Lactobacillus acidophilus L92 sobre marcadores de inflamación alérgica por provocación nasal con polen de hierba

El objetivo general de este estudio es establecer el beneficio de un producto bacteriano, Lactobacillus acidophilus cepa L-92 (CALPIS U.S.A., Inc., Torrance, CA), en pacientes con rinitis alérgica. Esto se hará anotando:

• La dosis umbral de extracto de polen requerida en el desafío nasal necesitaba provocar la obstrucción nasal según lo medido por el pretratamiento de rinometría acústica y luego comparar la respuesta nasal con la misma dosis al final del tratamiento.
• La dosis de extracto de polen necesaria (por aumento progresivo de la dosis) para provocar la obstrucción nasal al final del tratamiento si no se alcanza una obstrucción nasal significativa con la dosis previa al tratamiento.
• Cambios en el perfil de citocinas y quimiocinas obtenidos mediante el análisis de muestras de secreciones nasales antes y después del tratamiento.
• Cambios en el perfil de citocinas de células mononucleares de sangre periférica cultivadas estimuladas con PHA antes y después del tratamiento.
• Título de polen de ryegrass perenne de PHADIA ImmunoCAP antes y después del tratamiento.
• La concentración umbral de extracto de ballica perenne estandarizado para obtener una prueba de punción cutánea positiva antes y después del tratamiento.
• IgE sérica total pre y post

El producto activo a utilizar es un comprimido elaborado a partir de Lactobacillus acidophilus cepa L-92 desecado y rellenos. Estas bacterias están presentes en el tracto GI de la mayoría de los humanos sanos. No son patógenos y se han utilizado en la industria alimentaria para la preparación de alimentos fermentados durante siglos. Disminuyen el pH de su entorno al convertir el azúcar en ácido láctico, lo que inhibe el crecimiento de algunos patógenos. Los lactobacilos son el primer género de bacterias que se sospecha que tienen beneficios para la salud. La mayoría de los estudios de probióticos se han realizado con cultivos vivos y, de hecho, existe literatura de modelos animales que respalda los efectos inmunomoduladores más beneficiosos de las bacterias vivas sobre los organismos muertos. Sin embargo, se propone que algunos efectos beneficiosos de los lactobacilos se deben a la absorción y el procesamiento de los componentes de la pared celular y el ADN bacteriano, por lo que es posible que no se requiera la interacción con bacterias vivas para todos los efectos beneficiosos. Sin embargo, si una forma de tableta puede entregar bacterias vivas, en términos de facilidad de consumo por parte de los consumidores, muchas personas lo preferirían, además de permitir un cegamiento más fácil del suplemento en los ensayos clínicos. El estudio propuesto en este documento será el primer estudio grande de este producto utilizando una preparación de bacterias vivas, pero desecadas, en tabletas. Si este producto tiene un efecto beneficioso, el hecho de que esté en forma de tableta beneficiará en gran medida la consistencia en la fabricación, además de facilitar el almacenamiento y el uso final del producto por parte de los consumidores.

CALPIS ha seleccionado una cepa de lactobacilos, L. acidophilus (L92), sobre la base de un efecto reductor de IgE en estudios experimentales con ratones. Este producto, en forma de leche fermentada líquida, ha sido probado en los siguientes estudios clínicos:

1. Estudio de alergia al polen de cedro (2003). Se detectó una mejora significativa en la puntuación de síntomas-medicación (ISHIDA et al BIOSCI. BIOTECNOLOGÍA. BIOQUÍMICA. 1652-60, 2005). Producto: Leche líquida de fermentación L acidophilus L-92, tratada térmicamente a 75°C durante 10 minutos en un volumen de 100 mL.
2. Rinitis alérgica perenne (2002/03). Se observó una mejora significativa en la puntuación de los síntomas y la medicación (ISHIDA et al J. Dairy Sci. 528-33, 2005). Producto: 100 mL de leche termotratada fermentada por L acidophilus L-92 (alrededor de 3x1010 cuentas/100 mL)

3. Dermatitis atópica (2005). Se detectó una mejoría en la puntuación de síntomas-medicación. Datos no publicados. Producto: 100 mL de leche fermentada con L acidophilus L-92.

   Se ha realizado un estudio inicial utilizando una forma desecada en tabletas:

4. Estudio de alergia al polen artificial (2005). Se observó una mejoría en la calidad de vida. Producto: bacterias desecadas y rellenos en tabletas. Se estudiaron 20 mg, 60 mg y 180 mg. 180 mg/día fue más eficaz. Datos no publicados.

MÉTODOS

FASE 1

En una primera fase, los sujetos con antecedentes de polinosis de gramíneas, con pruebas cutáneas positivas a gramíneas, serán estudiados fuera de temporada y serán aleatorizados a placebo y tratamiento activo durante 4 meses. La aleatorización se basará en un Cuestionario de calidad de vida de rinitis retrospectivo con respecto a su recuerdo de la peor semana de la última temporada de polen. La intención es aleatorizar a los sujetos de manera que la distribución de aquellos con síntomas de alergia graves versus leves sea igual en ambos grupos. Los sujetos serán evaluados por su función nasal (permeabilidad por rinometría acústica) y se someterán a una prueba de provocación nasal y recolección de secreciones nasales al comienzo y al final del estudio. Se extraerá sangre y se realizarán pruebas cutáneas al principio y al final del estudio.

Objetivo primario:

Evaluar la eficacia de L-92 versus placebo mediante la comparación del cambio en la obstrucción nasal mediante rinometría acústica desde el inicio, luego de la provocación nasal con la misma dosis de extracto de polen de gramíneas que provocó la obstrucción en el momento de la inscripción.

Objetivos secundarios:

1. Comparar el cambio en la dosis umbral para la prueba de provocación nasal específica (NPT) con el polen de pasto requerido para provocar la obstrucción nasal.
2. Comparar el cambio de los niveles de IgE sérica al polen de gramíneas (realizado por PHADIA ImmunoCAP) y la IgE total.
3. Comparar el cambio de las citoquinas IFN-gamma, IL-2, IL-4, IL-5, IL-9 e IL-13, y la quimioquina, eotaxina, en el fluido de secreción nasal utilizando la misma dosis de polen que provocó la obstrucción nasal. en la línea de base.
4. Comparar el cambio de citocinas IFN-gamma, IL-2, IL-4, IL-5, IL-9 e IL-13 en el sobrenadante de células mononucleares de sangre periférica (PBMC) estimuladas con PHA antes y después del tratamiento.

FASE 2

En la segunda fase:

Los sujetos tendrán la opción de participar en la Fase 2 del estudio. En esta fase, los sujetos continuarán con el placebo o el producto activo durante la próxima temporada de polen, a partir de enero de 2008, y completarán los cuestionarios de calidad de vida para la rinitis cuando recojan las tabletas del estudio a principios de abril, mayo y junio. Se les pedirá que llenen diarios de medicación/síntomas diarios durante las dos primeras semanas de mayo (fechas exactas sujetas a cambios dependiendo de factores climáticos). La temporada alta de polen de gramíneas es de abril a junio. Se extraerá sangre en una última visita a finales de junio de 2008 para IgE específica y total mediante ImmunoCAP.