku. Vybrané dávky lepku představují dva klinicky relevantní scénáře: (1) náhodná nízká expozice (50 mg) a (2) dietní přestupek (5 g), obě pod prahem typicky vyžadovaným k vyvolání sérologické relapsy. Lepku nebo placeba je podáváno jednou denně ve dnech 1, 2 a 3. Vzorky krve jsou odebrány v den 1 (výchozí hodnota) a v den 8 (pět dní po poslední dávce). Vzorky stolice a moči jsou také odebrány ve stejných časových bodech pro doplňkové analýzy, včetně fekálních imunogenních peptidů lepku (GIP) a exploratorní metabolomiky.

Periferní mononukleární buňky krve jsou zpracovány pro vysokodimenzionální imunoprofily pomocí sekvenování RNA jednotlivých buněk a sekvenování T-buněčného receptoru (TCR) (10x Genomics). Tyto analýzy umožňují charakterizaci složení imunitních buněk, transkripční aktivity a dynamiky klonálních T-buněk před a po expozici lepku. Kromě toho je hodnocena exprese exosomální mikroRNA schválená dodatkem etické komise SICEIA-2025-001434 a provádí se neadresná metabolomická profilace vzorků krve, stolice a moči k prozkoumání systémových metabolických signatur spojených s expozicí lepku.

Primárním cílem je identifikovat lepkem indukované transkripční a buněčné změny v periferních imunitních buňkách mezi výchozími hodnotami (den 1) a po intervenci (den 8). Sekundární cíle zahrnují: (1) hodnocení dávkově závislé imunitní aktivace; (2) identifikaci podskupin imunitních buněk a programů genové exprese spojených s různým množstvím lepku; (3) charakterizaci alterací TCR repertoáru po expozici lepku; (4) vyhodnocení interindividuální variability imunitních odpovědí; (5) analýzu změn exosomální mikroRNA; a (6) identifikaci metabolomických signatur spojených s konzumací lepku.

Tím, že studie poskytuje vysokorozlišující pohled na systémovou imunitní aktivaci po kontrolované konzumaci lepku, si klade za cíl prohloubit porozumění biologickému dopadu reálné expozice lepku u dětské celiakie a podpořit vývoj nových biomarkerů pro dietní monitorování a personalizovaný klinický management.