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Effect of in Vitro Blocking the Common Beta Chain on Cell Viability in Asthma

10 luglio 2017 aggiornato da: Hamilton Health Sciences Corporation

Effect of in Vitro Blocking the Common Beta Chain on the Function of Blood, Bone Marrow and Sputum Cells Collected From Asthmatic Donors.

This study examines in vitro blockade of signaling through the β-chain, on viability, activation and differentiation of eosinophils and their progenitors collected in sputum, blood and bone marrow samples pre and post-allergen challenge from mild atopic asthmatic subjects.

Panoramica dello studio

Stato

Completato

Condizioni

Intervento / Trattamento

Descrizione dettagliata

The experiments will use sputum samples induced from subjects with mild asthma, undergoing allergen inhalation challenges. In general, each sample will be composed of >10% neutrophils and >10% macrophages. Samples collected pre-allergen will have a low frequency of eosinophils and lymphocytes (<1%), however the percentage of eosinophils will increase to approximately 12% following allergen challenges. The sputum samples will be processed in DPBS (without dithiothreitol), and the cell suspension will be adjusted to 1 million cells/ml in DMEM with penicillin and streptomycin. A cytospin will be made for differential cell counts. The mixed cell population at 5 million cells/ml will be incubated for 48 hours at 37 degrees Celcius ± β-chain MAb at a concentration of 100 mcg/ml. After 48 hours the cell culture medium will be removed for assay of cytokines and chemokines by ELISA. Cells will be resuspended in PBS and Binding Buffer (BD Pharmingen, Cat no. 556454),stained for assessments by flow cytometry, and analyzed in duplicate.

Experiments will use blood (80 ml) and bone marrow aspirates (5ml) from atopic asthmatics taken pre and 24hr post allergen challenge. Methylcult micro-culture colonogenic assays will be performed to enumerate outgrowth of Eo/Baso-CFU and GM-CFU from CD34+ cells populations collected from the blood and bone marrow samples. Methylcult assays will be performed with CD34+ enriched cell populations in the presence of IL-5,IL-3 and GM-CSF +/- CSL311. Following 14 days culture, colonies will be enumerated.

Tipo di studio

Osservativo

Iscrizione (Effettivo)

10

Contatti e Sedi

Questa sezione fornisce i recapiti di coloro che conducono lo studio e informazioni su dove viene condotto lo studio.

Luoghi di studio

    • Ontario
      • Hamilton, Ontario, Canada, L8N 3Z5
        • McMaster University Medical Center

Criteri di partecipazione

I ricercatori cercano persone che corrispondano a una certa descrizione, chiamata criteri di ammissibilità. Alcuni esempi di questi criteri sono le condizioni generali di salute di una persona o trattamenti precedenti.

Criteri di ammissibilità

Età idonea allo studio

Da 18 anni a 65 anni (Adulto, Adulto più anziano)

Accetta volontari sani

No

Sessi ammissibili allo studio

Tutto

Metodo di campionamento

Campione di probabilità

Popolazione di studio

Subjects with mild allergic asthma.

Descrizione

Inclusion Criteria:

  • Male and female volunteers 18 through 65 years of age.
  • General good health
  • Mild to moderate, stable, allergic asthma
  • History of episodic wheeze and shortness of breath; FEV1 at baseline at least 70% of the predicted value
  • Able to understand and give written informed consent and has signed a written informed consent form approved by the investigator's REB
  • Positive methacholine challenge
  • Positive skin-prick test to common aeroallergens (including cat, dust mite, grass, pollen)
  • Positive allergen-induced airway bronchoconstriction (a fall in FEV1 of at least 20% from baseline)

Exclusion Criteria:

  • A worsening of asthma or a respiratory tract infection within 6 weeks preceding study entry
  • Use of corticosteroids, immunosuppressives, anticoagulants (warfarin or heparin) within 28 days prior to randomization into the study
  • Use of nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) within 48 hours of dosing or aspirin with 7 days of dosing
  • Have chronic use of any other medication for treatment of allergic lung disease other than short- and intermediate-acting ß2-agonists or ipratropium bromide
  • Use of caffeine-containing products or medications for 12 hours or alcohol or over the counter drugs including aspirin, cold and allergy medications for 48 hours or inhaled bronchodilators for 8 hours prior to methacholine and allergen challenges
  • Use of tobacco products of any kind currently or within the previous 12 months, or smoking history > 10 pack years.
  • Lung disease other than mild to moderate allergic asthma
  • Unwillingness or inability to comply with the study protocol for any other reason.

Piano di studio

Questa sezione fornisce i dettagli del piano di studio, compreso il modo in cui lo studio è progettato e ciò che lo studio sta misurando.

Come è strutturato lo studio?

Dettagli di progettazione

  • Modelli osservazionali: Coorte
  • Prospettive temporali: Prospettiva

Coorti e interventi

Gruppo / Coorte
Intervento / Trattamento
Allergen challenge
Determination of the effects of a β-chain monoclonal antibody (MAb) on the function of cells naturally activated by in vivo allergen exposure, from donors with allergen-induced asthma
Allergen extract is administered by inhalation.

Cosa sta misurando lo studio?

Misure di risultato primarie

Misura del risultato
Misura Descrizione
Lasso di tempo
Sputum Collection
Lasso di tempo: 7 hours post allergen
Three baseline sample collections will ensure sufficient numbers of cells are collected for proposed outcomes. Post allergen cells will be examined at time points when these populations are known to be at their highest frequency.
7 hours post allergen

Collaboratori e investigatori

Qui è dove troverai le persone e le organizzazioni coinvolte in questo studio.

Collaboratori

Investigatori

  • Investigatore principale: Gail M Gauvreau, PhD, Hamilton Health Sciences Corporation

Pubblicazioni e link utili

La persona responsabile dell'inserimento delle informazioni sullo studio fornisce volontariamente queste pubblicazioni. Questi possono riguardare qualsiasi cosa relativa allo studio.

Collegamenti utili

Studiare le date dei record

Queste date tengono traccia dell'avanzamento della registrazione dello studio e dell'invio dei risultati di sintesi a ClinicalTrials.gov. I record degli studi e i risultati riportati vengono esaminati dalla National Library of Medicine (NLM) per assicurarsi che soddisfino specifici standard di controllo della qualità prima di essere pubblicati sul sito Web pubblico.

Studia le date principali

Inizio studio

1 novembre 2012

Completamento primario (Effettivo)

1 settembre 2014

Completamento dello studio (Effettivo)

1 settembre 2014

Date di iscrizione allo studio

Primo inviato

17 dicembre 2012

Primo inviato che soddisfa i criteri di controllo qualità

27 dicembre 2012

Primo Inserito (Stima)

3 gennaio 2013

Aggiornamenti dei record di studio

Ultimo aggiornamento pubblicato (Effettivo)

13 luglio 2017

Ultimo aggiornamento inviato che soddisfa i criteri QC

10 luglio 2017

Ultimo verificato

1 luglio 2017

Maggiori informazioni

Termini relativi a questo studio

Piano per i dati dei singoli partecipanti (IPD)

Hai intenzione di condividere i dati dei singoli partecipanti (IPD)?

No

Informazioni su farmaci e dispositivi, documenti di studio

Studia un prodotto farmaceutico regolamentato dalla FDA degli Stati Uniti

No

Studia un dispositivo regolamentato dalla FDA degli Stati Uniti

No

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Prove cliniche su Allergen

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