Lactobacillus Acidophilus L92 em marcadores de inflamação alérgica por provocação nasal com pólen de grama

O objetivo geral deste estudo é estabelecer o benefício de um produto bacteriano, Lactobacillus acidophilus cepa L-92 (CALPIS U.S.A., Inc., Torrance, CA), em pacientes com rinite alérgica. Isso será feito observando:

• A dose limite de extrato de pólen necessária na provocação nasal necessária para provocar obstrução nasal medida por rinometria acústica pré-tratamento e, em seguida, comparar a resposta nasal com a mesma dose no final do tratamento.
• A dose de extrato de pólen necessária (por aumento progressivo da dose) para provocar obstrução nasal no final do tratamento, se obstrução nasal significativa não for alcançada com a dose pré-tratamento.
• Alterações no perfil de citocinas e quimiocinas obtidas pela análise das amostras de secreção nasal pré e pós-tratamento.
• Alterações no perfil de citocinas de células mononucleares de sangue periférico cultivadas e estimuladas com PHA pré e pós-tratamento.
• PHADIA ImmunoCAP titulação de pólen de azevém perene pré e pós-tratamento.
• A concentração limite de extrato de azevém perene padronizado para obter um teste cutâneo positivo pré e pós-tratamento
• IgE sérica total pré e pós-

O produto ativo a ser utilizado é um comprimido feito de dessecado Lactobacillus acidophilus cepa L-92 e cargas. Essas bactérias estão presentes no trato gastrointestinal da maioria dos seres humanos saudáveis. Eles não são patogênicos e têm sido usados ​​na indústria alimentícia para preparação de alimentos fermentados há séculos. Eles reduzem o pH de seu ambiente convertendo açúcar em ácido lático, o que inibe o crescimento de alguns patógenos. Os lactobacilos são o primeiro gênero de bactéria suspeito de trazer benefícios à saúde. A maioria dos estudos de probióticos foi feita com culturas vivas e, de fato, há literatura de modelos animais para apoiar maiores efeitos imunomoduladores benéficos de bactérias vivas sobre organismos mortos. No entanto, alguns efeitos benéficos dos lactobacilos são atribuídos à absorção e processamento de componentes da parede celular e DNA bacteriano, portanto, a interação com bactérias vivas pode não ser necessária para todos os efeitos benéficos. No entanto, se uma forma de comprimido puder fornecer bactérias vivas, em termos de facilidade de consumo pelos consumidores, ela seria preferida por muitas pessoas, além de permitir uma ocultação mais fácil do suplemento em ensaios clínicos. O estudo aqui proposto será o primeiro grande estudo deste produto usando uma preparação de comprimidos vivos, mas dessecados da bactéria. Se este produto tiver um efeito benéfico, o fato de estar em forma de comprimido beneficiará muito a consistência na fabricação, bem como facilitará o armazenamento e o uso final do produto pelos consumidores.

O CALPIS selecionou uma cepa de lactobacilos, L. acidophilus (L92), com base em um efeito de redução de IgE em estudos experimentais com camundongos. Este produto, na forma líquida de leite fermentado, foi testado nos seguintes estudos clínicos:

1. Estudo de alergia ao pólen de cedro (2003). Melhora significativa no escore de sintoma-medicação foi detectada (ISHIDA et al BIOSCI. BIOTEC. BIOQUIM. 1652-60, 2005). Produto: Leite L acidophilus L-92 de fermentação líquida, tratado termicamente a 75°C por 10 minutos em volume de 100 mL.
2. Rinite alérgica perene (2002/03). Foi observada melhora significativa no escore de medicação para sintomas (ISHIDA et al J. Dairy Sci. 528-33, 2005). Produto: 100 mL de leite tratado termicamente fermentado por L acidophilus L-92 (cerca de 3x1010 contagens/100 mL)

3. Dermatite atópica (2005). Melhora na pontuação sintoma-medicação foi detectada. Dados não publicados. Produto: 100 mL de leite fermentado com L acidophilus L-92.

   Um estudo inicial usando uma forma dessecada em comprimidos foi realizado:

4. Estudo de alergia ao pólen artificial (2005). Foi observada melhora na qualidade de vida. Produto: bactérias dessecadas e cargas em comprimidos. 20 mg, 60 mg e 180 mg foram estudados. 180 mg/dia foi mais eficaz. Dados não publicados.

MÉTODOS

FASE 1

Na primeira fase, indivíduos com histórico de polinose de gramíneas, com testes cutâneos positivos para gramíneas, serão estudados fora da estação e randomizados para placebo e tratamento ativo por 4 meses. A randomização será baseada em um questionário retrospectivo de qualidade de vida de rinite em relação à lembrança da pior semana da última temporada de pólen. A intenção é randomizar os indivíduos de forma que a distribuição daqueles com sintomas de alergia grave versus leve seja igual em ambos os grupos. Os sujeitos serão avaliados quanto à função nasal (patência por rinometria acústica) e serão submetidos a teste de provocação nasal e coleta de secreção nasal no início e no final do estudo. Sangue será coletado e testes cutâneos serão realizados no início e no final do estudo.

Objetivo primário:

Avaliar a eficácia de L-92 versus placebo, comparando a alteração na obstrução nasal usando rinometria acústica desde a linha de base, após provocação nasal com a mesma dose de extrato de pólen de grama encontrado para provocar obstrução na inscrição.

Objetivos secundários:

1. Comparar a mudança na dose limite para o teste de provocação específica nasal (NPT) com o pólen de grama necessário para provocar obstrução nasal.
2. Comparar a alteração dos níveis séricos de IgE para pólen de grama (realizado por PHADIA ImmunoCAP) e IgE total.
3. Comparar a alteração das citocinas IFN-gama, IL-2, IL-4, IL-5, IL-9 e IL-13 e da quimiocina eotaxina no fluido de secreção nasal usando a mesma dose de pólen que provocou obstrução nasal na linha de base.
4. Comparar a alteração das citocinas IFN-gama, IL-2, IL-4, IL-5, IL-9 e IL-13 no sobrenadante de células mononucleares de sangue periférico (PBMCs) estimuladas com PHA pré e pós-tratamento.

FASE 2

Na segunda fase:

Os indivíduos terão a opção de participar da Fase 2 do estudo. Nesta fase, os participantes continuarão recebendo placebo ou produto ativo durante a próxima temporada de pólen, começando em janeiro de 2008, e preencherão questionários de qualidade de vida de rinite quando pegarem os comprimidos do estudo no início de abril, maio e junho. Eles serão solicitados a preencher diários de medicamentos/sintomas durante as duas primeiras semanas de maio (datas exatas sujeitas a alterações dependendo de fatores climáticos). O pico da temporada de pólen de grama é de abril a junho. O sangue será coletado em uma última visita no final de junho de 2008 para IgE específica e total pelo ImmunoCAP.