Yksittäissolujen immuunivaste hallittuun gluteeninsaantiin lasten keliakiassa (CELLiomicS)
Yksittäissolututkimus systemaattisesta immuunivasteesta hallittuun gluteeninsaantiin lasten keliakiassa
Tämä tutkimus selvittää, miten lasten keliakian immuunijärjestelmä reagoi hallittuihin, pieniin gluteeniannoksiin. Lapsia, jotka noudattavat tiukkaa gluteenitonta ruokavaliota, arvotaan satunnaisesti saamaan joko lumelääkettä, 50 mg gluteenia tai 5 g gluteenia kerran päivässä kolmen päivän ajan, simuloiden tosielämän vahingollista altistusta tai ruokavaliorikkomusta. Verinäytteet kerätään päivänä 1 (ennen gluteenin nauttimista) ja päivänä 8 (viisi päivää viimeisen annoksen jälkeen). Ulostenäytteet ja virtsanäytteet kerätään myös täydentäviä analyysejä varten.
Käyttämällä yksisoluribonukleiinihapon (RNA) sekvensointia, T-solureseptorisekvensointia, mikroRNA-profilointia ja tutkivaa metabolomiikkaa tutkimuksen tavoitteena on kuvata muutoksia immuunisolupopulaatioissa ja geenien ilmentymisessä gluteenialtistuksen jälkeen. Tavoitteena on määrittää, aiheuttavatko jopa hyvin pienet gluteenimäärät mitattavia systeemisiä immuunivasteita ja eroavatko nämä vasteet annetun annoksen mukaan. Näiden mekanismien ymmärtäminen voi tukea uusien biomarkkereiden kehittämistä ja parantaa lasten keliakian kliinistä hoitoa.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Yksityiskohtainen kuvaus
Keliaakiko on krooninen, immuunivälitteinen enteropatia, jonka laukaisee gluteenin nauttiminen geneettisesti alttiilla yksilöillä. Lasten potilailla tiukka gluteeniton ruokavalio (GFD) johtaa limakalvon palautumiseen ja kliiniseen paranemiseen; kuitenkin systemaattinen immunologinen maisema pitkäaikaisen GFD:n aikana jää epätäydellisesti ymmärretyksi. Vahingollinen gluteenialtistus on yleistä arjessa ja voi laukaista subkliinisen immuuniaktivaation jopa ilman selviä oireita. Tällaisten mataladoosisten altistusten biologisia seurauksia, erityisesti yksittäisten solujen tasolla, ei ole täysin karakterisoitu lapsilla.
CELLiomicS (Yksittäisten solujen immuunivaste kontrolloituun gluteenin saantiin lasten keliaakikossa) on satunnaistettu, kontrolloitu, rinnakkaisryhmäkliininen tutkimus, joka on suunniteltu karakterisoimaan systemaattisia immuunivasteita kontrolloituun gluteenin saantiin lasten potilailla, joilla on vakiintunut keliaakikko. Kelpoiset osallistujat ovat 8–14-vuotiaita lapsia, jotka ovat noudattaneet tiukkaa GFD:ä vähintään 18 kuukautta ennen osallistumista. Tutkimus aikoo rekrytoida noin 45 osallistujaa, joilla on biopsian tai serologian vahvistama keliaakikko.
Osallistujat satunnaistetaan kolmeen interventioryhmään: placebo, 50 mg gluteenia tai 5 g gluteenia. Valitut gluteeniannokset edustavat kahta kliinisesti merkityksellistä skenaariota: (1) vahingollinen matalan tason altistus (50 mg) ja (2) ruokavalion rikkominen (5 g), joista molemmat ovat alle kynnyksen, joka yleensä vaaditaan serologisen relapsin aiheuttamiseen. Gluteenia tai placeboa annetaan kerran päivässä päivinä 1, 2 ja 3. Verinäytteet otetaan päivänä 1 (perustaso) ja päivänä 8 (viisi päivää viimeisen annoksen jälkeen). Ulosten ja virtsanäytteet kerätään myös samoina ajanjaksoina täydentäviä analyysejä varten, mukaan lukien fekaaliset gluteeni-immunogeeniset peptidit (GIP) ja tutkivat metabolomiikka-analyysit.
Perifeeriset veren mononukleaariset solut käsitellään korkeamittaiseen immuuniprofilointiin käyttäen yksittäisten solujen RNA-sekvensointia ja T-solureseptori (TCR) -sekvensointia (10x Genomics). Nämä analyysit mahdollistavat immuunisolujen koostumuksen, transkriptioaktiivisuuden ja kloonaalisten T-solujen dynamiikan karakterisoinnin ennen gluteenihaastetta ja sen jälkeen. Lisäksi eksosomaalisen mikroRNA:n ilmentymistä arvioidaan eettisen komitean muutoksen SICEIA-2025-001434 hyväksymänä, ja kohdentamatonta metabolomiikka-profilointia suoritetaan veri-, uloste- ja virtsanäytteistä tutkiakseen gluteenialtistukseen liittyviä systemaattisia metabolisia signatuureja.
Ensisijainen tavoite on tunnistaa gluteenin aiheuttamat transkriptionaaliset ja solulliset muutokset perifeerisissä immuunisoluissa perustason (päivä 1) ja interventiojälkeisen (päivä 8) välillä. Toissijaiset tavoitteet sisältävät: (1) annosriippuvaisen immuuniaktivaation arvioinnin; (2) eri gluteenimääriin liittyvien immuunisolujen alajoukkojen ja geenien ilmentymisohjelmien tunnistamisen; (3) TCR-repertuaarin muutosten karakterisoinnin gluteenialtistuksen jälkeen; (4) yksilöiden välisen vaihtelun arvioinnin immuunivasteen suhteen; (5) eksosomaalisten mikroRNA-muutosten analysoinnin; ja (6) gluteenin saantiin liittyvien metabolomiikka-signatuureiden tunnistamisen.
Tarjoamalla korkearesoluutioisen näkymän systemaattisesta immuuniaktivaatiosta kontrolloidun gluteenin saannin jälkeen, tämä tutkimus pyrkii syventämään ymmärrystä todellisen maailman gluteenialtistuksen biologisesta vaikutuksesta lasten keliaakikossa ja tukemaan uusien biomarkkereiden kehittämistä ruokavalion seurantaan ja personoituun kliiniseen hoitoon.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Arvioitu)
Vaihe
- Ei sovellettavissa
Yhteystiedot ja paikat
Opiskeluyhteys
- Nimi: Rafael Martín Masot, MD, PhD
- Puhelinnumero: +34 951290000
- Sähköposti: rafammgr@uma.es
Tutki yhteystietojen varmuuskopiointi
- Nimi: Lara María Bossini Castillo, MD, PhD
- Puhelinnumero: +34 663148283
- Sähköposti: lbossinicastillo@ugr.es
Opiskelupaikat
-
-
-
Málaga, Espanja, 29010
- Rekrytointi
- Hospital Regional Universitario de Málaga
-
Ottaa yhteyttä:
- Rafael Martín Masot, MD, PhD
- Puhelinnumero: +34 951 290 000
- Sähköposti: rafammgr@uma.es
-
Ottaa yhteyttä:
- Lara María Bossini Castillo, MD, PhD
- Sähköposti: lbossinicastillo@ugr.es
-
Päätutkija:
- Rafael Martín Masot, MD, PhD
-
Päätutkija:
- Lara María Bossini Castillo, MD, PhD
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
- Lapsi
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Kuvaus
Osallistumiskriteerit:
- Ikä 8–14 vuotta tutkimukseen osallistuessa.
- Keliakian diagnoosi ESPGHAN 2020 -kriteerien mukaisesti.
- Vähintään 18 kuukautta tiukkaa gluteenitonta ruokavaliota (GFD).
- Riittävä gluteenittoman ruokavalion noudattaminen, mikä on osoitettu negatiivisilla gluteenin immunogeenisillä peptideillä (GIP) ulosteessa ennen osallistumista.
- Oireeton ruoansulatuskanavan näkökulmasta edeltävinä viikkoina.
- Kyky nieleä gluteeni/placebovalmiite.
- Vanhempien/oikeudellisten huoltajien kirjallinen tietoon perustuva suostumus ja lapsen suostumus.
Poissulkemiskriteerit:
- Lihavuus, joka määritellään painoindeksin (BMI) olevan ≥95. persentiili WHO-kriteerien mukaan.
- Diagnosoitu tulehduksellinen suolistosairaus tai diabetes mellitus.
- Äkillinen infektiosairaus osallistumisen aikaan.
- Krooninen maksa-, keuhko-, munuais- tai reumasairaus.
- Aiempi vakava akuutti reaktio vahingossa nautittuun gluteeniin.
- Suun kautta annettujen kortikosteroidien tai immunosuppressiivisen hoidon käyttö edeltävinä 3 kuukautena.
- Mikä tahansa tila, joka tutkijoiden mielestä saattaa estää osallistumisen tai vaarantaa tutkimuksen luotettavuuden.
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Ensisijainen käyttötarkoitus: Perustiede
- Jako: Satunnaistettu
- Inventiomalli: Rinnakkaistehtävä
- Naamiointi: Nelinkertaistaa
Aseet ja interventiot
Osallistujaryhmä / Arm |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Placebo Comparator: Placeboryhmä
Osallistujat saavat lumelääkkeen kerran päivässä päivinä 1, 2 ja 3. Verinäytteet kerätään päivänä 1 (alkuperäinen tila) ja päivänä 8 (intervention jälkeen).
Osallistujat ja arvioijat pysyvät tietämättöminä allokoinnista.
|
Placebo-valmiste, joka on ulkonäöltään ja annosteluaikaltaan identtinen gluteeniannosten kanssa.
Annetaan kerran päivässä päivinä 1, 2 ja 3. Käytetään vertailukohteena.
Osallistujat ja arvioijat pysyvät tietämättöminä allokaatioista.
Verenäytteiden lisäksi kerätään ulostenäytteitä ja virtsanäytteitä täydentäviä analyysejä varten (mukaan lukien ulosteesta peräisin olevat gluteenin immunogeeniset peptidit (GIP) ja tutkivat metabolomiset testit)
|
|
Kokeellinen: Matala-annoksinen gluteeni (50 mg)
Osallistujat saavat 50 mg gluteenia kerran päivässä päivinä 1, 2 ja 3, mikä jäljittelee vahingossa tapahtuvaa matalan tason altistusta.
Verinäytteet kerätään päivänä 1 (lähtötilanne) ja päivänä 8 (intervention jälkeen).
Osallistujat ja arvioijat pysyvät tietämättöminä allokaatiosta.
|
Verenäytteiden lisäksi kerätään ulostenäytteitä ja virtsanäytteitä täydentäviä analyysejä varten (mukaan lukien ulosteesta peräisin olevat gluteenin immunogeeniset peptidit (GIP) ja tutkivat metabolomiset testit)
Osallistujat saavat 50 mg gluteenia kerran päivässä päivinä 1, 2 ja 3.
Tämä annos jäljittelee vahingossa tapahtuvaa matalan tason gluteenialtistusta lapsettain, joilla on keliakia. Osallistujat ja arvioijat pysyvät tietämättöminä ryhmäjaosta. |
|
Kokeellinen: Korkea-annoksinen gluteeni (5 g)
Osallistujat saavat 5 g gluteenia kerran päivässä päivinä 1, 2 ja 3, mikä jäljittelee ruokavalion rikkomista.
Verenäytteet kerätään päivänä 1 (perustaso) ja päivänä 8 (intervention jälkeen).
Osallistujat ja arvioijat pysyvät tietämättöminä allokaatiosta.
|
Verenäytteiden lisäksi kerätään ulostenäytteitä ja virtsanäytteitä täydentäviä analyysejä varten (mukaan lukien ulosteesta peräisin olevat gluteenin immunogeeniset peptidit (GIP) ja tutkivat metabolomiset testit)
Osallistujat saavat 5 g gluteenia kerran päivässä päivinä 1, 2 ja 3.
Tämä annos jäljittelee ruokavaliorikkomusta keliakian sairastavilla lapsilla.
Osallistujat ja arvioijat pysyvät tietämättöminä ryhmittelystä.
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Muutos perifeerisen veren immuunisolujen geeniekspressiossa ohjatun gluteenin nauttimisen jälkeen
Aikaikkuna: Päivä 1 - Päivä 8
|
Muutos lähtötasosta (päivä 1) interventiovaiheen jälkeen (päivä 8) perifeerisen veren immuunisolujen geeniekspressioprofiileissa, mitattuna yksittäissolu-RNA-sekvensoinnilla (scRNA-seq).
|
Päivä 1 - Päivä 8
|
|
Muutos perifeerisen veren T-solureseptorirepertuaarissa ohjatun gluteenin nauttimisen jälkeen
Aikaikkuna: Päivä 1 - Päivä 8
|
Muutos lähtötasosta (päivä 1) interventiojälkeiseen (päivä 8) T-solureseptorin (TCR) diversiteetissä ja klonaalisuudessa perifeerisen veren T-soluissa mitattuna TCR-sekvensoinnilla
|
Päivä 1 - Päivä 8
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Annoksen mukaan vaihtelevat muutokset immuunigeenien ilmentymisessä gluteenialtistuksen jälkeen
Aikaikkuna: Päivä 1 - Päivä 8
|
Muutos lähtöarvosta (päivä 1) interventiotilanteen jälkeen (päivä 8) immunologisesti merkityksellisten geenien ilmentymisasteissa, mitattuna yksittäissolu-RNA-sekvensoinnilla (scRNA-seq), vertaillen placeboa, 50 mg gluteenia ja 5 g gluteenia sisältäviä ryhmiä.
|
Päivä 1 - Päivä 8
|
|
Dose-dependent changes in T-cell receptor repertoire clonality after gluten exposure
Aikaikkuna: Päivä 1 - Päivä 8
|
Perustason (päivä 1) ja interventiojälkeisen ajan (päivä 8) välinen muutos T-solureseptorin (TCR) klonaliteetissa ja diversiteetissa, mitattuna TCR-sekvensoinnilla, vertaillen placeboryhmää, 50 mg gluteeniryhmää ja 5 g gluteeniryhmää.
|
Päivä 1 - Päivä 8
|
|
Osallistujien välinen vaihtelu immuunigeenien ilmentymisvasteessa gluteenialtistukseen
Aikaikkuna: Päivä 1 - Päivä 8
|
Yksilöiden välinen vaihtelu immunigeenien ilmentymisprofiilien muutoksissa lähtöarvosta (päivä 1) interventiovaiheen jälkeen (päivä 8) mitattuna yksisolusekvensoinnilla (scRNA-seq).
|
Päivä 1 - Päivä 8
|
|
Muutokset seerumin eksosomaalisen mikroRNA:n ilmentymisessä gluteenialtistuksen jälkeen
Aikaikkuna: Päivä 1 - Päivä 8
|
Muutos lähtötasosta (päivä 1) interventiojälkeiseen aikaan (päivä 8) seerumin eksosomaalisissa mikroRNA-ilmentymistasoissa.
|
Päivä 1 - Päivä 8
|
|
Muutokset metabolomisissa profiileissa gluteenialtistuksen jälkeen
Aikaikkuna: Päivä 1 - Päivä 8
|
Muutos perustason (päivä 1) ja interventiojälkeisen (päivä 8) välillä veri-, uloste- ja virtsanäytteissä mitatuissa kohdennattomissa metabolomisissa profiileissa.
|
Päivä 1 - Päivä 8
|
|
Muutokset perifeerisen veren immuunisolutyyppien osuuksissa gluteenialtistuksen jälkeen
Aikaikkuna: Päivä 1 - Päivä 8
|
Muutos lähtötasosta (päivä 1) interventiojälkeiseen mittaukseen (päivä 8) suhteellisissa immuunisolutyyppien osuuksissa, jotka tunnistettiin perifeerisestä verestä yksittäissolun RNA-sekvensoinnilla (scRNA-seq).
|
Päivä 1 - Päivä 8
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Yhteistyökumppanit
Tutkijat
- Päätutkija: Rafael Martín Masot, MD, PhD, Hospital Regional Universitario de Málaga / IBIMA-BIONAND
- Päätutkija: Lara María Bossini Castillo, MD, PhD, IBS Granada
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Arvioitu)
Opintojen valmistuminen (Arvioitu)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
- Metaboliset sairaudet
- Suoliston sairaudet
- Immuunijärjestelmän sairaudet
- Ruoansulatuskanavan sairaudet
- Ruoansulatuskanavan sairaudet
- Imeytymishäiriöt
- Ravitsemukselliset ja aineenvaihduntataudit
- Autoimmuunisairaudet
- Keliakia
- Aminohapot, peptidit ja proteiinit
- Proteiinit
- Ruoansulatusjärjestelmän fysiologiset ilmiöt
- Ruuansulatusjärjestelmä ja oraalinen fysiologinen ilmiö
- Kasviproteiinit
- Prolamiinit
- Viljaproteiinit
- Siementen varastoproteiinit
- Purkautuminen
- Gluteenit
Muut tutkimustunnusnumerot
- PI-0070-2024
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
IPD-suunnitelman kuvaus
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .