Darmmikrobiota und viszerale Schmerzen beim chronischen intestinalen Pseudoobstruktionssyndrom (CIPO) (METADOLOMIC)

Ziel der Studie ist es, Metaboliten zu identifizieren, die von der Darmmikrobiota von CIPO-Patienten mit viszeralen Schmerzen unterschiedlich produziert werden, um ihre Wirkung auf den Wirt mit Schwerpunkt auf der Darmhomöostase zu bestimmen.

Dazu werden 3 Proben des Verdauungsausflusses bei pädiatrischen CIPO-Patienten entnommen.

Dann wird die Studie:

1. Charakterisieren Sie die Darmmikrobiota der Verdauungsabwässer von schmerzhaften und nicht schmerzhaften pädiatrischen CIPO-Patienten.
2. Quantifizieren Sie bakterielle Lipide in Verdauungsabwässern von schmerzhaften und nicht schmerzhaften pädiatrischen CIPO-Patienten. In Ileumabwässern werden wir eine absolute Quantifizierung des bakteriellen Lipidoms durchführen. Wir werden kurzkettige Fettsäuren durch Gaschromatographie gekoppelt mit Massenspektrometrie und langkettige beta-hydroxylierte Fettsäuren, GABA-Lipopeptide, Lipoamine sowie primäre und sekundäre Gallensäuren mittels Flüssigkeitschromatographie gekoppelt mit Tandem-Massenspektrometrie quantifizieren.
3. Testen Sie die Funktion dieser bakteriellen Lipide auf die sensorische neuronale Aktivität in einer Primärkultur von Rückenwurzelganglien der Maus. Die Auswirkungen bakterieller Lipide auf sensorische Neuronen werden in einer Primärkultur von Rückenwurzelganglien der Maus untersucht. Wir werden die Kalziummobilisierung in sensorischen Neuronen quantifizieren, die mit den oben identifizierten Lipidverbindungen behandelt werden. In einem zweiten Schritt werden die gleichen Experimente an Neuronen durchgeführt, die durch einen Kalziumkanalrezeptor-Agonisten, TRPV1 (Capsaicin), oder durch eine Mischung von Agonisten (Histamin, Serotonin und Bradykinin) des G-Proteins aktiviert werden, um ihr Hemmpotenzial zu bestimmen. gekoppelte Rezeptoren, die an der viszeralen Überempfindlichkeit beteiligt sind