Untersuchung minimaler Resterkrankungen in autokonserviertem Eierstockgewebe bei neoplastischer Pathologie (OVAGRAFT)

Die Kryokonservierung von Eierstockgewebe wird jungen Mädchen und Frauen unter 35 Jahren angeboten, die sich einer sterilisierenden gonadotoxischen Behandlung unterziehen müssen, mit dem Ziel, ihre Fruchtbarkeit zu erhalten. Der Hauptteil des Eierstocks bleibt erhalten, da Ur- und Primärfollikel resistent gegen Einfrier-/Auftauprotokolle sind. In Ermangelung anderer Techniken (In-vivo-Reifung, Injektion isolierter Eierstockfollikel usw.) ist die Autotransplantation dieses kryokonservierten Gewebes derzeit die einzige Technik, mit der die Fruchtbarkeit wiederhergestellt werden kann. Eine Autotransplantation ist nur möglich, wenn die Indikation für die Kryokonservierung der Eierstöcke eine nicht-neoplastische Pathologie oder eine bösartige Pathologie mit geringem Risiko einer Ovarialmetastasierung ist. In anderen Fällen neoplastischer Pathologien, insbesondere bei akuter Leukämie, kann Gewebe aufgrund des Fehlens einer kodifizierten Technik zur Bewertung der Resterkrankung (MRD) noch nicht wiederverwendet werden. Das Team entwickelt und validiert seit zwei Jahren eine Technik zur Suche nach Resterkrankungen in Fragmenten der Eierstockrinde bei akuter Leukämie. Diese Technik basiert auf einem Originalprotokoll zur Dissoziation von Eierstockgewebe, um eine Population isolierter Eierstockzellen zu erhalten, die mittels mehrfarbiger Durchflusszytometrie analysiert werden können. Die Spezifität und Empfindlichkeit der Technik wurden in einem experimentellen Modell demonstriert. Dieses Modell besteht darin, mithilfe der 8-Farben-Durchflusszytometrie nach charakterisierbaren Leukämiezellen zu suchen, die in unterschiedlichen Verdünnungen einer Population isolierter Eierstockzellen hinzugefügt werden, die aus der Modell-Eierstockrinde entnommen wurden, und zwar bis zu einer Verdünnung von 10-5. Wenn die molekularen Marker bei der Diagnose vorhanden waren, wurden sie durch RQ-PCR (Real-Time Quantitative Polymerase Chain Reaction) mit denselben Verdünnungen gefunden. Das Modellgewebe stammte aus laparoskopischen Eierstockbohrungen bei Patienten mit polyzystischem Ovarialsyndrom. Das Hauptziel dieses Projekts ist die Validierung von Techniken, die zuvor mit verschiedenen Populationen von Leukämiezellen kodifiziert wurden, die charakterisiert werden können. Anschließend wollen wir diese Technik anpassen und validieren, um mithilfe der 8-Farben-Durchflusszytometrie an kryokonservierten Fragmenten der Eierstockrinde von Leukämiepatienten, bei denen das Risiko einer Metastasierung besteht, nach MRD zu suchen. Sekundäre Ziele werden darin bestehen, Verfahren zur onkologischen Qualifizierung von Transplantaten bei bösartigen Pathologien umzusetzen und die Empfehlungen für die Verwendung dieses kryokonservierten Eierstockgewebes durch die Autotransplantationstechnik für diese Indikationen zu berücksichtigen.