Tratamiento con azitromicina para la lectura completa de las mutaciones del codón de terminación del gen APC en la poliposis adenomatosa familiar (FAP)

El cáncer colorrectal (CCR) es una de las principales causas de mortalidad relacionada con el cáncer en el mundo occidental, con un riesgo de por vida del 6 %. La etiología es compleja, mientras que los antecedentes genéticos afectan significativamente el riesgo. Alrededor de un tercio de todos los trastornos genéticos, así como la mayoría de los casos de poliposis adenomatosa familiar (PAF) y una gran proporción de todos los casos de CCR esporádicos se producen como resultado de mutaciones prematuras sin sentido (que crean un codón de terminación) en la poliposis coli adenomatosa de un individuo (APC). ) gen. Las mutaciones sin sentido son alteraciones de un solo punto en el ADN que detienen prematuramente el proceso de traducción de la proteína, produciendo una proteína acortada y no funcional. En muchos de estos casos, si se puede "persuadir" a la célula para que ignore la señal prematura del codón de parada, la proteína resultante puede mejorar o detener la enfermedad.

Recientemente, se ha descubierto que los miembros de la familia de antibióticos aminoglucósidos inducen la lectura ribosómica de mutaciones sin sentido, lo que conduce a la expresión de una proteína funcional de longitud completa. Los investigadores han demostrado recientemente que los miembros de las familias de antibióticos aminoglucósidos y macrólidos pueden inducir la lectura de mutaciones sin sentido en el gen APC y conducir a fenotipos oncogénicos reducidos en células CRC y en diferentes modelos de ratones.

El objetivo de este proyecto es determinar la capacidad del antibiótico macrólido azitromicina para inducir la lectura completa de las mutaciones sin sentido en el gen APC e inducir la expresión de una proteína APC funcional de longitud completa en pacientes que padecen FAP y probar su efecto sobre el número y tamaño de los adenomas y sobre los tumores desmoides en estos pacientes. El objetivo futuro es maximizar el efecto de los supresores de codón de parada en APC y minimizar los efectos secundarios.

En este estudio, los investigadores seleccionarán pacientes con FAP que porten mutaciones sin sentido de APC, los tratarán con azitromicina oral durante 4 a 6 meses y examinarán los adenomas colónicos y duodenales, así como los tumores desmoides abdominales, que se documentarán antes, durante y después del tratamiento. Paralelamente, los investigadores analizarán muestras de pólipos, adenomas y tejidos desmoides, así como muestras de sangre de estos pacientes para detectar cambios en los niveles de expresión de la proteína APC y marcadores oncogénicos relacionados.

La supresión de mutaciones sin sentido dentro del gen APC debería ser beneficiosa para pacientes que padecen PAF, PAF atenuada o adenomas múltiples y para pacientes con CCR avanzado o difuso. Además, dado el rápido progreso que se está logrando en la identificación de diferentes mutaciones sin sentido en genes humanos que conducen a enfermedades en su mayoría no curables, la identificación de compuestos clínicamente aprobados que supriman las mutaciones sin sentido y que puedan administrarse a largo plazo sin efectos secundarios significativos abrir nuevos caminos en el tratamiento de enfermedades humanas genéticas que surgen de codones de parada prematuros en secuencias de codificación importantes.

Objetivo inmediato: establecer la capacidad de la azitromicina para leer la mutación sin sentido de APC en pacientes con PAF. El efecto de lectura de azitromicina se evaluará clínicamente contando y midiendo el número y el tamaño de los adenomas colónicos y duodenales antes y durante el tratamiento y midiendo el tamaño de los tumores desmoides conocidos. Las muestras de adenomas y tumores desmoides se analizarán mediante western blot, inmunofluorescencia e inmunohistoquímica para restaurar la expresión de APC y cambios en los marcadores oncogénicos. Estos experimentos deben llevarse a cabo dentro de los 6 meses.

Objetivo a largo plazo:

1. Determinar la dosis más baja de azitromicina que puede inhibir el crecimiento de neoplasia colónica y CCR en pacientes que expresan una proteína APC truncada debido a mutaciones sin sentido.
2. Examine la capacidad de un panel de antibióticos macrólidos adicionales para inducir la supresión de mutaciones sin sentido de APC mediante métodos in vitro. Los investigadores se centrarán en los antibióticos macrólidos que se encuentran actualmente en uso clínico y se administran a largo plazo. Estos objetivos deberían tomar alrededor de 4 meses y se llevarán a cabo en paralelo.