Sylkikalvojen muodostumista säätelevät tekijät (SalFilm)

Tämän tutkimuksen tavoitteena on selvittää syljen limakalvon muodostumisesta ja rakenteen kehittymisestä (in vitro) vastuussa olevat fysikaaliset ja biokemialliset mekanismit sekä elintarvikkeissa tai suuhygieniatuotteissa esiintyvien tavallisten ainesosien vaikutus.

Sylki muodostaa suun pinnoille kalvon tai kalvon, joka toimii suojaavana esteenä ja voitelee suun kudoksia ruoan kulutuksen aikana. Se tarjoaa kuitenkin myös ensisijaisen paikan bakteerien kiinnittymiselle ja plakin muodostumiselle. Siksi sylkikalvon fyysinen ja molekyylirakenne on tärkeä sille, miten aistimme ja maistumme ruoan, miten ruoka hajoaa suussa ja sen tehokkuus suojaesteenä. Paljon tiedetään syljen koostumuksesta, mutta hyvin vähän tiedetään sylkikalvon tai kalvon koostumuksesta ja rakenteesta. Uskomme, että kalvon muodostuminen ja sen fysikaaliset ominaisuudet, kuten viskositeetti ja lujuus, ovat seurausta monimutkaisista vuorovaikutuksista syljen eri proteiinien välillä ja muiden komponenttien, kuten kalsiumin ja muiden suolojen, elintarvikekomponenttien, kuten proteiinien ja emulgointiaineiden sekä aktiivisten yhdisteiden kanssa. suuhygieniatuotteissa, kuten säilöntäaineissa ja pinta-aktiivisissa aineissa. Tämä tutkimus selvittää, miten sylkikalvo muodostuu, sen molekyylikoostumus ja mitkä muut kriittiset komponentit vaikuttavat sen kykyyn muodostaa vakaa, suojaava este. Toivottavasti tämä tieto auttaa tulevaisuudessa suunnittelemaan terveellisempiä elintarvikkeita ja tehokkaampia suuhygieniahoitoja.

Syljen fysikaaliset ominaisuudet eivät ole stabiileja, koska proteiinit pyrkivät aggregoitumaan erittymisen jälkeen, mikä vaikuttaa siihen, kuinka kauan kalvon muodostumista voidaan tutkia (ex vivo). Siksi meidän on käytettävä tuoreita ihmisen sylkinäytteitä, jotka on kerätty terveiltä vapaaehtoisilta tietyllä protokollalla varmistaaksemme näytteen laadun, ja arvioitava ne neljän tunnin kuluessa keräämisestä. Sylki kerätään (joko koko suu tai korvasylkirauhanen), viedään laboratorioon ja annetaan muodostaa mallipinnoille kalvoja, jotka edustavat suussa olevia. Kalvojen muodostumisnopeutta, lujuutta, paksuutta ja massaa tutkitaan useilla fysikaalisilla menetelmillä. Proteiinipitoisuus ja koostumus määritetään myös kalvonmuodostuksen eri vaiheista vastaavien komponenttien tunnistamiseksi. Sitten määritetään ympäristöolosuhteiden, kuten pH:n, kalsiumin ja suolan, vaikutus. Lopuksi selvitämme, kuinka kalvot ovat vuorovaikutuksessa elintarvikkeissa ja suuhygieniatuotteissa esiintyvien ulkoisten komponenttien, kuten proteiinien, emulgointiaineiden, säilöntäaineiden ja pinta-aktiivisten aineiden kanssa. Vaikka emme tutkikaan ruokavalion vaikutusta syljen ominaisuuksiin, haluamme selvittää taustalla olevat mekanismit, jotka ovat vastuussa kalvon muodostumisesta ja hajoamisesta. Paritettuja T-testejä käytetään vertaamaan korvasylkirauhasta samojen vapaaehtoisten koko suun syljen kanssa. Kahta näyte-T-testiä käytetään vertaamaan samanlaisia ​​mittauksia eri vapaaehtoisten näytteistä. Tuloksille tehdään diagnostisia tarkistuksia sen tarkistamiseksi, tarvitaanko muunnoksia normaalisuusoletusten täyttämiseksi.

Otetaan kahden tyyppisiä sylkinäytteitä: koko suun sylki (WMS) ja korvasylki (PS). Sylki säilytetään 4 ºC:ssa (WMS voidaan myös sentrifugoida 2700 x g 20 minuuttia 5 °C:ssa aggregaattien poistamiseksi) ja käytetään 4 tunnin sisällä keräämisestä, koska proteiinien aggregoituminen alkaa välittömästi erittymisen jälkeen, mikä vaikuttaa kalvonmuodostusominaisuuksiin määritettynä. edellisessä työssä. Useita fysikaalisia tekniikoita käytetään määrittämään kalvonmuodostuksen nopeus ja laajuus sekä paksuus, massa ja reologiset ominaisuudet erilaisissa liuosolosuhteissa ja lisättyjen aineosien läsnä ollessa tai ilman, kuten edellä on kuvattu. Proteiinipitoisuus ja koostumus määritetään myös. Tämä mahdollistaa paremman kokeellisen suunnittelun (esim. proteiinipitoisuuden normalisointi) tulosten laadun parantamiseksi. Tuloksia käytetään jatkotutkimusten suunnittelussa muiden osaamiskeskusten kanssa, jotta voidaan ymmärtää sylkikalvon vaikutusta in vivo -käyttäytymiseen ja esimerkiksi elintarvikkeiden aistihavaintoon ja syljen rooliin ruoansulatuksessa. .