Ta strona została przetłumaczona automatycznie i dokładność tłumaczenia nie jest gwarantowana. Proszę odnieść się do angielska wersja za tekst źródłowy.

Inżynieria tkankowa urothelium przy użyciu biopsji z przezcewkowej resekcji gruczołu krokowego (IMOPU)

4 października 2018 zaktualizowane przez: Central Hospital, Nancy, France

Inżynieria tkankowa urothelium z wykorzystaniem błony śluzowej pęcherza moczowego z przezcewkowej resekcji gruczołu krokowego

Różne stany kliniczne mogą wymagać powiększenia lub wymiany pęcherza moczowego. Pęcherz tkankowy został oceniony klinicznie, ale nie jest zalecany ze względu na różnorodne skutki uboczne. Istnieje zatem realne zainteresowanie rozwojem podejścia regeneracyjnego z innowacyjnymi rusztowaniami i przeszczepami komórek.

Badacze proponują wykorzystanie komórek nabłonka dróg moczowych uzyskanych przez przezcewkową resekcję gruczołu krokowego lub pęcherza moczowego (TURP) w celu uzyskania nabłonka dróg moczowych za pomocą inżynierii tkankowej w połączeniu z różnymi rusztowaniami.

Przegląd badań

Status

Jeszcze nie rekrutacja

Warunki

Interwencja / Leczenie

Szczegółowy opis

Podczas cystoskopii zostaną pobrane biopsje pęcherza moczowego, zakonserwowane w pożywce hodowlanej (DMEM®), strawione przez dispazę i wysiane na podłożu hodowlanym pokrytym kolagenem. Do proliferacji zostanie użyte podłoże wolne od surowicy keratynocytów (KSFM). Podczas pasażowania zostaną przeprowadzone badania mikroskopowe, immunohistochemiczne, ekstrakcja RNA, odwrotna transkrypcja i ilościowa reakcja łańcuchowa polimerazy (RT-qPCR). Warunki hodowli komórkowej zostaną zoptymalizowane, aby poprawić proliferację i uniknąć utraty różnicowania. Badacze opracują rusztowania na bazie hydrożeli z alginianu sodu, a następnie liofilizują w celu wytworzenia porowatych gąbek (w temperaturze -20°C i -80°C). Hodowane komórki zostaną połączone z tymi oryginalnymi rusztowaniami i innymi rusztowaniami, na przykład hydrożelami alginianowymi lub nośnikiem komórek kolagenowych (CCC), hodowanymi przez 28 dni i analizowanymi. Histologiczny i immunohistologiczny wygląd rusztowań komórkowych zostanie porównany w celu oceny skuteczności każdego rusztowania w inżynierii tkankowej w nabłonku dróg moczowych.

Rusztowania komórkowe będą badane in vitro (przeznabłonkowa oporność elektryczna, nieprzepuszczalność, zdolność do szycia, odporność na mocz) oraz in vivo w lokalizacji ektopowej (lokalizacja podskórna u nagich myszy) lub ortotopowej (powiększenie pęcherza moczowego u małych zwierząt).

Typ studiów

Obserwacyjny

Zapisy (Oczekiwany)

365

Kontakty i lokalizacje

Ta sekcja zawiera dane kontaktowe osób prowadzących badanie oraz informacje o tym, gdzie badanie jest przeprowadzane.

Kontakt w sprawie studiów

Kopia zapasowa kontaktu do badania

Kryteria uczestnictwa

Badacze szukają osób, które pasują do określonego opisu, zwanego kryteriami kwalifikacyjnymi. Niektóre przykłady tych kryteriów to ogólny stan zdrowia danej osoby lub wcześniejsze leczenie.

Kryteria kwalifikacji

Wiek uprawniający do nauki

18 lat i starsze (Dorosły, Starszy dorosły)

Akceptuje zdrowych ochotników

Nie

Płeć kwalifikująca się do nauki

Męski

Metoda próbkowania

Próbka bez prawdopodobieństwa

Badana populacja

Pacjent płci męskiej wymagający TURP z powodu łagodnego rozrostu gruczołu krokowego z masą gruczołu krokowego ocenioną przed operacją na co najmniej 30 gramów

Opis

Kryteria przyjęcia:

  • Pacjent wymagający przezcewkowej resekcji gruczołu krokowego (TURP)
  • Masa prostaty (oceniana za pomocą ultrasonografii) większa lub równa 30 gramów
  • Przynależność do systemu ubezpieczeń społecznych
  • Pacjent powyżej pełnoletności
  • Pacjent otrzymuje pełną informację o organizacji badań bez sprzeciwu wobec wykorzystania materiału biologicznego

Kryteria wyłączenia:

  • Pacjent, u którego nie wykonuje się TURP podczas zabiegu endoskopowego
  • Pacjent, u którego nie wykonuje się resekcji szyi pęcherza moczowego
  • Pacjent z masą prostaty oszacowaną poniżej 30 gramów
  • Pacjent, który sprzeciwił się realizacji badania

Plan studiów

Ta sekcja zawiera szczegółowe informacje na temat planu badania, w tym sposób zaprojektowania badania i jego pomiary.

Jak projektuje się badanie?

Szczegóły projektu

  • Modele obserwacyjne: Inny
  • Perspektywy czasowe: Spodziewany

Co mierzy badanie?

Podstawowe miary wyniku

Miara wyniku
Opis środka
Ramy czasowe
Analiza histologiczna biopsji.
Ramy czasowe: 6 miesiąc
Analiza histologiczna ze standardowym zabarwieniem oceni żywotność nabłonka dróg moczowych. Odnotowane zostaną objawy martwicy (owrzodzenia, zniszczenia struktury nabłonka dróg moczowych).
6 miesiąc

Miary wyników drugorzędnych

Miara wyniku
Opis środka
Ramy czasowe
Analiza immunohistologiczna biopsji.
Ramy czasowe: 6 miesiąc
Analiza immunohistologiczna z użyciem swoistych przeciwciał zlokalizuje nabłonek dróg moczowych (keratyna, uroplakina), mięśnie gładkie (aktyna mięśni gładkich), gruczoł krokowy (antygen swoisty dla prostaty).
6 miesiąc
Analiza RT-qPCR biopsji.
Ramy czasowe: 6 miesiąc
Analiza RT-qPCR zmierzy poziom ekspresji (w porównaniu z genem metabolizmu podstawowego RPLP0) RNA specyficznego dla nabłonka dróg moczowych (keratyny, uroplakiny), mięśni gładkich (aktyna mięśni gładkich), gruczołu krokowego (antygen swoisty dla prostaty). Ten poziom zostanie porównany z hodowanymi komórkami nabłonka dróg moczowych.
6 miesiąc
Trawienie biopsji i kultura z dostosowanym podłożem. Optymalizacja warunków hodowli.
Ramy czasowe: 12 miesięcy

Biopsja zostanie strawiona przy użyciu dispazy. Komórki zostaną wysiane na nośnikach pokrytych kolagenem i hodowane przy użyciu Keratinocyte Serum Free Medium (KSFM). Trypsynacja zostanie przeprowadzona u zbiegu.

RT-qPCR (poziom ekspresji każdego specyficznego markera) zostanie przeprowadzony przy każdym pasażu, aby ocenić ewolucję podczas hodowli.
12 miesięcy
Analiza histologiczna hodowanych komórek.
Ramy czasowe: 12 miesięcy
Hodowane komórki (Wynik 4) będą analizowane w mikroskopii z kontrastem fazowym i przy standardowym zabarwieniu mikroskopowym, aby ocenić ich morfologię, liczbę typów komórek i ich ewolucję podczas pasaży.
12 miesięcy
Analiza immunocytologiczna hodowanych komórek.
Ramy czasowe: 12 miesięcy
Hodowane komórki (Wynik 4) zostaną poddane analizie immunocytologicznej w celu oceny typu komórek (urotelialnych / mięśni gładkich / prostaty), ekspresji i lokalizacji określonych markerów (Wynik 2)
12 miesięcy
Analiza RT-qPCR hodowanych komórek.
Ramy czasowe: 12 miesięcy
Hodowane komórki (wynik 4) będą analizowane w RT-qPCR przy każdym pasażu, aby ocenić ewolucję podczas hodowli. Zmierzony zostanie poziom ekspresji (w porównaniu z genem metabolizmu podstawowego RPLP0) RNA specyficznego dla nabłonka dróg moczowych (keratyna, uroplakina), mięśni gładkich (aktyna mięśni gładkich), gruczołu krokowego (antygen swoisty dla prostaty).
12 miesięcy
Opracowanie oryginalnego rusztowania liofilizowanego z alginianu
Ramy czasowe: 12 miesięcy

Opracowanie autorskiego rusztowania na bazie hydrożeli z alginianu sodu, a następnie liofilizacja w celu wytworzenia porowatych gąbek (w temperaturze -20°C i -80°C).

Analiza struktury, szczelności, podatności na szycie.
12 miesięcy
Asocjacja hodowanych komórek z różnymi rusztowaniami. Hodowla rusztowań komórkowych.
Ramy czasowe: 36 miesięcy

Wcześniej hodowane i analizowane komórki zostaną połączone z różnymi rusztowaniami.

  • Rusztowania kolagenowe

  • Rusztowania alginianowe

    • Hydrożele alginianowe otrzymywane metodą natryskową
    • Oryginalne rusztowanie liofilizowane z alginianu (Wynik 4) Rusztowania komórkowe będą hodowane przez co najmniej 28 dni w opisanych wcześniej warunkach.
36 miesięcy
Analiza histologiczna rusztowań komórkowych
Ramy czasowe: 36 miesięcy

Po asocjacji, komórkowe rusztowania (Wynik 9) będą hodowane przez co najmniej 28 dni.

Zostanie przeprowadzony wskaźnik przeżywalności przy użyciu testu MTT. Przeprowadzona zostanie analiza histologiczna przy użyciu standardowych barwników w celu oceny wyglądu rusztowania komórkowego, lokalizacji, wyglądu i organizacji komórek.
36 miesięcy
Analiza immunohistologiczna rusztowań komórkowych
Ramy czasowe: 36 miesięcy

Po asocjacji, komórkowe rusztowania (Wynik 9) będą hodowane przez co najmniej 28 dni.

Zostanie przeprowadzona analiza immunohistologiczna w celu oceny ekspresji i lokalizacji określonych markerów (Wynik 2)
36 miesięcy
Analiza RT-qPCR rusztowań komórkowych
Ramy czasowe: 36 miesięcy

Po asocjacji, komórkowe rusztowania (Wynik 9) będą hodowane przez co najmniej 28 dni.

RT-qPCR zostanie przeprowadzony w celu oceny ewolucji podczas hodowli w warunkach trójwymiarowych. Zmierzony zostanie poziom ekspresji (w porównaniu z genem metabolizmu podstawowego RPLP0) RNA specyficznego dla nabłonka dróg moczowych (keratyna, uroplakina), mięśni gładkich (aktyna mięśni gładkich), gruczołu krokowego (antygen swoisty dla prostaty).
36 miesięcy
Analiza biofizyczna rusztowań komórkowych
Ramy czasowe: 36 miesięcy

Po asocjacji, komórkowe rusztowania (Wynik 9) będą hodowane przez co najmniej 28 dni.

Analiza biofizyczna na rusztowaniach komórkowych zostanie przeprowadzona:

  • Przeznabłonkowy opór elektryczny (komórkowa zdolność do tworzenia nieprzepuszczalnej bariery)
  • Nieprzepuszczalność (zdolność rusztowania komórkowego do tworzenia bariery wodoodpornej)
  • Zdolność do zszywania (zdolność do manipulowania i zszywania komórkowego rusztowania)
  • Odporność na mocz (zdolność komórkowego rusztowania do przeciwstawiania się chemicznej agresji moczu)
36 miesięcy
Implantacja rusztowania komórkowego u myszy nagich
Ramy czasowe: 12 miesięcy
Komórkowe rusztowania zostaną wszczepione podskórnie nagim myszom. Inkubacja in vivo będzie prowadzona przez co najmniej 28 dni. Analiza (histologia, immunohistologia, RT-qPCR) zostanie przeprowadzona po 28 dniach inkubacji w celu oceny przeżywalności komórek i zachowania rusztowania z komórkami in vivo. Zostaną odnotowane oznaki martwicy, neoangiogenezy i stanu zapalnego.
12 miesięcy
Analiza histologiczna wszczepionych rusztowań
Ramy czasowe: 12 miesięcy

Analiza histologiczna zostanie przeprowadzona po 28 dniach inkubacji na wszczepionych rusztowaniach (Wynik 14) w celu oceny wyglądu rusztowania komórkowego, lokalizacji, wyglądu i organizacji komórek.

Zostanie przeprowadzony wskaźnik przeżywalności przy użyciu testu MTT. Zostaną odnotowane oznaki zwłóknienia.
12 miesięcy
Analiza immunohistologiczna wszczepionych rusztowań
Ramy czasowe: 12 miesięcy
Analiza histologiczna zostanie przeprowadzona po 28 dniach inkubacji na wszczepionych rusztowaniach (Wynik 14) w celu oceny Analiza immunohistologiczna zostanie przeprowadzona w celu oceny ekspresji i lokalizacji określonych markerów (Wynik 2)
12 miesięcy
Analiza RT-qPCR wszczepionych rusztowań
Ramy czasowe: 12 miesięcy
Analiza RT-qPCR zostanie przeprowadzona po 28 dniach inkubacji na wszczepionych rusztowaniach (Wynik 14) w celu oceny ewolucji w warunkach in vivo. Zmierzony zostanie poziom ekspresji (w porównaniu z genem metabolizmu podstawowego RPLP0) RNA specyficznego dla nabłonka dróg moczowych (keratyna, uroplakina), mięśni gładkich (aktyna mięśni gładkich), gruczołu krokowego (antygen swoisty dla prostaty).
12 miesięcy

Współpracownicy i badacze

Tutaj znajdziesz osoby i organizacje zaangażowane w to badanie.

Sponsor

Central Hospital, Nancy, France

Publikacje i pomocne linki

Osoba odpowiedzialna za wprowadzenie informacji o badaniu dobrowolnie udostępnia te publikacje. Mogą one dotyczyć wszystkiego, co jest związane z badaniem.

Publikacje ogólne

Daty zapisu na studia

Daty te śledzą postęp w przesyłaniu rekordów badań i podsumowań wyników do ClinicalTrials.gov. Zapisy badań i zgłoszone wyniki są przeglądane przez National Library of Medicine (NLM), aby upewnić się, że spełniają określone standardy kontroli jakości, zanim zostaną opublikowane na publicznej stronie internetowej.

Główne daty studiów

Rozpoczęcie studiów (Oczekiwany)

1 października 2018

Zakończenie podstawowe (Oczekiwany)

1 października 2024

Ukończenie studiów (Oczekiwany)

1 października 2026

Daty rejestracji na studia

Pierwszy przesłany

17 września 2018

Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości

4 października 2018

Pierwszy wysłany (Rzeczywisty)

9 października 2018

Aktualizacje rekordów badań

Ostatnia wysłana aktualizacja (Rzeczywisty)

9 października 2018

Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości

4 października 2018

Ostatnia weryfikacja

1 września 2018

Więcej informacji

Terminy związane z tym badaniem

Słowa kluczowe

Dodatkowe istotne warunki MeSH

Inne numery identyfikacyjne badania

  • PSS2017/IMOPU-BERTE/MS

Plan dla danych uczestnika indywidualnego (IPD)

Planujesz udostępniać dane poszczególnych uczestników (IPD)?

Nie

Opis planu IPD

Indywidualne dane nie są potrzebne do tego badania

Informacje o lekach i urządzeniach, dokumenty badawcze

Bada produkt leczniczy regulowany przez amerykańską FDA

Nie

Bada produkt urządzenia regulowany przez amerykańską FDA

Nie

produkt wyprodukowany i wyeksportowany z USA

Nie

Te informacje zostały pobrane bezpośrednio ze strony internetowej clinicaltrials.gov bez żadnych zmian. Jeśli chcesz zmienić, usunąć lub zaktualizować dane swojego badania, skontaktuj się z register@clinicaltrials.gov. Gdy tylko zmiana zostanie wprowadzona na stronie clinicaltrials.gov, zostanie ona automatycznie zaktualizowana również na naszej stronie internetowej .

Subskrybuj