Microbiota intestinal y dolor visceral en el síndrome de pseudoobstrucción intestinal crónica (CIPO) (METADOLOMIC)

El objetivo del estudio es identificar metabolitos producidos de manera diferencial por la microbiota intestinal de pacientes con CIPO con dolor visceral para determinar su efecto en el huésped con un enfoque en la homeostasis intestinal.

Para ello se recolectarán 3 muestras de efluente digestivo en pacientes pediátricos con CIPO.

Entonces, el estudio:

1. Caracterizar la microbiota intestinal de los efluentes digestivos de pacientes pediátricos con CIPO dolorosos y no dolorosos.
2. Cuantificar los lípidos bacterianos en los efluentes digestivos de pacientes pediátricos con CIPO dolorosos y no dolorosos. En efluentes ileales realizaremos cuantificación absoluta del lipidoma bacteriano. Cuantificaremos ácidos grasos de cadena corta mediante cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas y ácidos grasos beta-hidroxilados de cadena larga, lipopéptidos GABA, lipoaminas y ácidos biliares primarios y secundarios mediante cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas en tándem.
3. Pruebe la función de estos lípidos bacterianos sobre la actividad neuronal sensorial en un cultivo primario de ganglios de la raíz dorsal de ratón. Los efectos de los lípidos bacterianos sobre las neuronas sensoriales se evaluarán en un cultivo primario de ganglios de la raíz dorsal de ratón. Cuantificaremos la movilización de calcio en neuronas sensoriales tratadas con los compuestos lipídicos identificados anteriormente. En un segundo paso, para determinar su potencial inhibidor, se realizarán los mismos experimentos en neuronas activadas por un agonista del receptor de los canales de calcio, TRPV1 (capsaicina) o por una mezcla de agonistas (histamina, serotonina y bradicinina) de la proteína G. Receptores acoplados implicados en la hipersensibilidad visceral.