Faktorer som styr bildandet av spottfilmer (SalFilm)

Syftet med denna studie är att fastställa de fysikaliska och biokemiska mekanismer som är ansvariga för bildandet och strukturutvecklingen (in vitro) av salivens slemhinna och effekten av vanliga ingredienser som finns i livsmedel eller munhygienprodukter.

Saliv bildar en film eller pellicle på orala ytor som fungerar som en skyddande barriär och smörjer munvävnaderna under matkonsumtion. Det ger dock också den primära platsen för bakteriell vidhäftning och uppbyggnad av plack. Därför är den fysiska och molekylära strukturen hos spottfilmen viktig för hur vi känner och smakar mat, hur mat bryts ner i munnen och dess effektivitet som skyddande barriär. Mycket är känt om salivens sammansättning, men mycket lite är känt om salivfilmens eller pellicles sammansättning och struktur. Vi tror att filmbildningen och dess fysikaliska egenskaper, såsom viskositet och styrka, är resultatet av komplexa interaktioner mellan olika proteiner i saliv och med andra komponenter som kalcium och andra salter, livsmedelskomponenter som proteiner och emulgeringsmedel och aktiva föreningar. finns i munhygienprodukter som konserveringsmedel och ytaktiva ämnen. Denna studie kommer att avgöra hur spottfilmen bildas, dess molekylära sammansättning och vilka andra kritiska komponenter som påverkar dess förmåga att bilda en stabil, skyddande barriär. Denna kunskap kommer förhoppningsvis i framtiden att bidra till strategier för att designa hälsosammare livsmedel och effektivare munhygieniska behandlingar.

De fysikaliska egenskaperna hos saliv är inte stabila eftersom proteinerna tenderar att aggregera efter utsöndring, vilket påverkar hur lång tid filmbildningen kan studeras (ex vivo). Därför måste vi använda färska salivprover från friska frivilliga med hjälp av ett definierat protokoll för att säkerställa provets kvalitet, och bedöma dem inom fyra timmar efter insamlingen. Saliv kommer att samlas in (antingen hela munnen eller öronmuskeln), tas till laboratoriet och tillåts bilda filmer på modellytor, representativa för de som finns i munnen. Filmernas bildningshastighet, styrka, tjocklek och massa kommer att studeras med hjälp av en rad fysikaliska metoder. Proteininnehållet och sammansättningen kommer också att bestämmas för att identifiera de komponenter som är ansvariga för olika stadier av filmbildning. Därefter kommer påverkan av miljöförhållanden som pH, kalcium och salt att bestämmas. Slutligen kommer vi att bestämma hur filmerna interagerar med externa komponenter som finns i livsmedel och munhygienprodukter såsom proteiner, emulgeringsmedel, konserveringsmedel och ytaktiva ämnen. Även om vi inte studerar effekterna av kostinterventioner på salivegenskaper, vill vi bestämma de underliggande mekanismerna som är ansvariga för filmbildning och nedbrytning. Parade T-tester kommer att användas för att jämföra parotis med helmunsaliv från samma frivilliga. Två prov T-tester kommer att användas för jämförelse av liknande mätningar på prover från olika frivilliga. Diagnostiska kontroller av resultaten kommer att utföras för att kontrollera om transformationer krävs för att uppfylla normalitetsantagandena.

Två typer av salivprover kommer att samlas in: Hela munsaliv (WMS) och parotisaliv (PS). Saliven kommer att förvaras vid 4ºC (WMS kan också centrifugeras vid 2700xg i 20 minuter vid 5°C för att ta bort aggregat) och användas inom 4 timmar efter insamling, eftersom proteinaggregation börjar omedelbart efter utsöndring, vilket påverkar filmbildningsegenskaperna, som fastställts i tidigare arbete. En rad fysikaliska tekniker kommer att användas för att bestämma hastigheten och omfattningen av filmbildning, såväl som tjocklek, massa och reologiska egenskaper, under de olika lösningsbetingelserna och i närvaro och frånvaro av tillsatta ingredienser såsom beskrivits ovan. Proteinkoncentration och sammansättning kommer också att bestämmas. Detta kommer att möjliggöra förbättrad experimentell design (t.ex. normalisera proteinkoncentrationen) för att förbättra kvaliteten på resultaten. Resultaten kommer att användas för att informera om utformningen av ytterligare studier med andra expertcentrum för att förstå effekten på in vivo-beteendet hos salivfilmen och till exempel den sensoriska uppfattningen av livsmedel och salivens roll för matsmältningen av matstrukturer. .