Fattori che controllano la formazione di film salivari (SalFilm)

Lo scopo di questo studio è determinare i meccanismi fisici e biochimici responsabili della formazione e dello sviluppo della struttura (in vitro) del film mucoso salivare e l'impatto degli ingredienti comuni presenti negli alimenti o nei prodotti per l'igiene orale.

La saliva forma un film o pellicola sulle superfici orali che funge da barriera protettiva e lubrifica i tessuti orali durante il consumo di cibo. Tuttavia, fornisce anche il sito principale per l'attacco batterico e l'accumulo di placca. Pertanto la struttura fisica e molecolare del film salivare è importante per il modo in cui percepiamo e assaggiamo il cibo, per come il cibo viene scomposto in bocca e per la sua efficacia come barriera protettiva. Si sa molto sulla composizione della saliva, ma si sa molto poco sulla composizione e sulla struttura del film o pellicola salivare. Riteniamo che la formazione del film e le sue proprietà fisiche, come la viscosità e la forza, siano il risultato di complesse interazioni tra diverse proteine ​​all'interno della saliva e con altri componenti come calcio e altri sali, componenti alimentari come proteine ​​ed emulsionanti e composti attivi trovato in prodotti per l'igiene orale come conservanti e tensioattivi. Questo studio determinerà come si forma il film salivare, la sua composizione molecolare e quali altri componenti critici influenzano la sua capacità di formare una barriera protettiva stabile. Si spera che questa conoscenza contribuisca in futuro a strategie per progettare alimenti più sani e trattamenti di igiene orale più efficaci.

Le proprietà fisiche della saliva non sono stabili poiché le proteine ​​tendono ad aggregarsi dopo la secrezione, il che influisce sul periodo di tempo in cui è possibile studiare la formazione del film (ex vivo). Pertanto, dobbiamo utilizzare campioni di saliva umana fresca raccolti da volontari sani utilizzando un protocollo definito per garantire la qualità del campione e valutarli entro quattro ore dalla raccolta. La saliva sarà raccolta (intera bocca o parotide), portata in laboratorio e lasciata formare pellicole su superfici modello, rappresentative di quelle trovate in bocca. Il tasso di formazione, la forza, lo spessore e la massa dei film saranno studiati utilizzando una gamma di metodi fisici. Verranno inoltre determinati il ​​contenuto proteico e la composizione per identificare i componenti responsabili dei vari stadi di formazione del film. Quindi, verrà determinata l'influenza delle condizioni ambientali come pH, calcio e sale. Infine, determineremo come i film interagiscono con i componenti esterni presenti negli alimenti e nei prodotti per l'igiene orale come proteine, emulsionanti, conservanti e tensioattivi. Sebbene non stiamo studiando gli effetti dell'intervento dietetico sulle proprietà della saliva, vogliamo determinare i meccanismi sottostanti responsabili della formazione e della rottura del film. I test T appaiati verranno utilizzati per confrontare la saliva della parotide con la saliva della bocca intera degli stessi volontari. Verranno utilizzati due test T campione per il confronto di misurazioni simili su campioni di volontari diversi. Saranno eseguiti controlli diagnostici sui risultati per verificare se le trasformazioni sono necessarie per soddisfare le ipotesi di normalità.

Saranno raccolti due tipi di campioni di saliva: Whole Mouth Saliva (WMS) e Parotid Saliva (PS). La saliva sarà conservata a 4ºC (WMS può anche essere centrifugata a 2700xg per 20 minuti a 5°C per rimuovere gli aggregati) e utilizzata entro 4 ore dalla raccolta, poiché l'aggregazione proteica inizia immediatamente dopo la secrezione, influenzando le proprietà di formazione del film, come determinato nel lavoro precedente. Verrà impiegata una gamma di tecniche fisiche per determinare la velocità e l'entità della formazione del film, nonché lo spessore, la massa e le proprietà reologiche, nelle diverse condizioni di soluzione e in presenza e in assenza di ingredienti aggiunti come descritto sopra. Saranno inoltre determinate la concentrazione e la composizione delle proteine. Ciò consentirà una migliore progettazione sperimentale (ad es. normalizzazione della concentrazione proteica) per migliorare la qualità dei risultati. I risultati saranno utilizzati per informare la progettazione di ulteriori studi con altri centri di competenza al fine di comprendere l'impatto sul comportamento in vivo del film salivare e, ad esempio, la percezione sensoriale degli alimenti e il ruolo della saliva sulla digestione delle strutture alimentari .