Resposta Imunológica a Nível de Célula Única à Ingestão Controlada de Glúten na Doença Celíaca Pediátrica (CELLiomicS)

A doença celíaca é uma enteropatia crónica, imunomediada, desencadeada pela ingestão de glúten em indivíduos geneticamente predispostos. Em doentes pediátricos, a adesão estrita a uma dieta sem glúten (DSG) leva à recuperação da mucosa e à melhoria clínica; no entanto, o panorama imunológico sistémico durante a DSG a longo prazo permanece incompletamente compreendido. A exposição acidental ao glúten é comum na vida quotidiana e pode desencadear ativação imunológica subclínica mesmo na ausência de sintomas evidentes. As consequências biológicas de tais exposições a baixas doses, particularmente ao nível de células individuais, não estão totalmente caracterizadas em crianças.

CELLiomicS (Resposta Imunológica de Célula Única à Ingestão Controlada de Glúten na Doença Celíaca Pediátrica) é um estudo clínico aleatorizado, controlado, de grupos paralelos, concebido para caracterizar as respostas imunológicas sistémicas à ingestão controlada de glúten em doentes pediátricos com doença celíaca estabelecida. Os participantes elegíveis são crianças com idades entre os 8 e os 14 anos que seguiram uma DSG estrita durante pelo menos 18 meses antes da inscrição. O estudo planeia recrutar aproximadamente 45 participantes com doença celíaca confirmada por biópsia ou sorologia.

Os participantes são aleatorizados em três grupos de intervenção: placebo, 50 mg de glúten ou 5 g de glúten. As doses de glúten selecionadas representam dois cenários clinicamente relevantes: (1) exposição acidental a baixo nível (50 mg), e (2) transgressão alimentar (5 g), ambas abaixo do limiar tipicamente necessário para causar recaída sorológica. O glúten ou placebo é administrado uma vez por dia nos Dias 1, 2 e 3. As amostras de sangue são obtidas no Dia 1 (linha de base) e no Dia 8 (cinco dias após a dose final). São também recolhidas amostras de fezes e urina nos mesmos pontos temporais para análises complementares, incluindo péptidos imunogénicos de glúten (GIP) fecais e metabolómica exploratória.

As células mononucleares do sangue periférico são processadas para perfis imunológicos de alta dimensão utilizando sequenciação de RNA de célula única e sequenciação do recetor de células T (TCR) (10x Genomics). Estas análises permitem a caracterização da composição das células imunitárias, da atividade transcricional e da dinâmica clonal das células T antes e após o desafio com glúten. Além disso, a expressão de microRNA exossomal é avaliada conforme aprovado pela emenda do comité de ética SICEIA-2025-001434, e é realizado um perfil metabolómico não direcionado de amostras de sangue, fezes e urina para explorar assinaturas metabólicas sistémicas associadas à exposição ao glúten.

O objetivo principal é identificar alterações transcricionais e celulares induzidas pelo glúten nas células imunitárias periféricas entre a linha de base (Dia 1) e pós-intervenção (Dia 8). Os objetivos secundários incluem: (1) avaliar a ativação imunológica dependente da dose; (2) identificar subconjuntos de células imunitárias e programas de expressão génica associados a diferentes quantidades de glúten; (3) caracterizar alterações no repertório TCR após exposição ao glúten; (4) avaliar a variabilidade interindividual nas respostas imunitárias; (5) analisar alterações de microRNA exossomal; e (6) identificar assinaturas metabolómicas associadas à ingestão de glúten.

Ao fornecer uma visão de alta resolução da ativação imunológica sistémica após ingestão controlada de glúten, este estudo visa aprofundar a compreensão do impacto biológico da exposição real ao glúten na doença celíaca pediátrica e apoiar o desenvolvimento de novos biomarcadores para monitorização dietética e gestão clínica personalizada.