Ritmos circadianos en adiposo humano

Esta propuesta abordará 3 objetivos principales: 1) determinar el impacto de endógeno en los ritmos circadianos en la función independiente de la entrega de nutrientes diurnos en humanos, 2) determinar el impacto de la obesidad central central en el reloj circadiano de adipocitos y 3) establecer para la primera vez que el cistroma específico de adipocitos humanos in vivo de los factores de transcripción del reloj circadiano, BMAL1 y el reloj. Para comprender si los adipocitos tienen un arrastre intrínseco de reloj circadiano que está separado del arrastre de alimentos, compararemos la ritmicidad de los voluntarios delgados estudiados bajo paradigmas de alimentación continuos versus intermitentes. 20 adultos de peso normal (M/F = 10/10, divididos uniformemente entre los grupos de alimentación) se asignarán al azar para recibir alimentaciones "continuas" (Cont) a través de un tubo de alimentación nasogástrico (NG) o recibir 3 comidas al día para el estudio "intermitente" (inter), también entregada a través de tubo ng. El examen anterior a la visita al estudio de pacientes hospitalizados incluirá signos vitales, altura, peso, cadera/cintura/circunferencia del cuello, perfil lipídico plasmático de composición corporal (escaneo Dexa) y glucosa en ayunas. Los voluntarios potenciales completarán cuestionarios para excluir los trastornos del sueño y asegurar los hábitos de sueño normales. Durante 3 días antes y durante el estudio de hospitalización, se requerirá que los voluntarios usen un Actiwatch de 24 h/día; que mide objetivamente la calidad y cantidad del sueño las 24 horas. (Ver metodología detallada).

Para la visita a los pacientes hospitalizados, los voluntarios serán ingresados ​​en la Unidad de Investigación y Ensayos Clínicos de Mayo Clinic (CRTU) a las 1500 h, donde se colocará un tubo NG. Después de las muestras de sangre de línea de base, el grupo de alimentación Cont comenzará a alimentar líquidos (garantizar más®) a 1800 y continuará durante las próximas ~ 37 horas. Esto proporcionará 12 h de alimentación continua antes del primer abdominal en biopsias; Esta duración de la alimentación continua abole las amplias fluctuaciones en la insulina plasmática que ocurre con las comidas normales y evitará la respuesta lipolítica progresiva que ocurriría si el ayuno se usara como diseño experimental. FFA durante la alimentación isocalórica y continua está dentro de la variabilidad intradía normal. Los participantes aleatorizados a Inter recibirán 1/3 de sus necesidades de energía diaria en cada "comida" a través de Tube NG. Estas alimentaciones se administrarán a 1800 hy 3 comidas separadas al día siguiente. Los participantes se someterán a medidas de gasto de energía en reposo después del período nocturno para interpretar adecuadamente los datos de FFA RA.

Para evitar recuperar en la muestra de sitios de biopsia previamente interrumpidos, cada participante se limitará a 4 biopsias de tejido adiposo abdominal (1 por cuadrante abdominal). Para garantizar las 24 horas completas de datos, todos los participantes tendrán biopsias a: 0600, 1800 y 0600 al día siguiente, la mitad de los participantes tendrán una biopsia a 1200 y la otra mitad a 2400. Este híbrido (seccional de cruce vinculado) nos permitirá probar en serie de varias personas y luego crear medios de grupo de muestra para tener en cuenta los números de biopsia dispares. Estamos muestras del tejido adiposo abdominal, ya que esta es la fuente principal de FFA circulante en humanos y, por lo tanto, es el más probable para nosotros para determinar la regulación de las proteínas de lipólisis.