Tato stránka byla automaticky přeložena a přesnost překladu není zaručena. Podívejte se prosím na anglická verze pro zdrojový text.

Urothelové tkáňové inženýrství pomocí biopsií z transuretrální resekce prostaty (IMOPU)

4. října 2018 aktualizováno: Central Hospital, Nancy, France

Urothelové tkáňové inženýrství pomocí sliznice močového měchýře z transuretrální resekce prostaty

Různé klinické stavy mohou vyžadovat augmentaci nebo náhradu močového měchýře. Tkáňově upravený močový měchýř byl klinicky hodnocen, ale nedoporučuje se kvůli různým vedlejším účinkům. Existuje tedy skutečný zájem o rozvoj regenerativního přístupu s inovativním lešením a buněčnou transplantací.

Výzkumníci navrhují použití uroteliálních buněk získaných transuretrální resekcí prostaty nebo močového měchýře (TURP) k získání urotelu upraveného tkáňovým inženýrstvím ve spojení s různými lešeními.

Přehled studie

Postavení

Zatím nenabíráme

Podmínky

Intervence / Léčba

Detailní popis

Biopsie močového měchýře budou získány během cystoskopie, konzervovány v kultivačním médiu (DMEM®), štěpeny dispázou a vysety na kolagenem potaženou kulturu. K proliferaci bude použito médium bez keratinocytového séra (KSFM). Během pasáží bude provedena mikroskopie, imunohistochemie, extrakce RNA, reverzní transkripce a kvantitativní polymerázová řetězová reakce (RT-qPCR). Podmínky buněčné kultury budou optimalizovány, aby se zlepšila proliferace a zabránilo se ztrátě diferenciace. Výzkumníci vyvinou lešení založené na hydrogelech alginátu sodného, ​​po kterém následuje lyofilizace, aby se vytvořily porézní houby (při -20 °C a -80 °C). Kultivované buňky budou spojeny s těmito původními skafoldy a dalšími skafoldy, například alginátovými hydrogely nebo Collagen Cell Carrier (CCC), kultivovány po dobu 28 dnů a analyzovány. Histologický a imunohistologický vzhled celularizovaných skafoldů bude porovnán pro posouzení účinnosti každého skafoldu pro tkáňové inženýrství v urotelu.

Celularizované scaffoldy budou studovány in vitro (transepiteliální elektrická odolnost, nepropustnost, schopnost šití, odolnost vůči moči) a in vivo v ektopické lokalizaci (subkutánní lokalizace u holých myší) nebo v ortotopické lokalizaci (augmentace močového měchýře u malých zvířat).

Typ studie

Pozorovací

Zápis (Očekávaný)

365

Kontakty a umístění

Tato část poskytuje kontaktní údaje pro ty, kteří studii provádějí, a informace o tom, kde se tato studie provádí.

Studijní kontakt

Studijní záloha kontaktů

Kritéria účasti

Výzkumníci hledají lidi, kteří odpovídají určitému popisu, kterému se říká kritéria způsobilosti. Některé příklady těchto kritérií jsou celkový zdravotní stav osoby nebo předchozí léčba.

Kritéria způsobilosti

Věk způsobilý ke studiu

18 let a starší (Dospělý, Starší dospělý)

Přijímá zdravé dobrovolníky

Ne

Pohlaví způsobilá ke studiu

Mužský

Metoda odběru vzorků

Vzorek nepravděpodobnosti

Studijní populace

Mužský pacient vyžadující TURP pro benigní hyperplazii prostaty s hmotností prostaty hodnocenou před operací vyšší nebo rovnou 30 gramům

Popis

Kritéria pro zařazení:

  • Pacient, který potřebuje transuretrální resekci prostaty (TURP)
  • Hmotnost prostaty (vyhodnocená ultrasonograficky) větší nebo rovna 30 gramům
  • Příslušnost k systému sociálního zabezpečení
  • Pacient starší zletilosti
  • Pacient dostává úplné informace o výzkumné organizaci bez odporu k použití biologického vzorku

Kritéria vyloučení:

  • Pacient, u kterého není při endoskopickém výkonu provedena TURP
  • Pacient, u kterého není provedena resekce na hrdle močového měchýře
  • Pacient s hmotností prostaty odhadovanou pod 30 gramů
  • Pacient, který byl proti realizaci studie

Studijní plán

Tato část poskytuje podrobnosti o studijním plánu, včetně toho, jak je studie navržena a co studie měří.

Jak je studie koncipována?

Detaily designu

  • Observační modely: Jiný
  • Časové perspektivy: Budoucí

Co je měření studie?

Primární výstupní opatření

Měření výsledku
Popis opatření
Časové okno
Histologická analýza biopsie.
Časové okno: 6 měsíců
Histologická analýza se standardním zbarvením posoudí životaschopnost urotelu. Budou zaznamenány známky nekrózy (ulcerace, destrukce struktury urotelu).
6 měsíců

Sekundární výstupní opatření

Měření výsledku
Popis opatření
Časové okno
Imunohistologická analýza biopsie.
Časové okno: 6 měsíců
Imunohistologická analýza pomocí specifických protilátek lokalizuje urotel (Keratin, Uroplakin), hladký sval (aktin hladkého svalstva), prostatickou žlázu (Prostatický specifický antigen).
6 měsíců
RT-qPCR analýza biopsie.
Časové okno: 6 měsíců
Analýza RT-qPCR změří úroveň exprese (ve srovnání s housekeepingovým genem RPLP0) RNA specifické pro urotel (keratin, Uroplakin), hladký sval (aktin hladkého svalstva), prostatickou žlázu (prostatický specifický antigen). Tato hladina bude porovnána s kultivovanými uroteliálními buňkami.
6 měsíců
Trávení biopsie a kultivace s adaptovaným médiem. Optimalizace podmínek kultury.
Časové okno: 12 měsíců

Biopsie bude trávena pomocí dispázy. Buňky budou vysety na kolagenem potažené nosiče a kultivovány pomocí média bez keratinocytového séra (KSFM). Trypsinace bude provedena na soutoku.

RT-qPCR (úroveň exprese každého specifického markeru) bude realizována při každé pasáži pro posouzení evoluce během kultivace.
12 měsíců
Histologická analýza kultivovaných buněk.
Časové okno: 12 měsíců
Kultivované buňky (Výsledek 4) budou analyzovány mikroskopií s kontrastní fází a standardním mikroskopickým zbarvením, aby se posoudila jejich morfologie, počet buněčných typů a jejich evoluce v průběhu pasáží.
12 měsíců
Imunocytologická analýza kultivovaných buněk.
Časové okno: 12 měsíců
Kultivované buňky (Výsledek 4) budou analyzovány v imunocytologii za účelem posouzení typu buněk (uroteliální / hladké svalstvo / prostata), exprese a lokalizace specifických markerů (Výsledek 2)
12 měsíců
RT-qPCR analýza kultivovaných buněk.
Časové okno: 12 měsíců
Kultivované buňky (Výsledek 4) budou analyzovány v RT-qPCR při každé pasáži, aby se vyhodnotila evoluce během kultivace. Bude měřena úroveň exprese (ve srovnání s housekeeping genem RPLP0) RNA specifické pro urotel (Keratin, Uroplakin), hladké svalstvo (aktin hladkého svalstva), prostatickou žlázu (Prostatický specifický antigen).
12 měsíců
Vývoj originálního alginátového lyofilizovaného lešení
Časové okno: 12 měsíců

Vývoj originálního lešení založeného na hydrogelech alginátu sodného s následným lyofilizací za vzniku porézních houbiček (při -20 °C a -80 °C).

Analýza struktury, nepropustnosti, schopnosti šití..
12 měsíců
Asociace kultivovaných buněk s různými skafoldy. Kultivace celulárních skafoldů.
Časové okno: 36 měsíců

Dříve kultivované a analyzované buňky budou spojeny s různými skafoldy.

  • Kolagenové lešení

  • Alginátové lešení

    • Alginátové hydrogely získané rozprašováním
    • Původní alginátové lyofilizované scaffoldy (Výsledek 4) Celularizované scaffoldy budou kultivovány alespoň 28 dní za dříve popsaných podmínek.
36 měsíců
Histologická analýza celulárních skafoldů
Časové okno: 36 měsíců

Po asociaci budou celulární skafoldy (Výsledek 9) kultivovány alespoň 28 dní.

Bude provedena míra přežití pomocí testu MTT. Bude provedena histologická analýza za použití standardního zbarvení, aby se vyhodnotil vzhled celulárního lešení, umístění, vzhled a organizace buněk.
36 měsíců
Imunohistologická analýza celulárních skafoldů
Časové okno: 36 měsíců

Po asociaci budou celulární skafoldy (Výsledek 9) kultivovány alespoň 28 dní.

K vyhodnocení exprese a umístění specifických markerů bude provedena imunohistologická analýza (Výsledek 2)
36 měsíců
RT-qPCR analýza celulárních skafoldů
Časové okno: 36 měsíců

Po asociaci budou celulární skafoldy (Výsledek 9) kultivovány alespoň 28 dní.

RT-qPCR bude provedena pro posouzení evoluce během kultivace ve 3-rozměrných podmínkách. Bude měřena úroveň exprese (ve srovnání s housekeeping genem RPLP0) RNA specifické pro urotel (Keratin, Uroplakin), hladké svalstvo (aktin hladkého svalstva), prostatickou žlázu (Prostatický specifický antigen).
36 měsíců
Biofyzikální analýza celulárních scafoldů
Časové okno: 36 měsíců

Po asociaci budou celulární skafoldy (Výsledek 9) kultivovány alespoň 28 dní.

Bude provedena biofyzikální analýza na celulárních skafoldech:

  • Transepiteliální elektrický odpor (buněčná schopnost tvořit nepropustnou bariéru)
  • Nepropustnost (schopnost celulárního lešení vytvořit voděodolnou bariéru)
  • Schopnost sešít (schopnost manipulovat a sešívat celulární lešení)
  • Odolnost vůči moči (schopnost celulárního lešení odolávat chemické agresi moči)
36 měsíců
Implantace celulárního lešení u nahých myší
Časové okno: 12 měsíců
Celularizované scaffoldy budou implantovány do subkutánní oblasti nahým myším. Inkubace in vivo bude probíhat po dobu alespoň 28 dnů. Analýza (histologie, imunohistologie, RT-qPCR) bude provedena po 28 dnech inkubace, aby se vyhodnotilo přežití buněk a chování celulárního lešení in vivo. Budou zaznamenány známky nekrózy, neoangiogeneze a zánětu.
12 měsíců
Histologická analýza implantovaných scafoldů
Časové okno: 12 měsíců

Histologická analýza bude provedena po 28 dnech inkubace na implantovaných skafoldech (Výsledek 14), aby se vyhodnotil vzhled celulárního lešení, umístění, vzhled a organizace buněk.

Bude provedena míra přežití pomocí testu MTT. Budou zaznamenány známky fibrózy.
12 měsíců
Imunohistologická analýza implantovaných scaffoldů
Časové okno: 12 měsíců
Histologická analýza bude provedena po 28 dnech inkubace na implantovaných scaffoldech (Výsledek 14) k vyhodnocení Imunohistologická analýza bude provedena k vyhodnocení exprese a umístění specifických markerů (Výsledek 2)
12 měsíců
RT-qPCR analýza implantovaných skafoldů
Časové okno: 12 měsíců
Analýza RT-qPCR bude provedena po 28 dnech inkubace na implantovaných skafoldech (Výsledek 14), aby se vyhodnotila evoluce během podmínek in vivo. Bude měřena úroveň exprese (ve srovnání s housekeeping genem RPLP0) RNA specifické pro urotel (Keratin, Uroplakin), hladké svalstvo (aktin hladkého svalstva), prostatickou žlázu (Prostatický specifický antigen).
12 měsíců

Spolupracovníci a vyšetřovatelé

Zde najdete lidi a organizace zapojené do této studie.

Sponzor

Central Hospital, Nancy, France

Publikace a užitečné odkazy

Osoba odpovědná za zadávání informací o studiu tyto publikace poskytuje dobrovolně. Mohou se týkat čehokoli, co souvisí se studiem.

Obecné publikace

Termíny studijních záznamů

Tato data sledují průběh záznamů studie a předkládání souhrnných výsledků na ClinicalTrials.gov. Záznamy ze studií a hlášené výsledky jsou před zveřejněním na veřejné webové stránce přezkoumány Národní lékařskou knihovnou (NLM), aby se ujistily, že splňují specifické standardy kontroly kvality.

Hlavní termíny studia

Začátek studia (Očekávaný)

1. října 2018

Primární dokončení (Očekávaný)

1. října 2024

Dokončení studie (Očekávaný)

1. října 2026

Termíny zápisu do studia

První předloženo

17. září 2018

První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality

4. října 2018

První zveřejněno (Aktuální)

9. října 2018

Aktualizace studijních záznamů

Poslední zveřejněná aktualizace (Aktuální)

9. října 2018

Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality

4. října 2018

Naposledy ověřeno

1. září 2018

Více informací

Termíny související s touto studií

Klíčová slova

Další relevantní podmínky MeSH

Další identifikační čísla studie

  • PSS2017/IMOPU-BERTE/MS

Plán pro data jednotlivých účastníků (IPD)

Plánujete sdílet data jednotlivých účastníků (IPD)?

Ne

Popis plánu IPD

Individuální údaje nejsou pro tuto studii nutné

Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty

Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA

Ne

Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA

Ne

produkt vyrobený a vyvážený z USA

Ne

Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .

Klinické studie na Hypospadias

Prohledejte podobné pokusy

Sponzoři a spolupracovníci

Zdravotní podmínky

Drogové intervence

CROs by country

CROs in Macedonia

Podmínky

Vzácné nemoci

Drogové intervence

Doplňky stravy

Sponzor / Spolupracovníci

Místa

3
Předplatit