Microbiota intestinale e dolore viscerale nella sindrome da pseudo-ostruzione intestinale cronica (CIPO) (METADOLOMIC)

Lo scopo dello studio è identificare i metaboliti prodotti in modo differenziale dal microbiota intestinale dei pazienti CIPO con dolore viscerale per determinare il loro effetto sull'ospite con particolare attenzione all'omeostasi intestinale.

Per questo, 3 campioni di effluenti digestivi saranno raccolti in pazienti pediatrici con CIPO.

Quindi, lo studio:

1. Caratterizzare il microbiota intestinale degli effluenti digestivi di pazienti pediatrici CIPO dolorosi e non dolorosi.
2. Quantificare i lipidi batterici negli effluenti digestivi di pazienti pediatrici CIPO dolorosi e non dolorosi. Negli effluenti ileali eseguiremo la quantificazione assoluta del lipidoma batterico. Quantificheremo gli acidi grassi a catena corta mediante gascromatografia accoppiata con spettrometria di massa e gli acidi grassi beta-idrossilati a catena lunga, lipopeptidi GABA, lipoammine e acidi biliari primari e secondari mediante cromatografia liquida accoppiata con spettrometria di massa tandem.
3. Testare la funzione di questi lipidi batterici sull'attività neuronale sensoriale in una coltura primaria di gangli della radice dorsale del topo. Gli effetti dei lipidi batterici sui neuroni sensoriali saranno valutati in una coltura primaria di gangli della radice dorsale di topo. Quantificheremo la mobilizzazione del calcio nei neuroni sensoriali trattati con i composti lipidici sopra identificati. In una seconda fase, per determinarne il potenziale inibitorio, gli stessi esperimenti verranno eseguiti su neuroni attivati ​​da un agonista del recettore dei canali del calcio, TRPV1 (capsaicina) o da un mix di agonisti (istamina, serotonina e bradichinina) della proteina G- recettori accoppiati coinvolti nell’ipersensibilità viscerale