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Effect of in Vitro Blocking the Common Beta Chain on Cell Viability in Asthma

10 de julio de 2017 actualizado por: Hamilton Health Sciences Corporation

Effect of in Vitro Blocking the Common Beta Chain on the Function of Blood, Bone Marrow and Sputum Cells Collected From Asthmatic Donors.

This study examines in vitro blockade of signaling through the β-chain, on viability, activation and differentiation of eosinophils and their progenitors collected in sputum, blood and bone marrow samples pre and post-allergen challenge from mild atopic asthmatic subjects.

Descripción general del estudio

Estado

Terminado

Condiciones

Intervención / Tratamiento

Descripción detallada

The experiments will use sputum samples induced from subjects with mild asthma, undergoing allergen inhalation challenges. In general, each sample will be composed of >10% neutrophils and >10% macrophages. Samples collected pre-allergen will have a low frequency of eosinophils and lymphocytes (<1%), however the percentage of eosinophils will increase to approximately 12% following allergen challenges. The sputum samples will be processed in DPBS (without dithiothreitol), and the cell suspension will be adjusted to 1 million cells/ml in DMEM with penicillin and streptomycin. A cytospin will be made for differential cell counts. The mixed cell population at 5 million cells/ml will be incubated for 48 hours at 37 degrees Celcius ± β-chain MAb at a concentration of 100 mcg/ml. After 48 hours the cell culture medium will be removed for assay of cytokines and chemokines by ELISA. Cells will be resuspended in PBS and Binding Buffer (BD Pharmingen, Cat no. 556454),stained for assessments by flow cytometry, and analyzed in duplicate.

Experiments will use blood (80 ml) and bone marrow aspirates (5ml) from atopic asthmatics taken pre and 24hr post allergen challenge. Methylcult micro-culture colonogenic assays will be performed to enumerate outgrowth of Eo/Baso-CFU and GM-CFU from CD34+ cells populations collected from the blood and bone marrow samples. Methylcult assays will be performed with CD34+ enriched cell populations in the presence of IL-5,IL-3 and GM-CSF +/- CSL311. Following 14 days culture, colonies will be enumerated.

Tipo de estudio

De observación

Inscripción (Actual)

10

Contactos y Ubicaciones

Esta sección proporciona los datos de contacto de quienes realizan el estudio e información sobre dónde se lleva a cabo este estudio.

Ubicaciones de estudio

    • Ontario
      • Hamilton, Ontario, Canadá, L8N 3Z5
        • McMaster University Medical Center

Criterios de participación

Los investigadores buscan personas que se ajusten a una determinada descripción, denominada criterio de elegibilidad. Algunos ejemplos de estos criterios son el estado de salud general de una persona o tratamientos previos.

Criterio de elegibilidad

Edades elegibles para estudiar

18 años a 65 años (Adulto, Adulto Mayor)

Acepta Voluntarios Saludables

No

Géneros elegibles para el estudio

Todos

Método de muestreo

Muestra de probabilidad

Población de estudio

Subjects with mild allergic asthma.

Descripción

Inclusion Criteria:

  • Male and female volunteers 18 through 65 years of age.
  • General good health
  • Mild to moderate, stable, allergic asthma
  • History of episodic wheeze and shortness of breath; FEV1 at baseline at least 70% of the predicted value
  • Able to understand and give written informed consent and has signed a written informed consent form approved by the investigator's REB
  • Positive methacholine challenge
  • Positive skin-prick test to common aeroallergens (including cat, dust mite, grass, pollen)
  • Positive allergen-induced airway bronchoconstriction (a fall in FEV1 of at least 20% from baseline)

Exclusion Criteria:

  • A worsening of asthma or a respiratory tract infection within 6 weeks preceding study entry
  • Use of corticosteroids, immunosuppressives, anticoagulants (warfarin or heparin) within 28 days prior to randomization into the study
  • Use of nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) within 48 hours of dosing or aspirin with 7 days of dosing
  • Have chronic use of any other medication for treatment of allergic lung disease other than short- and intermediate-acting ß2-agonists or ipratropium bromide
  • Use of caffeine-containing products or medications for 12 hours or alcohol or over the counter drugs including aspirin, cold and allergy medications for 48 hours or inhaled bronchodilators for 8 hours prior to methacholine and allergen challenges
  • Use of tobacco products of any kind currently or within the previous 12 months, or smoking history > 10 pack years.
  • Lung disease other than mild to moderate allergic asthma
  • Unwillingness or inability to comply with the study protocol for any other reason.

Plan de estudios

Esta sección proporciona detalles del plan de estudio, incluido cómo está diseñado el estudio y qué mide el estudio.

¿Cómo está diseñado el estudio?

Detalles de diseño

  • Modelos observacionales: Grupo
  • Perspectivas temporales: Futuro

Cohortes e Intervenciones

Grupo / Cohorte
Intervención / Tratamiento
Allergen challenge
Determination of the effects of a β-chain monoclonal antibody (MAb) on the function of cells naturally activated by in vivo allergen exposure, from donors with allergen-induced asthma
Allergen extract is administered by inhalation.

¿Qué mide el estudio?

Medidas de resultado primarias

Medida de resultado
Medida Descripción
Periodo de tiempo
Sputum Collection
Periodo de tiempo: 7 hours post allergen
Three baseline sample collections will ensure sufficient numbers of cells are collected for proposed outcomes. Post allergen cells will be examined at time points when these populations are known to be at their highest frequency.
7 hours post allergen

Colaboradores e Investigadores

Aquí es donde encontrará personas y organizaciones involucradas en este estudio.

Colaboradores

Investigadores

  • Investigador principal: Gail M Gauvreau, PhD, Hamilton Health Sciences Corporation

Publicaciones y enlaces útiles

La persona responsable de ingresar información sobre el estudio proporciona voluntariamente estas publicaciones. Estos pueden ser sobre cualquier cosa relacionada con el estudio.

Enlaces Útiles

Fechas de registro del estudio

Estas fechas rastrean el progreso del registro del estudio y los envíos de resultados resumidos a ClinicalTrials.gov. Los registros del estudio y los resultados informados son revisados ​​por la Biblioteca Nacional de Medicina (NLM) para asegurarse de que cumplan con los estándares de control de calidad específicos antes de publicarlos en el sitio web público.

Fechas importantes del estudio

Inicio del estudio

1 de noviembre de 2012

Finalización primaria (Actual)

1 de septiembre de 2014

Finalización del estudio (Actual)

1 de septiembre de 2014

Fechas de registro del estudio

Enviado por primera vez

17 de diciembre de 2012

Primero enviado que cumplió con los criterios de control de calidad

27 de diciembre de 2012

Publicado por primera vez (Estimar)

3 de enero de 2013

Actualizaciones de registros de estudio

Última actualización publicada (Actual)

13 de julio de 2017

Última actualización enviada que cumplió con los criterios de control de calidad

10 de julio de 2017

Última verificación

1 de julio de 2017

Más información

Términos relacionados con este estudio

Plan de datos de participantes individuales (IPD)

¿Planea compartir datos de participantes individuales (IPD)?

No

Información sobre medicamentos y dispositivos, documentos del estudio

Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.

No

Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.

No

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