Lactobacillus Acidophilus L92 allergisen tulehduksen merkkiaineista nenän provosoimalla ruohon siitepölyllä

Tämän tutkimuksen yleisenä tavoitteena on selvittää bakteerituotteen, Lactobacillus acidophilus -kannan L-92 (CALPIS U.S.A., Inc., Torrance, CA) hyöty potilailla, joilla on allerginen nuha. Tämä tehdään huomioimalla:

• Siitepölyuutteen kynnysannos, joka vaadittiin nenäaltistuksessa, joka vaadittiin saamaan aikaan nenän tukkeuma mitattuna akustisella rinometrialla esikäsittelyllä ja sen jälkeen vertaamalla nenävastetta samaan annokseen hoidon lopussa.
• Siitepölyuutteen annos, joka tarvitaan (asteittain nostamalla annosta) nenätukoksen aiheuttamiseen hoidon lopussa, jos merkittävää nenän tukkeutumista ei saavuteta hoitoa edeltävällä annoksella.
• Muutokset sytokiini- ja kemokiiniprofiilissa, jotka saatiin analysoimalla nenän eritenäytteitä ennen hoitoa ja sen jälkeen.
• Muutokset viljeltyjen perifeerisen veren mononukleaarisolujen sytokiiniprofiilissa, joita stimuloidaan PHA:lla ennen ja jälkeen hoitoa.
• PHADIA ImmunoCAP monivuotisen raiheinän siitepölytiitteri esi- ja jälkikäsittely.
• Standardoidun monivuotisen ruiheinäuutteen kynnyspitoisuus saa aikaan positiivisen ihonpistotestin ennen hoitoa ja sen jälkeen
• Seerumin kokonais-IgE ennen ja jälkeen

Käytettävä vaikuttavana aineena on tabletti, joka on valmistettu kuivatusta Lactobacillus acidophilus -kannasta L-92 ja täyteaineista. Näitä bakteereja on useimpien terveiden ihmisten ruoansulatuskanavassa. Ne eivät ole patogeenisiä, ja niitä on käytetty elintarviketeollisuudessa fermentoitujen elintarvikkeiden valmistukseen vuosisatojen ajan. Ne alentavat ympäristönsä pH:ta muuttamalla sokeria maitohapoksi, mikä estää joidenkin taudinaiheuttajien kasvua. Laktobasillit ovat ensimmäinen bakteerisuku, jolla epäillään olevan terveyshyötyjä. Useimmat probioottitutkimukset on tehty elävillä viljelmillä, ja todellakin on olemassa eläinmallikirjallisuutta, joka tukee elävien bakteerien parempia immunomodulatorisia vaikutuksia tapettuihin organismeihin verrattuna. Joidenkin laktobasillien hyödyllisten vaikutusten oletetaan kuitenkin johtuvan soluseinän komponenttien ja bakteeri-DNA:n ottamisesta ja prosessoinnista, joten vuorovaikutusta elävien bakteerien kanssa ei välttämättä tarvita kaikkien hyödyllisten vaikutusten saavuttamiseksi. Kuitenkin, jos tablettimuoto voi kuljettaa eläviä bakteereja, kuluttajien helppokäyttöisyyden kannalta se olisi monien mielestä parempi, ja se mahdollistaisi lisäravinteen helpomman sokeuttamisen kliinisissä tutkimuksissa. Tässä ehdotettu tutkimus on ensimmäinen suuri tutkimus tästä tuotteesta, jossa käytetään elävää, mutta kuivattua bakteeritablettivalmistetta. Jos tällä tuotteella on myönteinen vaikutus, se, että se on tablettimuodossa, parantaa suuresti valmistuksen johdonmukaisuutta sekä helpottaa varastointia ja tuotteen loppukäyttöä kuluttajien kannalta.

CALPIS on valinnut laktobasillikannan, L. acidophilus (L92), IgE:tä alentavan vaikutuksen perusteella kokeellisissa hiirillä tehdyissä tutkimuksissa. Tämä nestemäisessä fermentoidussa maitomuodossa oleva tuote on testattu seuraavissa kliinisissä tutkimuksissa:

1. Cedar siitepölyallergiatutkimus (2003). Merkittävä parannus oireiden lääkityspisteissä havaittiin (ISHIDA et al BIOSCI. BIOTECH. BIOCHEM. 1652-60, 2005). Tuote: Nestemäinen fermentaatio L acidophilus L-92 maito, lämpökäsitelty 75°C:ssa 10 minuuttia 100 ml:n tilavuudessa.
2. Monivuotinen allerginen nuha (2002/03). Merkittävä paraneminen oireiden lääkityspisteissä havaittiin (ISHIDA et ai. J. Dairy Sei. 528-33, 2005). Tuote: 100 ml lämpökäsiteltyä maitoa, joka on fermentoitu L acidophilus L-92:lla (noin 3x1010 laskentaa/100 ml)

3. Atooppinen ihottuma (2005). Oire-lääkityspisteissä havaittiin parannusta. Julkaisemattomat tiedot. Tuote: 100 ml fermentoitua maitoa, jossa on L acidophilus L-92.

   Ensimmäinen tutkimus, jossa on käytetty kuivattua muotoa tableteissa, on suoritettu:

4. Keinotekoinen siitepölyallergiatutkimus (2005). Elämänlaadun paranemista havaittiin. Tuote: Kuivatut bakteerit ja täyteaineet tableteissa. Tutkittiin 20 mg, 60 mg ja 180 mg. 180 mg/vrk oli tehokkain. Julkaisemattomat tiedot.

MENETELMÄT

VAIHE 1

Ensimmäisessä vaiheessa tutkitaan koehenkilöitä, joilla on ollut ruohopöllinoosi ja joiden ihotesti on positiivinen ruoholle, sesongin ulkopuolella, ja heidät satunnaistetaan saamaan lumelääkettä ja aktiivista hoitoa 4 kuukaudeksi. Satunnaistaminen perustuu retrospektiiviseen nuha-elämänlaatukyselyyn, joka koskee heidän muistoaan viimeisen siitepölykauden pahimmasta viikosta. Tarkoituksena on satunnaistaa koehenkilöt siten, että vaikeista ja lievistä allergiaoireista kärsivien jakauma on tasainen molemmissa ryhmissä. Koehenkilöistä arvioidaan niiden nenän toiminta (avoimuus akustisella rinometrialla) ja heille suoritetaan nenän provokaatiotesti ja nenäeritteiden kerääminen tutkimuksen alussa ja lopussa. Veri otetaan ja ihotestejä tehdään tutkimuksen alussa ja lopussa.

Ensisijainen tavoite:

L-92:n tehokkuuden arvioiminen lumelääkkeeseen verrattuna vertaamalla nenän tukkeuman muutosta akustisen rinometrian avulla lähtötilanteesta, nenän provokaatiossa samaan annokseen heinän siitepölyuutetta, jonka havaittiin aiheuttavan tukkeutumista ilmoittautumisen yhteydessä.

Toissijaiset tavoitteet:

1. Vertaamaan kynnysannoksen muutosta nenäspesifisen provokaatiotestin (NPT) testissä heinän siitepölyyn, joka tarvitaan nenän tukkeuman aiheuttamiseen.
2. Vertaa seerumin IgE-tasojen muutosta ruohon siitepölyyn (suorittanut PHADIA ImmunoCAP) ja kokonais-IgE:hen.
3. Vertaa sytokiinien IFN-gamma, IL-2, IL-4, IL-5, IL-9 ja IL-13 sekä kemokiinin, eotaksiinin, muutosta nenän eritysnesteessä käyttämällä samaa siitepölyannosta, joka aiheutti nenän tukkeuman lähtötasolla.
4. Vertaa sytokiinien IFN-gamma, IL-2, IL-4, IL-5, IL-9 ja IL-13 muutosta perifeerisen veren mononukleaarisolujen (PBMC:t) supernatantissa, joka on stimuloitu PHA:lla ennen hoitoa ja sen jälkeen.

VAIHE 2

Toisessa vaiheessa:

Koehenkilöille annetaan mahdollisuus osallistua tutkimuksen toiseen vaiheeseen. Tässä vaiheessa koehenkilöt jatkavat joko lumelääkettä tai aktiivista tuotetta koko seuraavan siitepölykauden ajan tammikuusta 2008 alkaen ja täyttävät nuha-elämänlaatukyselyitä noutaessaan tutkimustabletteja huhti-, touko- ja kesäkuun alussa. Heitä pyydetään täyttämään päivittäiset lääkitys-/oirepäiväkirjat toukokuun kahden ensimmäisen viikon aikana (tarkat päivämäärät voivat muuttua ilmastotekijöiden mukaan). Ruohon siitepölykausi on huhti-kesäkuussa. Veri otetaan viimeisellä käynnillä kesäkuun lopussa 2008 ImmunoCAP:n spesifisen ja kokonais-IgE:n varalta.