Trasplante de microbiota fecal como estrategia terapéutica para pacientes infectados por el VIH

Diseño del estudio: Estudio prospectivo controlado experimental comparativo Duración del estudio: 1 año Número de pacientes a inscribir: 20 pacientes. Después de ser aleatorizados, los pacientes seleccionados que cumplan los criterios de inclusión y exclusión serán asignados 1:1 en dos grupos. Un grupo iniciará tratamiento con FMT a través de cápsulas congeladas, y ART al mismo tiempo; y otro grupo protagonizará cápsulas de placebo y ART.

Las cápsulas congeladas se ingerirán por vía oral con una frecuencia de 15 cápsulas cada 12 horas durante cuatro dosis 7 días antes del inicio del TAR y en las semanas 0, 4, 8 y 12 después del inicio del TAR. Cada cápsula debe ser ingerida en un período no mayor a 1 hora de la cápsula anterior.

Posteriormente se tomarán muestras de sangre mediante punción venosa periférica con extracción de 10 ml de sangre venosa para monitorizar el estado inmunológico con linfocitos T CD4 y carga viral VIH. Se tomarán un total de 4 muestras de sangre durante las semanas 4, 8, 12 y 24 después del inicio del TAR.

Las consultas médicas se realizarán cada 4 semanas, en los días -7 días previos al inicio de la TARV, día 1, 30, 60, 90 y 120 donde se verifiquen signos vitales, síntomas o signos de órganos, determinación de peso, IMC, efectos adversos y criterios de eliminación. se evaluará.

Además, se tomarán muestras de heces de cada paciente durante la consulta médica en la semana 0, 8 y 24 tras el inicio de la TARV para evaluar la modificación del microbioma intestinal tras la intervención en ambos grupos.

Durante el período de estudio, los sujetos pueden llevar una dieta libre, una ingesta moderada de alcohol y realizar sus actividades diarias, ya que se abstienen de cualquiera de los criterios de eliminación.

El estudio tendrá una duración de 1 año y las muestras tomadas serán congeladas y almacenadas en el Departamento de Enfermedades Infecciosas del Hospital.

Selección de donantes de Microbiota Fecal:

La selección de donantes de microbiota fecal se basa en:

• Antecedentes médicos, peso corporal, sin uso de medicamentos como antibióticos e inhibidores de la bomba de protones, sin viajes y sin diarrea 6 meses antes de la donación.
• La ausencia de infecciones crónicas como Hepatitis B, Hepatitis C y VIH determinada por inmunoensayo.
• Test Rosa de Bengala negativo y V.D.R.L.
• Hemograma completo y pruebas de función hepática normales.

Análisis de muestras fecales:

1. Análisis de microscopía fresca para detectar leucocitos y parásitos (incluidos protozoos y helmintos)
2. Coprocultivo para descartar la presencia de enteropatógenos, incluyendo Salmonella spp., Shigella spp., Aeromonas spp., Plesiomonas spp., Vibrio spp. y Clostridiodes difficile.

3. Panel gastrointestinal por reacción en cadena de polimerasa múltiple (PCR) usando BioFire Filmarray que incluye la detección de:

   Bacterias: Campylobacter (C. jejuni, C. coi, C. upsaliensis), Clostridiodes difficile (toxinas A/B), Plesiomonas shigelloides, Salmonella spp., Yersinia enterocolitica, Vibrio (V. parahaemolítico, V. vulnificus y V. cholerae), Escherichia coli O157: H7, E. coli enteroagregativa (EAEC), E. coli enteropatógena (EPEC), E. coli enterotoxigénica (ETEC), E. coli productora de toxina Shiga (STEC) stx1 / stx2, Shigella sp. E. coli enteroinvasiva (EIEC).

   Virus: Adenovirus F 40/41, Astrovirus, Norovirus GI/GII, Rotavirus A, Sapovirus (I, II, IV y V) Parásitos: Cryptosporidium sp., Cyclospora cayetanensis, Entamoeba histolytica y Giardia lamblia.

4. Detección de genes asociados con la resistencia a los medicamentos por PCR de punto final; incluidos genes que codifican betalactamasas de espectro extendido (TEM, CTX; SHV, CMY) y carbapenemasas (VIM, NDM, IMP, KPC, OXA-48).

Una vez superadas todas las etapas de evaluación sólo se seleccionan como donantes los sujetos negativos a todas las pruebas y en los que no hay evidencia de infección. Los escrutinios y exámenes de laboratorio se consideran válidos durante las siguientes 4 semanas, por lo que si se requiere nueva donación de heces, se realizará nuevamente el proceso.

Preparación de la muestra microbiota fecal Todas las muestras se mezclarán con glicerol al 10% y se congelarán a -70°C en un periodo no superior a 60 minutos desde su recogida. Se mezclarán y luego se suspenderán en solución salina al 0,9%. La mezcla final se filtrará para eliminar partículas mayores de 330 micras, añadiendo finalmente glicerol como crioprotector. Esta mezcla se lleva al proceso de encapsulación utilizando cápsulas estériles para liberación enteral, en dos tamaños. La primera cápsula se llena con una mezcla de heces y se sella con su contraparte, y luego la cápsula sellada se encapsula en una segunda cápsula. El producto final se almacena congelado hasta 60 minutos antes de su uso. La administración sólo será oral.