LiveSpo Navaxin teho keuhkokuumeen tukihoidossa lapsilla, joilla on RSV ja bakteerien aiheuttama rinnakkaisinfektio

Keuhkokuume on yleinen lasten sairaus ja yksi pienten lasten, erityisesti alle 1-vuotiaiden, imeväisten ja aliravittujen lasten yleisimmistä kuolinsyistä. Maailman terveysjärjestön (WHO) mukaan arviolta 12,9 miljoonaa lasta kuolee vuosittain, ja 4,3 miljoonaa (33,4 %) näistä kuolemista johtuu keuhkokuumeesta. Vietnamissa kuolleisuus keuhkokuumeeseen on korkein hengitystiesairauksista (75 %), kun kokonaiskuolleisuus on 30-35 %. Tilastot osoittavat, että lapsi voi kokea keskimäärin 3–5 akuuttia hengitystieinfektiota vuodessa, mukaan lukien 1–2 keuhkokuumejaksoa. Respiratory syncytial virus (RSV) -infektio ja bakteerien aiheuttama rinnakkaisinfektio ovat vakavien keuhkokuumeiden pääasiallisia syitä, ja yhteisinfektioiden määrä voi vaihdella 26,3–43,6 prosentin välillä. Yleisesti liittyviä bakteereja ovat Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Staphylococcus aureus ja Moraxella catarrhalis. Nämä bakteerit voivat tunkeutua alempiin hengitysteihin ja aiheuttaa toissijaisia ​​infektioita hyödyntäen RSV:n aiheuttamia hengitystievaurioita.

Tällä hetkellä RSV-infektiota sairastaville lapsille ei ole saatavilla rokotetta tai erityistä hoitoa, ja happihoitoa suositellaan yleensä lapsille, joilla on hengitysvajaus. Monoklonaalisen vasta-aineen palivitsumabin ja antiviraalisen nukleotidilääkkeen ribaviriinin käyttöä pidetään liian kalliina tai riskialttiina lapsille, ja sitä suositellaan vain suuren riskin potilaille. Bakteerien aiheuttamat rinnakkaisinfektiot vaativat usein antibioottihoitoa epäiltyjen tai tunnettujen patogeenien perusteella, mutta antibioottien käytöllä on merkittäviä sivuvaikutuksia ja se herättää huolta resistenssin kehittymisestä.

Viime vuosina probiootit ovat saavuttaneet suosiota lupaavina ja turvallisina ehdokkaina hengitystieinfektioiden ennaltaehkäiseviin ja tukeviin hoitoihin, joiden tarkoituksena on auttaa hengitystieinfektioiden hoidossa ja vähentämisessä. Probiootteja, jotka ovat eläviä mikro-organismeja, jotka tarjoavat terveyshyötyjä riittävinä määrinä kulutettuna, on perinteisesti käytetty edistämään suoliston terveyttä. Niiden mahdollista roolia hengitystieinfektioissa, erityisesti RSV-keuhkokuumeessa, ei ole kuitenkaan tutkittu laajasti. Jotkut tutkimukset viittaavat siihen, että tietyt probioottikannat voivat olla suoraan vuorovaikutuksessa virusten kanssa sieppaamalla ne, indusoimalla sekundaarikasvua estääkseen viruksen sisäänpääsyn ja kasvun tai moduloivat immuunivastetta hengitystieinfektioiden riskin vähentämiseksi. Suun kautta otettavien probioottien vaikutus imeväisten hengitysteihin on kuitenkin tyypillisesti viivästynyt (yleensä noin 3–12 kuukautta), ja niitä käytetään ensisijaisesti ennaltaehkäisyyn eikä ARTI-hoidon lisänä. Tästä syystä ARTI-hoidossa tarvitaan vaihtoehtoisia probioottien toimitusreittejä. Äskettäisessä tutkimuksessamme olemme osoittaneet, että nenään suihkuttavat Bacillus-itiönestemäiset probiootit (LiveSpo Navax, joka sisältää > 5 miljardia B. subtilis ANA4:ää ja B. clausii ANA39:ää / 5 ml ampulli) voivat nopeasti ja tehokkaasti lievittää ARTI:n oireita. hengitysteiden synsyyttiviruksen (RSV) infektio, mutta sillä on voimakkaita vaikutuksia viruskuorman ja tulehduksen vähentämisessä. Tämä havainto on ensimmäinen osoitus siitä, että probioottien ruiskuttaminen suoraan nenään voi olla nopea ja tehokas oireenmukainen hoito ARTI:lle.

Tässä seuraavassa tutkimuksessa suoritimme kaksoissokkoutetun, satunnaistetun ja kontrolloidun kliinisen tutkimuksen tutkiaksemme edelleen LiveSpo Navaxin tehokkuutta sellaisten lasten hoidossa, joilla on vaikea keuhkokuume ja jotka tarvitsevat happihoitoa RSV- ja bakteeriperäisten infektioiden vuoksi.

Menetelmät: Suoritetaan satunnaistettu, sokea ja kontrolloitu kliininen tutkimus. Potilaiden vanhempien tulee antaa erilaisia ​​tietoja lapsistaan, mukaan lukien heidän koko nimensä, sukupuolensa, ikänsä, synnytyshistoriansa, rokotushistoriansa ja antibioottien käyttöhistoriansa. Saatuaan tietoon perustuvan suostumuksen 100 potilasta, joilla on vakava keuhkokuume, joka johtuu RSV:stä ja bakteeri-yhteisinfektiosta, jaetaan satunnaisesti kahteen ryhmään (n = 50/ryhmä): kontrolliryhmä (jota kutsutaan "vertailuryhmäksi") saa 0,9 %. NaCl fysiologista suolaliuosta ja koeryhmä (jota kutsutaan nimellä "Navax" ryhmä) saavat probiootit LiveSpo Navax. Potilaille annetaan koodattu suihke sokkonäytteen muodossa tutkimuksen objektiivisuuden varmistamiseksi. Kliinistä seurantaa suoritetaan vähintään 7 päivää, ja nenänielun näytteet kerätään päivänä 0 ja päivänä 3 arvioidakseen mahdollisia viruskuorman vähenemistä, yhteisinfektion aiheuttamia bakteereja, ylireagoineen sytokiinin vapautumisen modulaatiota ja probioottisten itiöiden esiintymistä. potilaan nenän limakalvolla.

Reaaliaikaista PCR:ää käytetään mikro-organismien havaitsemiseen nenänielun näytteistä. Semi-kvantitatiivisilla määrityksillä mitataan muutoksia RSV-kuormassa ja yhteisinfektion bakteeripitoisuuksissa käyttäen reaaliaikaista PCR-rutiiniprotokollaa, joka on standardoitu ISO 15189:2012 -kriteerien mukaisesti ja jota käytetään rutiininomaisesti Vietnamin kansallisessa lastensairaalassa. B. subtilisiin ja B. clausiiin kuuluvien Bacillus-kantojen havaitseminen suoritetaan käyttäen reaaliaikaista PCR SYBR Green -määritystä, joka suoritetaan rutiininomaisesti Spobiotic Research Centerissä Hanoissa, Vietnamissa.

ELISA-määrityksiä käytetään tulehdusta edistävien sytokiinitasojen (esim. IL-6, IL-8, TNF-alfa...) ja immunoglobuliini A (IgA) -tasojen kvantifiointiin. Määritykset suoritetaan käyttämällä ELISA-sarjaa valmistajan ohjeiden mukaisesti.

Nenän mikrobiomianalyysi suoritetaan käyttämällä 16S-rRNA-geenin seuraavan sukupolven sekvensointia (NGS) Macrogenissa Soulissa, Koreassa, Illumina MiSeq -alustalla 2 x 250 bp:n ajokonfiguraatiolla.

Hoidon aikana potilaita seurataan päivittäin RSV:n ja bakteeriperäisen samanaikaisen infektion aiheuttaman vaikean keuhkokuumeen tyypillisten kliinisten oireiden varalta, mukaan lukien vuotava nenä, rintakehän lama, kuivuvat kohinat, kosteat kohinat, oksimetria (SpO2) (%), pulssi (lyöntejä/lyöntejä). min) ja hengitys (lyöntiä/min) sekä happihoitoa vaativien päivien lukumäärä... kotiutumiseen asti. Lääkärit ja sairaanhoitajat tarkkailevat potilaiden terveydentilaa ja heidän tiedot kirjataan potilastietoihin. Koko tutkimuksen ajan vanhempia pyydetään pidättäytymään muiden probioottien antamisesta joko nenäsumutteen tai suun kautta sekä muiden 0,9 % NaCl fysiologisten suolaliuossuihkeiden käyttämisestä nenän puhdistukseen.

Tiedonkeruu ja tilastollinen analyysi käsittää yksittäisten potilastietojen keräämisen ja potilastietojen systemaattisen järjestämisen aineistoksi. LiveSpo Navaxin tehoa arvioidaan ja sitä verrataan 0,9-prosenttiseen NaCl-fysiologiseen suolaliuokseen Navax- ja kontrolliryhmistä saatujen eri kliinisten ja subkliinisten kriteerien perusteella. Näihin kriteereihin kuuluvat päivien lukumäärä oireiden lievittymiseen, RSV-kuorman alenemistasot (2^△Ct) ja yhteisinfektion bakteeripitoisuudet. Kohdegeenien △Ct lasketaan Ct:nä (kynnyssykli) päivänä 3 - Ct päivänä 0, kun taas sisäisen kontrollin Ct säädetään yhtä suureksi kaikkien näytteiden kesken. Lisäksi sytokiinien alentuneet tasot (esim. IL-6, IL-8, TNF-alfa...) ja IgA arvioidaan. Taulukkoanalyysi suoritetaan käyttämällä χ2-testiä tai Fisherin tarkkaa testiä kaksijakoisille muuttujille, joiden soluarvot ovat alle viisi. Jatkuvia muuttujia verrataan käyttämällä Wilcoxon-testiä, t-testiä tai Mann-Whitney-testiä, kun tiedot eivät ole normaalijakaumassa. Muuttujien välisiä korrelaatioita arvioidaan Spearmanin korrelaatioanalyysillä. Tilastolliset ja graafiset analyysit suoritetaan GraphPad Prism v8.4.3 -ohjelmistolla (GraphPad Software, CA, USA). Kaikkien analyysien merkitsevyystasoksi asetetaan p < 0,05.

Odotetut tulokset: (i) LiveSpo Navaxin odotetaan lievittävän RSV-infektion oireita noin 25 % tehokkaammin, ja 90 % Navax-ryhmän potilaista on oireettomia interventiopäivänä 3–7 (oireista riippuen), verrattuna 65:een. % potilaista kontrolliryhmässä; (ii) Navax-ryhmän potilaiden RSV-kuormituksen odotetaan vähenevän merkittävästi (> 10-kertaisesti) verrattuna kontrolliryhmän potilaisiin toimenpiteen 3. päivänä.