Factores que controlan la formación de películas salivales (SalFilm)

El objetivo de este estudio es determinar los mecanismos físicos y bioquímicos responsables de la formación y desarrollo de la estructura (in vitro) de la película mucosa salival y el impacto de los ingredientes comunes que se encuentran en los alimentos o productos de higiene bucal.

La saliva forma una película o película sobre las superficies orales que sirve como barrera protectora y lubrica los tejidos orales durante el consumo de alimentos. Sin embargo, también proporciona el sitio principal para la unión bacteriana y la acumulación de placa. Por lo tanto, la estructura física y molecular de la película salival es importante para la forma en que sentimos y saboreamos los alimentos, cómo se descomponen los alimentos en la boca y su eficacia como barrera protectora. Se sabe mucho sobre la composición de la saliva, pero se sabe muy poco sobre la composición y estructura de la película o película salival. Creemos que la formación de la película y sus propiedades físicas, como la viscosidad y la resistencia, son el resultado de interacciones complejas entre diferentes proteínas dentro de la saliva y con otros componentes como el calcio y otras sales, componentes de alimentos como proteínas y emulsionantes y compuestos activos. que se encuentran en productos de higiene bucal como conservantes y tensioactivos. Este estudio determinará cómo se forma la película salival, su composición molecular y qué otros componentes críticos afectan su capacidad para formar una barrera protectora estable. Con suerte, este conocimiento contribuirá en el futuro a estrategias para diseñar alimentos más saludables y tratamientos de higiene bucal más efectivos.

Las propiedades físicas de la saliva no son estables ya que las proteínas tienden a agregarse después de la secreción, lo que afecta el tiempo que se puede estudiar la formación de la película (ex vivo). Por lo tanto, necesitamos usar muestras de saliva humana fresca recolectadas de voluntarios sanos utilizando un protocolo definido para garantizar la calidad de la muestra y evaluarlas dentro de las cuatro horas posteriores a la recolección. Se recogerá la saliva (ya sea de toda la boca o de la parótida), se llevará al laboratorio y se permitirá que se formen películas en las superficies del modelo, representativas de las que se encuentran en la boca. La velocidad de formación, la resistencia, el espesor y la masa de las películas se estudiarán utilizando una variedad de métodos físicos. También se determinará el contenido y la composición de proteínas para identificar los componentes responsables de las diversas etapas de formación de la película. Luego, se determinará la influencia de las condiciones ambientales como el pH, el calcio y la sal. Finalmente, determinaremos cómo interactúan las películas con los componentes externos que se encuentran en los alimentos y productos de higiene bucal como proteínas, emulsionantes, conservantes y tensioactivos. Aunque no estamos estudiando los efectos de la intervención dietética sobre las propiedades de la saliva, queremos determinar los mecanismos subyacentes responsables de la formación y descomposición de la película. Se usarán pruebas T pareadas para comparar la parótida con la saliva de toda la boca de los mismos voluntarios. Se usarán dos pruebas T de muestra para comparar mediciones similares en muestras de diferentes voluntarios. Se realizarán verificaciones de diagnóstico de los resultados para verificar si se requieren transformaciones para cumplir con los supuestos de normalidad.

Se recolectarán dos tipos de muestras de saliva: saliva de boca completa (WMS) y saliva de parótida (PS). La saliva se almacenará a 4ºC (WMS también se puede centrifugar a 2700xg durante 20 minutos a 5°C para eliminar los agregados) y se usará dentro de las 4 horas posteriores a la recolección, ya que la agregación de proteínas comienza inmediatamente después de la secreción, lo que afecta las propiedades de formación de la película, según lo determinado. en trabajo anterior. Se empleará una variedad de técnicas físicas para determinar la velocidad y el grado de formación de la película, así como el espesor, la masa y las propiedades reológicas, en las diferentes condiciones de solución y en presencia o ausencia de ingredientes agregados como se describe anteriormente. También se determinará la concentración y composición de proteínas. Esto permitirá mejorar el diseño experimental (p. normalizando la concentración de proteínas) para mejorar la calidad de los resultados. Los resultados se utilizarán para informar el diseño de estudios adicionales con otros centros de experiencia para comprender el impacto en el comportamiento in vivo de la película salival y, por ejemplo, la percepción sensorial de los alimentos y el papel de la saliva en la digestión de las estructuras alimentarias. .