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Urothel Tissue Engineering unter Verwendung von Biopsien aus der transurethralen Resektion der Prostata (IMOPU)

4. Oktober 2018 aktualisiert von: Central Hospital, Nancy, France

Urothel Tissue Engineering unter Verwendung von Blasenschleimhaut aus der transurethralen Resektion der Prostata

Unterschiedliche klinische Zustände können eine Harnblasenvergrößerung oder einen Harnblasenersatz erfordern. Tissue Engineering-Blasen wurden klinisch evaluiert, werden jedoch aufgrund verschiedener Nebenwirkungen nicht empfohlen. Daher besteht ein echtes Interesse an der Entwicklung eines regenerativen Ansatzes mit innovativen Gerüsten und Zelltransplantationen.

Die Forscher schlagen die Verwendung von Urothelzellen vor, die durch transurethrale Resektion der Prostata oder Blase (TURP) gewonnen wurden, um ein durch Gewebezüchtung hergestelltes Urothel in Verbindung mit verschiedenen Gerüsten zu erhalten.

Studienübersicht

Status

Noch keine Rekrutierung

Bedingungen

Intervention / Behandlung

Detaillierte Beschreibung

Blasenbiopsien werden während der Zystoskopie gewonnen, in Kulturmedium (DMEM®) konserviert, durch Dispase verdaut und auf kollagenbeschichtetem Kulturträger ausgesät. Keratinocyte Serum Free Medium (KSFM) wird für die Proliferation verwendet. Während der Passagen werden Mikroskopie, Immunhistochemie, RNA-Extraktion, Reverse Transkription und quantitative Polymerase-Kettenreaktion (RT-qPCR) durchgeführt. Die Zellkulturbedingungen werden optimiert, um die Proliferation zu verbessern und Differenzierungsverluste zu vermeiden. Die Forscher werden Gerüste basierend auf Natriumalginat-Hydrogelen entwickeln, gefolgt von Gefriertrocknung, um poröse Schwämme (bei -20 °C und -80 °C) zu erzeugen. Kultivierte Zellen werden mit diesen ursprünglichen Gerüsten und anderen Gerüsten, beispielsweise Alginat-Hydrogelen oder Collagen Cell Carrier (CCC), assoziiert, für 28 Tage kultiviert und analysiert. Das histologische und immunhistologische Erscheinungsbild zellularisierter Gerüste wird verglichen, um die Wirksamkeit jedes Gerüsts für die Gewebezüchtung im Urothel zu beurteilen.

Zelluläre Gerüste werden in vitro (transepithelialer elektrischer Widerstand, Undurchlässigkeit, Vernähbarkeit, Resistenz gegenüber Urin) und in vivo an ektopischer Stelle (subkutane Stelle bei nackten Mäusen) oder an orthotoper Stelle (Blasenaugmentation bei Kleintieren) untersucht.

Studientyp

Beobachtungs

Einschreibung (Voraussichtlich)

365

Kontakte und Standorte

Dieser Abschnitt enthält die Kontaktdaten derjenigen, die die Studie durchführen, und Informationen darüber, wo diese Studie durchgeführt wird.

Studienkontakt

Studieren Sie die Kontaktsicherung

Teilnahmekriterien

Forscher suchen nach Personen, die einer bestimmten Beschreibung entsprechen, die als Auswahlkriterien bezeichnet werden. Einige Beispiele für diese Kriterien sind der allgemeine Gesundheitszustand einer Person oder frühere Behandlungen.

Zulassungskriterien

Studienberechtigtes Alter

18 Jahre und älter (Erwachsene, Älterer Erwachsener)

Akzeptiert gesunde Freiwillige

Nein

Studienberechtigte Geschlechter

Männlich

Probenahmeverfahren

Nicht-Wahrscheinlichkeitsprobe

Studienpopulation

Männlicher Patient, der eine TURP wegen gutartiger Prostatahyperplasie mit einem präoperativ ermittelten Prostatagewicht von mindestens 30 Gramm benötigt

Beschreibung

Einschlusskriterien:

  • Patient, der eine transurethrale Resektion der Prostata (TURP) benötigt
  • Gewicht der Prostata (bewertet durch Ultraschall) größer oder gleich 30 Gramm
  • Zugehörigkeit zu einem Sozialversicherungssystem
  • Patient über dem Alter der Volljährigkeit
  • Der Patient erhält vollständige Informationen über die Forschungsorganisation ohne Einwände gegen die Verwendung biologischer Proben

Ausschlusskriterien:

  • Patient, bei dem während des endoskopischen Eingriffs keine TURP durchgeführt wird
  • Patient, bei dem keine Resektion am Blasenhals durchgeführt wird
  • Patient mit geschätztem Prostatagewicht unter 30 Gramm
  • Patient, der sich gegen die Durchführung der Studie ausgesprochen hat

Studienplan

Dieser Abschnitt enthält Einzelheiten zum Studienplan, einschließlich des Studiendesigns und der Messung der Studieninhalte.

Wie ist die Studie aufgebaut?

Designdetails

  • Beobachtungsmodelle: Sonstiges
  • Zeitperspektiven: Interessent

Was misst die Studie?

Primäre Ergebnismessungen

Ergebnis Maßnahme
Maßnahmenbeschreibung
Zeitfenster
Histologische Analyse der Biopsie.
Zeitfenster: 6 Monate
Die histologische Analyse mit Standardfärbung wird die Lebensfähigkeit von Urothel beurteilen. Anzeichen einer Nekrose (Ulzerationen, Zerstörungen der Urothelstruktur) werden festgestellt.
6 Monate

Sekundäre Ergebnismessungen

Ergebnis Maßnahme
Maßnahmenbeschreibung
Zeitfenster
Immunhistologische Analyse der Biopsie.
Zeitfenster: 6 Monate
Die immunhistologische Analyse mit spezifischen Antikörpern lokalisiert das Urothel (Keratin, Uroplakin), die glatte Muskulatur (Smooth Muscle Actin), die Prostata (Prostata-spezifisches Antigen).
6 Monate
RT-qPCR-Analyse der Biopsie.
Zeitfenster: 6 Monate
Die RT-qPCR-Analyse misst das Expressionsniveau (im Vergleich zum Housekeeping-Gen RPLP0) von RNA, die für Urothel (Keratin, Uroplakin), die glatte Muskulatur (Glattmuskel-Aktin) und die Prostata (Prostata-spezifisches Antigen) spezifisch ist. Dieses Niveau wird mit kultivierten Urothelzellen verglichen.
6 Monate
Aufschluss der Biopsie und Kultur mit angepasstem Medium. Optimierung der Kulturbedingungen.
Zeitfenster: 12 Monate

Die Biopsie wird mit Dispase verdaut. Die Zellen werden auf kollagenbeschichtete Träger ausgesät und unter Verwendung von Keratinozyten-serumfreiem Medium (KSFM) kultiviert. Die Trypsinierung erfolgt bei Konfluenz.

RT-qPCR (Expressionsniveau jedes spezifischen Markers) wird bei jeder Passage durchgeführt, um die Entwicklung während der Kultur zu beurteilen.
12 Monate
Histologische Analyse der kultivierten Zellen.
Zeitfenster: 12 Monate
Kultivierte Zellen (Ergebnis 4) werden in Kontrastphasenmikroskopie und mit Standardmikroskopiefärbung analysiert, um ihre Morphologie, die Anzahl der Zelltypen und ihre Entwicklung während der Passagen zu beurteilen.
12 Monate
Immunzytologische Analyse der kultivierten Zellen.
Zeitfenster: 12 Monate
Kultivierte Zellen (Ergebnis 4) werden in der Immunzytologie analysiert, um den Zelltyp (Urothel / glatte Muskulatur / Prostata), die Expression und die Lokalisierung spezifischer Marker (Ergebnis 2) zu beurteilen.
12 Monate
RT-qPCR-Analyse der kultivierten Zellen.
Zeitfenster: 12 Monate
Kultivierte Zellen (Ergebnis 4) werden in RT-qPCR bei jeder Passage analysiert, um die Entwicklung während der Kultur zu beurteilen. Das Expressionsniveau (im Vergleich zum Housekeeping-Gen RPLP0) von RNA, die spezifisch für Urothel (Keratin, Uroplakin), die glatte Muskulatur (Smooth Muscle Actin), die Prostata (Prostata-spezifisches Antigen) ist, wird gemessen.
12 Monate
Entwicklung des ursprünglichen gefriergetrockneten Alginatgerüsts
Zeitfenster: 12 Monate

Entwicklung eines Originalgerüsts auf Basis von Natriumalginat-Hydrogelen, gefolgt von Gefriertrocknung zur Erzeugung poröser Schwämme (bei -20 °C und -80 °C).

Analyse der Struktur, Dichtheit, Nähfähigkeit..
12 Monate
Assoziation der kultivierten Zellen mit verschiedenen Scaffolds. Kultur zellularisierter Gerüste.
Zeitfenster: 36 Monate

Zuvor kultivierte und analysierte Zellen werden verschiedenen Gerüsten zugeordnet.

  • Kollagengerüste

  • Alginatgerüste

    • Durch Sprühen erhaltene Alginat-Hydrogele
    • Ursprüngliches gefriergetrocknetes Alginatgerüst (Ergebnis 4) Zellularisierte Gerüste werden mindestens 28 Tage unter Verwendung der zuvor beschriebenen Bedingungen kultiviert.
36 Monate
Histologische Analyse von zellularisierten Gerüsten
Zeitfenster: 36 Monate

Nach der Assoziation werden zellularisierte Gerüste (Ergebnis 9) mindestens 28 Tage lang kultiviert.

Die Überlebensrate wird mithilfe des MTT-Assays durchgeführt. Es wird eine histologische Analyse unter Verwendung von Standardfärbungen durchgeführt, um das Erscheinungsbild des zellularisierten Gerüsts, die Lage, das Erscheinungsbild und die Organisation der Zellen zu bewerten.
36 Monate
Immunhistologische Analyse von zellularisierten Gerüsten
Zeitfenster: 36 Monate

Nach der Assoziation werden zellularisierte Gerüste (Ergebnis 9) mindestens 28 Tage lang kultiviert.

Eine immunhistologische Analyse wird durchgeführt, um die Expression und Lokalisierung spezifischer Marker zu bewerten (Ergebnis 2)
36 Monate
RT-qPCR-Analyse von zellularisierten Gerüsten
Zeitfenster: 36 Monate

Nach der Assoziation werden zellularisierte Gerüste (Ergebnis 9) mindestens 28 Tage lang kultiviert.

RT-qPCR wird durchgeführt, um die Evolution während der Kultur unter dreidimensionalen Bedingungen zu beurteilen. Das Expressionsniveau (im Vergleich zum Housekeeping-Gen RPLP0) von RNA, die spezifisch für Urothel (Keratin, Uroplakin), die glatte Muskulatur (Smooth Muscle Actin), die Prostata (Prostata-spezifisches Antigen) ist, wird gemessen.
36 Monate
Biophysikalische Analyse zellularisierter Gerüste
Zeitfenster: 36 Monate

Nach der Assoziation werden zellularisierte Gerüste (Ergebnis 9) mindestens 28 Tage lang kultiviert.

Biophysikalische Analysen an zellularisierten Gerüsten werden durchgeführt:

  • Transepithelialer elektrischer Widerstand (zelluläre Fähigkeit, eine undurchlässige Barriere zu bilden)
  • Undurchlässigkeit (Fähigkeit des zellularisierten Gerüsts, eine wasserbeständige Barriere zu bilden)
  • Fähigkeit, genäht zu werden (Fähigkeit des zellularisierten Gerüsts, manipuliert und genäht zu werden)
  • Urinresistenz (Fähigkeit des zellularisierten Gerüsts, der chemischen Aggression des Urins zu widerstehen)
36 Monate
Implantation des zellularisierten Gerüsts in Nacktmäusen
Zeitfenster: 12 Monate
Zelluläre Gerüste werden subkutan in Nacktmäuse implantiert. Die Inkubation in vivo erfolgt über mindestens 28 Tage. Eine Analyse (Histologie, Immunhistologie, RT-qPCR) wird nach 28 Tagen Inkubation durchgeführt, um das Überleben der Zellen und das Verhalten des zellularisierten Gerüsts in vivo zu beurteilen. Anzeichen von Nekrose, Neoangiogenese und Entzündung werden festgestellt.
12 Monate
Histologische Analyse von implantierten Scaffolds
Zeitfenster: 12 Monate

Eine histologische Analyse wird nach 28 Tagen Inkubation auf implantierten Gerüsten (Ergebnis 14) durchgeführt, um das Erscheinungsbild des zellularisierten Gerüsts, die Lage, das Erscheinungsbild und die Organisation der Zellen zu bewerten.

Die Überlebensrate wird mithilfe des MTT-Assays durchgeführt. Anzeichen einer Fibrose werden festgestellt.
12 Monate
Immunhistologische Analyse von implantierten Scaffolds
Zeitfenster: 12 Monate
Eine histologische Analyse wird nach 28 Tagen Inkubation auf implantierten Gerüsten (Ergebnis 14) zur Bewertung durchgeführt. Eine immunhistologische Analyse wird durchgeführt, um die Expression und Lokalisierung spezifischer Marker zu bewerten (Ergebnis 2).
12 Monate
RT-qPCR-Analyse von implantierten Scaffolds
Zeitfenster: 12 Monate
Eine RT-qPCR-Analyse wird nach 28 Tagen Inkubation auf implantierten Gerüsten (Ergebnis 14) durchgeführt, um die Evolution unter In-vivo-Bedingungen zu bewerten. Das Expressionsniveau (im Vergleich zum Housekeeping-Gen RPLP0) von RNA, die spezifisch für Urothel (Keratin, Uroplakin), die glatte Muskulatur (Smooth Muscle Actin), die Prostata (Prostata-spezifisches Antigen) ist, wird gemessen.
12 Monate

Mitarbeiter und Ermittler

Hier finden Sie Personen und Organisationen, die an dieser Studie beteiligt sind.

Sponsor

Central Hospital, Nancy, France

Publikationen und hilfreiche Links

Die Bereitstellung dieser Publikationen erfolgt freiwillig durch die für die Eingabe von Informationen über die Studie verantwortliche Person. Diese können sich auf alles beziehen, was mit dem Studium zu tun hat.

Allgemeine Veröffentlichungen

Studienaufzeichnungsdaten

Diese Daten verfolgen den Fortschritt der Übermittlung von Studienaufzeichnungen und zusammenfassenden Ergebnissen an ClinicalTrials.gov. Studienaufzeichnungen und gemeldete Ergebnisse werden von der National Library of Medicine (NLM) überprüft, um sicherzustellen, dass sie bestimmten Qualitätskontrollstandards entsprechen, bevor sie auf der öffentlichen Website veröffentlicht werden.

Haupttermine studieren

Studienbeginn (Voraussichtlich)

1. Oktober 2018

Primärer Abschluss (Voraussichtlich)

1. Oktober 2024

Studienabschluss (Voraussichtlich)

1. Oktober 2026

Studienanmeldedaten

Zuerst eingereicht

17. September 2018

Zuerst eingereicht, das die QC-Kriterien erfüllt hat

4. Oktober 2018

Zuerst gepostet (Tatsächlich)

9. Oktober 2018

Studienaufzeichnungsaktualisierungen

Letztes Update gepostet (Tatsächlich)

9. Oktober 2018

Letztes eingereichtes Update, das die QC-Kriterien erfüllt

4. Oktober 2018

Zuletzt verifiziert

1. September 2018

Mehr Informationen

Begriffe im Zusammenhang mit dieser Studie

Schlüsselwörter

Zusätzliche relevante MeSH-Bedingungen

Andere Studien-ID-Nummern

  • PSS2017/IMOPU-BERTE/MS

Plan für individuelle Teilnehmerdaten (IPD)

Planen Sie, individuelle Teilnehmerdaten (IPD) zu teilen?

Nein

Beschreibung des IPD-Plans

Individuelle Daten sind für diese Studie nicht erforderlich

Arzneimittel- und Geräteinformationen, Studienunterlagen

Studiert ein von der US-amerikanischen FDA reguliertes Arzneimittelprodukt

Nein

Studiert ein von der US-amerikanischen FDA reguliertes Geräteprodukt

Nein

Produkt, das in den USA hergestellt und aus den USA exportiert wird

Nein

Diese Informationen wurden ohne Änderungen direkt von der Website clinicaltrials.gov abgerufen. Wenn Sie Ihre Studiendaten ändern, entfernen oder aktualisieren möchten, wenden Sie sich bitte an register@clinicaltrials.gov. Sobald eine Änderung auf clinicaltrials.gov implementiert wird, wird diese automatisch auch auf unserer Website aktualisiert .

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