Diagnostinen tutkimus yhdistetystä Biomnarker-testistä immuunipuutteisten potilaiden bronkoalveolaarisissa huuhtelunäytteissä

Suurin ongelma hengenvaarallisten invasiivisten sieni-infektioiden hoidossa potilailla, joilla on akuutti leukemia ja pts allogeenisen hematopoieettisen kantasolusiirron jälkeen, on herkkien ja spesifisten diagnostisten työkalujen puute sienipatogeenien tunnistamiseksi luotettavasti ja taudin varhaisessa vaiheessa. Syvän neutropenian ja alhaisen verihiutaleiden määrän vuoksi invasiiviset diagnostiset toimenpiteet ovat harvoin ajallisesti toteutettavissa, joten bronkoskopia BAL:lla on valintamenetelmä keuhkoinfektioiden diagnosoinnissa, koska viljelypohjaisten menetelmien herkkyys verestä on alhainen erityisesti homeinfektioissa. Epäsuorat menetelmät, niin kutsutut korvaavat markkerit, ovat tulossa yhä tärkeämmiksi tässä kliinisessä ympäristössä. Nämä serologiset markkerit, pääasiassa galaktomannaani (GM) ja äskettäin 1(1,3)-β-D-glukaani (BDG), on validoitu verinäytteiden kliinisissä tutkimuksissa, mutta BAL-näytteiden testaamisen kliininen merkitys on toistaiseksi vain perustuu GM:n takautuvaan tietoon, eikä sitä ole vielä raportoitu BDG:n osalta.

Prospektiivisen ja monikeskusdiagnostisen tutkimuksemme tavoitteena on siksi selvittää näiden serologisten markkerien herkkyyttä ja spesifisyyttä yhdessä molekyylityökalujen kanssa (sekä Aspergillus-spesifinen että monisieni-PCR-pohjainen määritys), koska serologiset markkerit eivät ole patogeenispesifisiä. ja lisäksi määritellä lajikohtaiset raja-arvot BDG:lle BAL-näytteissä.

Lisäksi, jos Aspergillus fumigatus -bakteerin genominen materiaali havaitaan PCR:llä kliinisestä näytteestä, tutkimme sieni-DNA:sta pistemutaatioita cyp51A-geenissä, jotka välittävät resistenssiä tavallisille homeaktiivisille triatsoleille uudella nopealla, herkällä ja spesifisellä, ei-viljelypohjaisella PCR:llä. -määritykset ja sekvensointi sienilääkehoidon optimoimiseksi mahdollisimman varhaisessa vaiheessa.

Tämän tutkimuksen tavoitteena on parantaa invasiivisten keuhkosieni-infektioiden varhaista, herkkää ja spesifistä diagnoosia ja havaita atsoliresistenssimalleja, sillä se saattaa vaikuttaa hematologisten potilaiden ennusteeseen; siksi antifungaalisen hoidon tiedot ja kliiniset tulokset tallennetaan.

Kliiniset näytteet (BAL ja veri) noin 100:lta akuutista leukemiasta kärsivältä henkilöltä ja allogeenisen kantasolusiirron jälkeen kuumeisesta neutropeniasta ja keuhkoinfiltraateista, jotka on diagnosoitu rintakehän TT-kuvauksessa, joka viittaa sieni-infektioon, tutkitaan potilaan tietoisen suostumuksen jälkeen monikeskuksessa, tulevassa monikeskuksessa. oikeudenkäyntiä. Pt:t käyvät läpi standardoidun diagnostisen kuvantamisen ja mikrobiologiset toimenpiteet taustalla olevan tarttuvan patogeenin tunnistamiseksi. BAL- ja verinäytteet testataan lisäksi GM-, BDG- ja diagnostisella sisäkkäisillä Aspergillus-PCR-määrityksellä, monisieni-DNA-Microarray- ja atsoliresistenssi-PCR-määrityksellä. Ryhmämme on laatinut molekyylimääritykset, ja ne sisältävät Aspergillus fumigatuksen, Aspergillus flavuksen, Aspergillus terreuksen, Candida albicansin, Candida dubliniensisin, Candida glabratan, Candida lusitaniaen, Candida tropicaliksen, Fusarium micropororiumin, Fususarium Roxycorusariumin, racesporumin. , Scedosporium prolificans, Trichosporon asahii ja tunnistaa kolme yleisintä pistemutaatiota, jotka aiheuttavat resistenssin triatsoleille, kuten vorikonatsolille tai posakonatsolille.

Muiden diagnostisten keinojen tulokset, mukaan lukien viljelylöydökset sekä potilaiden kliiniset tiedot (esim. neutropenian kesto, taustalla oleva sairaus ja lopputulos, mukaan lukien seurantatiedot sienilääkehoidosta ja sieni-infektioista johtuvasta kuolleisuudesta) dokumentoidaan, pseudonomysoidaan ja sisällytetään tietopankkiimme.

BAL- ja verinäytteet 20 kontrollipisteestä ilman immunosuppressiota (keuhkosairauksista kärsivät) kerätään ja testataan identtisesti.

Tapausmääritykset tehdään 2008 EORTC/MSG-kriteerien mukaisesti. Tutkimuksen kesto on noin 24 kuukautta