Tämä sivu käännettiin automaattisesti, eikä käännösten tarkkuutta voida taata. Katso englanninkielinen versio lähdetekstiä varten.

Ihmisten immuunivasteiden arviointi influenssavirusrokotteelle terveillä vapaaehtoisilla

torstai 5. lokakuuta 2023 päivittänyt: National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID)
Tämä on avoin yksihaarainen tutkimus pitkittäissuuntaisista immunologisista vasteista influenssarokotteelle terveillä aikuisilla henkilöillä. Tähän tutkimukseen otetaan mukaan 18–49-vuotiaita miehiä ja ei-raskaana olevia naisia. Koehenkilöt seulotaan ilmoittautumisen yhteydessä historia- ja fyysisellä kokeella sekä laboratoriotesteillä sen varmistamiseksi, että he ovat tarpeeksi terveitä osallistumaan. Hyväksytyt henkilöt rokotetaan FDA:n hyväksymällä kausiluonteisella inaktivoidulla influenssarokotteella (IIV) pakkausselosteen mukaisesti. Tutkimukseen otetaan mukaan 10 tervettä vapaaehtoista rokotuskautta kohden vuosina 1, 2 ja 4; sekä 20 tervettä vapaaehtoista rokotuskautta kohden tämän tutkimuksen vuosina 5 ja 6, yhteensä 70 koehenkilöä. Tutkimuksen ensisijaisena tavoitteena on karakterisoida HA-spesifisiä plasmablasteja ja muisti-B-soluja influenssarokotuksen jälkeen.

Tutkimuksen yleiskatsaus

Tila

Lopetettu

Ehdot

Interventio / Hoito

Yksityiskohtainen kuvaus

Tämä on avoin yksihaarainen tutkimus pitkittäissuuntaisista immunologisista vasteista influenssarokotteelle terveillä aikuisilla henkilöillä. Tähän tutkimukseen otetaan mukaan 18–49-vuotiaita miehiä ja ei-raskaana olevia naisia. Opintojen kesto on 6 vuotta ja osallistumisaika 180 päivää. Koehenkilöt seulotaan ilmoittautumisen yhteydessä historia- ja fyysisellä kokeella sekä laboratoriotesteillä sen varmistamiseksi, että he ovat tarpeeksi terveitä osallistumaan. Hyväksytyt henkilöt rokotetaan FDA:n hyväksymällä kausiluonteisella inaktivoidulla influenssarokotteella (IIV) pakkausselosteen mukaisesti. Tutkimusmäärityksiä varten kerätään tutkimuksen aikana noin 450 ml verta. Tarkemmin sanottuna seulontaa varten kerätään 16 ml; 48 ml kerätään ilmoittautumisen yhteydessä; 96 ml kerätään käyntipäivinä 7 ja 14; ja 64 ml kerätään 28, 90 ja 180 päivää rokotuksen jälkeen. Tutkimukseen otetaan mukaan 10 tervettä vapaaehtoista rokotuskautta kohden vuosina 1, 2 ja 4; sekä 20 tervettä vapaaehtoista rokotuskautta kohden tämän tutkimuksen vuosina 5 ja 6, yhteensä 70 koehenkilöä. Tutkimuksen suorittaneille henkilöille annetaan mahdollisuus ilmoittautua uudelleen seuraavina vuosina, kunhan he edelleen täyttävät kaikki sisällyttämis- tai poissulkemiskriteerit. Uudelleenilmoittautuville oppiaineille annetaan uusi suostumus, niille annetaan uudet oppiainetunnisteet, ja ne lasketaan mukaan ilmoittautumismäärätavoitteeseen kunkin osallistumisvuoden osalta. COVID-19-pandemian vuoksi kaikki ei-välttämätön tutkimus keskeytettiin maaliskuun 2020 puolivälissä. Uudet ilmoittautumiset asetettiin odottamaan tätä tutkimusta varten. Tutkimuksen ensisijaisena tavoitteena on karakterisoida HA-spesifisiä plasmablasteja ja muisti-B-soluja influenssarokotuksen jälkeen ja toissijaisena tavoitteena on tutkia humoraalisen immuniteetin kestoa influenssavirukselle ihmisillä.

Opintotyyppi

Interventio

Ilmoittautuminen (Todellinen)

60

Vaihe

  • Vaihe 4

Yhteystiedot ja paikat

Tässä osiossa on tutkimuksen suorittajien yhteystiedot ja tiedot siitä, missä tämä tutkimus suoritetaan.

Opiskelupaikat

  • Yhdysvallat
    • Georgia
      • Atlanta, Georgia, Yhdysvallat, 30322-1059
        • Emory University Hospital - W. Dean Warren General Clinical Research Center (GCRC)

Osallistumiskriteerit

Tutkijat etsivät ihmisiä, jotka sopivat tiettyyn kuvaukseen, jota kutsutaan kelpoisuuskriteereiksi. Joitakin esimerkkejä näistä kriteereistä ovat henkilön yleinen terveydentila tai aiemmat hoidot.

Kelpoisuusvaatimukset

Opintokelpoiset iät

18 vuotta - 49 vuotta (Aikuinen)

Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia

Joo

Kuvaus

Sisällyttämiskriteerit:

  1. 18–49-vuotiaat mies- tai naispuoliset koehenkilöt.
  2. Koehenkilöt, jotka pystyvät antamaan kirjallisen tietoon perustuvan suostumuksen ennen minkään tutkimusmenettelyn aloittamista. Aiheet ymmärtävät ja noudattavat suunniteltuja opintomenettelyjä ja ovat käytettävissä kaikille opintokäynneille.

  3. Laboratorioiden seulonta paikallisten laboratorionormien rajoissa tai tutkijan mielestä ei kliinisesti merkitsevä. Normaalit laboratorioalueet ovat seuraavat:

    A. Hematologia:

    • Hemoglobiini: Mies - 12,9-16,1 gm/dl, Nainen - 11,4-14,4 gm/dl
    • Valkosolut (WBC): Mies - 4,2-9,2/ul, Naaras - 4-10/ul
    • Verihiutalemäärä: 150-400/ul

    B. Kemiat:

    • Munuaisten toiminta: Glomerulaarinen suodatusnopeus (GFR) > / = 60 ml/min/1,73 m^2;
    • Maksaentsyymit: albumiini > / = 3,5 g/dl; ALT <66 U/L; AST <62 U/L
  4. Koehenkilöt, jotka eivät ole saaneet kausi-influenssarokotetta meneillään olevan influenssakauden aikana ja joilla ei epäillä olevan influenssatartuntaa meneillään olevan influenssakauden aikana.
  5. Hedelmällisessä iässä olevilla naisilla on oltava negatiivinen virtsaraskaustesti seulontakäynnillä, ilmoittautumiskäynnillä ja kaikilla myöhemmillä tutkimuskäynneillä, jotka ovat yli 14 päivää viimeisestä raskaustestistä.

Poissulkemiskriteerit:

  1. Tunnettu HIV-, HCV- tai HBV-infektio. Nämä tiedot saadaan suullisesti potilaalta.
  2. Jos nainen, aktiivinen raskaus tai imetys tai suunnittelee raskautta tutkimukseen osallistumisen aikana.
  3. Krooniset sairaudet, jotka aiheuttavat immuunikatoa tai jotka vaativat lääkkeitä, jotka voivat muuttaa immuunijärjestelmän toimintaa, kuten immunosuppressantteja ja immuunivastetta vahvistavia aineita.
  4. sinulla on jokin lääketieteellinen sairaus tai tila, joka on laitoksen päätutkijan tai asianmukaisen osatutkijan mielestä vasta-aihe tutkimukseen osallistumiselle. Tämä sisältää kaikki krooniset sairaudet tai tilat, jotka määritellään jatkuvaksi 3 kuukautta (määritelty 90 päivää) tai pidempään ja jotka asettaisivat tutkittavalle kohtuuttoman loukkaantumisriskin, tekisivät potilaan kykenemättömäksi noudattamaan protokollan vaatimuksia tai saattavat häiritä vastausten arvioinnin tai koehenkilön onnistuneen tämän tutkimuksen suorittamisen kanssa
  5. Sinulla on akuutti sairaus, jonka paikan päätutkija tai asianmukainen osatutkija on määrittänyt 72 tunnin kuluessa ennen tutkimusrokotusta. Akuutti sairaus, joka on lähes parantunut ja jäljelle jää vain vähäisiä jäännösoireita, on sallittu, jos jäännösoireet eivät työpaikan päätutkijan tai asianmukaisen osatutkijan mielestä häiritse kykyä arvioida turvallisuusparametreja protokollan edellyttämällä tavalla.
  6. Henkilöt, jotka käyttävät antikoagulantteja, pitkäaikaista aspiriinihoitoa tai pitkäaikaisia ​​systeemisiä steroideja (yli 3 kuukautta viimeisen 12 kuukauden aikana ja mitä tahansa 30 päivän sisällä).
  7. Sinulla on tunnettu yliherkkyys tai allergia munille, muna- tai kananproteiinille tai muille tutkimusrokotteen aineosille;
  8. sinulla on tunnettu lateksiallergia;
  9. Sinulla on ollut vakavia reaktioita aikaisemman rokotuksen jälkeen lisensoiduilla influenssavirusrokotteilla.
  10. Sinulla on ollut Guillain-Barren oireyhtymä.
  11. Koehenkilöt, joilla oli tai joilla epäillään olevan influenssainfektio meneillään olevan influenssakauden aikana.
  12. Koehenkilöt, joilla on seulonnassa epänormaalit elintoiminnot ja/tai fyysinen tarkastus, mukaan lukien lämpötila > / = 38,0 C, systolinen verenpaine < / = 90 tai > / = 160 mmHg, pulssi < / = 60 tai > 110 lyöntiä minuutissa, uusi ihottuma, infektion merkkejä.
  13. Koehenkilöt, jotka ovat jo saaneet kausi-influenssarokotteen meneillään olevalla influenssarokotuskaudella.

Opintosuunnitelma

Tässä osiossa on tietoja tutkimussuunnitelmasta, mukaan lukien kuinka tutkimus on suunniteltu ja mitä tutkimuksella mitataan.

Miten tutkimus on suunniteltu?

Suunnittelun yksityiskohdat

  • Ensisijainen käyttötarkoitus: Ennaltaehkäisy
  • Jako: Ei käytössä
  • Inventiomalli: Yksittäinen ryhmätehtävä
  • Naamiointi: Ei mitään (avoin tarra)

Aseet ja interventiot

Osallistujaryhmä / Arm
Interventio / Hoito
Kokeellinen: Kausi-influenssarokote / Terveet aikuiset vapaaehtoiset
0,5 ml kausiluonteista inaktivoitua influenssarokotetta (IIV) annettiin lihakseen (IM) jokaisen tutkimuskauden päivänä 0 tässä monivuotisessa tutkimuksessa. Tähän tutkimukseen osallistui yhteensä 60 osallistujaa.
Biologinen: Influenssavirusrokote inaktivoitu
Synteettinen rokote, joka koostuu kolmesta inaktivoidusta influenssaviruksesta: kahdesta eri influenssatyypin A kannasta ja yhdestä influenssatyypin B kannasta. Kolmiarvoinen influenssarokote formuloidaan vuosittain tulevalla influenssakaudella vallitsevien influenssakantojen perusteella.

Mitä tutkimuksessa mitataan?

Ensisijaiset tulostoimenpiteet

Tulosmittaus
Toimenpiteen kuvaus
Aikaikkuna
Serokonversion saavuttaneiden potilaiden prosenttiosuus (rokotusta edeltävä hemagglutinaation eston (HI) titteri < 1:10 ja rokotuksen jälkeinen HI-titteri > 1:40 tai rokotusta edeltävä HI-titteri > 1:10 ja vähintään nelinkertainen nousu postitse -rokotteen HI-vasta-ainetiitteri)
Aikaikkuna: Päivä 28
Hemagglutinaation estotiitterit mitattiin vertailuinfluenssan A/H1N1- ja A/H3N2-kantoja sekä influenssa B Yamagata-linjan influenssakantoja vastaan. Kannat sovitettiin kunkin kohteen saaman rokotteen koostumukseen. H1N1:lle ja H3N2:lle hemagglutinaatio suoritettiin käyttämällä reseptoria tuhoava entsyymi (RDE) -käsiteltyä plasmaa ja kalkkunan punasoluja Maailman terveysjärjestön (WHO) standardiprotokollan mukaisesti. Influenssa B:ssä käytettiin sen sijaan marsun punasoluja.
Päivä 28
Prosenttiosuus koehenkilöistä, joiden rokotustitteri on <1:40
Aikaikkuna: Päivä 0
Hemagglutinaation estotiitterit mitattiin vertailuinfluenssan A/H1N1- ja A/H3N2-kantoja sekä influenssa B Yamagata-linjan influenssakantoja vastaan. Kannat sovitettiin kunkin kohteen saaman rokotteen koostumukseen. H1N1:lle ja H3N2:lle hemagglutinaatio suoritettiin käyttämällä RDE-käsiteltyä plasmaa ja kalkkunan punasoluja WHO:n standardiprotokollan mukaisesti. Influenssa B:ssä käytettiin sen sijaan marsun punasoluja.
Päivä 0

Toissijaiset tulostoimenpiteet

Tulosmittaus
Toimenpiteen kuvaus
Aikaikkuna
Päätepiste Immunoglobuliini G (IgG) -tiitterit seerumin vasta-ainevasteille, jotka on suunnattu täyspitkää A/H1N1-hemagglutiniini (HA) -proteiinia vastaan
Aikaikkuna: Päivä 0
ELISA-testit suoritettiin käyttämällä sarjalaimennoksia plasmasta, jota inkuboitiin Maxisorp ELISA-levyillä, jotka oli päällystetty 50 nanogrammalla per kuoppa H1N1-hemagglutiniiniproteiinia kannasta A/Michigan/45/2015. Plasmanäytteet otettiin luovuttajilta, jotka ovat saaneet 2017-18 tai 2018-19 influenssarokotteen. Sitoutunut seerumin IgG havaittiin käyttämällä 1:1000 laimennettua vuohen anti-ihmisen IgG-piparjuuriperoksidaasia (HRP) Jackson Immunoresearchilta ja levyt kehitettiin käyttämällä o-fenyleenidiamiini (OPD) substraattia ja niitä kehitettiin 7 minuuttia. ELISA-päätepistetiitteri määriteltiin plasman vastavuoroiseksi laimennukseksi, joka tuotti taustasta vähennetyn optisen tiheyden 490:n (OD490) arvolla 0,3, mikä vastaa 10 % maksimisitoutumisesta. Päätepistetiitterit määritettiin interpoloimalla sarjalaimennuskäyrän tuloksista käyttämällä Graphpad Prism -ohjelmistoa.
Päivä 0
Päätepiste-IgG-tiitterit seerumin vasta-ainevasteille, jotka on suunnattu täyspitkää A/H1N1-hemagglutiniini (HA) -proteiinia vastaan
Aikaikkuna: Päivä 180
ELISA-testit suoritettiin käyttämällä sarjalaimennoksia plasmasta, jota inkuboitiin Maxisorp ELISA-levyillä, jotka oli päällystetty 50 nanogrammalla per kuoppa H1N1-hemagglutiniiniproteiinia kannasta A/Michigan/45/2015. Plasmanäytteet otettiin luovuttajilta, jotka ovat saaneet 2017-18 tai 2018-19 influenssarokotteen. Sitoutunut seerumin IgG havaittiin käyttämällä 1:1000 laimennettua vuohen anti-ihmis-IgG-HRP:tä Jackson Immunoresearchilta ja levyt kehitettiin käyttämällä OPD-substraattia ja niitä kehitettiin 7 minuuttia. ELISA-päätepistetiitteri määriteltiin plasman vastavuoroiseksi laimennukseksi, joka tuotti taustasta vähennetyn OD490-arvon 0,3, mikä vastaa 10 % maksimisitoutumisesta. Päätepistetiitterit määritettiin interpoloimalla sarjalaimennuskäyrän tuloksista käyttämällä Graphpad Prism -ohjelmistoa.
Päivä 180
Päätepiste-IgG-tiitterit seerumin vasta-ainevasteille, jotka on suunnattu täyspitkää A/H1N1-hemagglutiniini (HA) -proteiinia vastaan
Aikaikkuna: Päivä 28
ELISA-testit suoritettiin käyttämällä sarjalaimennoksia plasmasta, jota inkuboitiin Maxisorp ELISA-levyillä, jotka oli päällystetty 50 nanogrammalla per kuoppa H1N1-hemagglutiniiniproteiinia kannasta A/Michigan/45/2015. Plasmanäytteet otettiin luovuttajilta, jotka ovat saaneet 2017-18 tai 2018-19 influenssarokotteen. Sitoutunut seerumin IgG havaittiin käyttämällä 1:1000 laimennettua vuohen anti-ihmis-IgG-HRP:tä Jackson Immunoresearchilta ja levyt kehitettiin käyttämällä OPD-substraattia ja niitä kehitettiin 7 minuuttia. ELISA-päätepistetiitteri määriteltiin plasman vastavuoroiseksi laimennukseksi, joka tuotti taustasta vähennetyn OD490-arvon 0,3, mikä vastaa 10 % maksimisitoutumisesta. Päätepistetiitterit määritettiin interpoloimalla sarjalaimennuskäyrän tuloksista käyttämällä Graphpad Prism -ohjelmistoa.
Päivä 28
H1N1-hemagglutiniinin (HA) kantaaluetta vastaan ​​suunnattujen seerumin vasta-ainevasteiden päätepisteiden IgG-tiitterit
Aikaikkuna: Päivä 0
ELISA-testit suoritettiin käyttämällä sarjalaimennoksia plasmasta, jota inkuboitiin Maxisorp ELISA-levyillä, jotka oli päällystetty 50 nanogrammalla kuoppaa kohden kimeeristä HA-proteiinia, joka sisälsi H6-influenssaviruksen päädomeenin ja A/California/07/2009-kantadomeenin. Plasmanäytteet otettiin luovuttajilta, jotka ovat saaneet 2017-18 tai 2018-19 influenssarokotteen. Sitoutunut seerumin IgG havaittiin käyttämällä 1:1000 laimennettua vuohen anti-ihmis-IgG-HRP:tä Jackson Immunoresearchilta ja levyt kehitettiin käyttämällä OPD-substraattia ja niitä kehitettiin 7 minuuttia. ELISA-päätepistetiitteri määriteltiin plasman vastavuoroiseksi laimennukseksi, joka tuotti taustasta vähennetyn OD490-arvon 0,3, mikä vastaa 10 % maksimisitoutumisesta. Päätepistetiitterit määritettiin interpoloimalla sarjalaimennuskäyrän tuloksista käyttämällä Graphpad Prism -ohjelmistoa.
Päivä 0
H1N1-hemagglutiniinin (HA) kantaaluetta vastaan ​​suunnattujen seerumin vasta-ainevasteiden päätepisteiden IgG-tiitterit
Aikaikkuna: Päivä 180
ELISA-testit suoritettiin käyttämällä sarjalaimennoksia plasmasta, jota inkuboitiin Maxisorp ELISA-levyillä, jotka oli päällystetty 50 nanogrammalla kuoppaa kohden kimeeristä HA-proteiinia, joka sisälsi H6-influenssaviruksen päädomeenin ja A/California/07/2009-kantadomeenin. Plasmanäytteet otettiin luovuttajilta, jotka ovat saaneet 2017-18 tai 2018-19 influenssarokotteen. Sitoutunut seerumin IgG havaittiin käyttämällä 1:1000 laimennettua vuohen anti-ihmis-IgG-HRP:tä Jackson Immunoresearchilta ja levyt kehitettiin käyttämällä OPD-substraattia ja niitä kehitettiin 7 minuuttia. ELISA-päätepistetiitteri määriteltiin plasman vastavuoroiseksi laimennukseksi, joka tuotti taustasta vähennetyn OD490-arvon 0,3, mikä vastaa 10 % maksimisitoutumisesta. Päätepistetiitterit määritettiin interpoloimalla sarjalaimennuskäyrän tuloksista käyttämällä Graphpad Prism -ohjelmistoa.
Päivä 180
H1N1-hemagglutiniinin (HA) kantaaluetta vastaan ​​suunnattujen seerumin vasta-ainevasteiden päätepisteiden IgG-tiitterit.
Aikaikkuna: Päivä 28
ELISA-testit suoritettiin käyttämällä sarjalaimennoksia plasmasta, jota inkuboitiin Maxisorp ELISA-levyillä, jotka oli päällystetty 50 nanogrammalla kuoppaa kohden kimeeristä HA-proteiinia, joka sisälsi H6-influenssaviruksen päädomeenin ja A/California/07/2009-kantadomeenin. Plasmanäytteet otettiin luovuttajilta, jotka ovat saaneet 2017-18 tai 2018-19 influenssarokotteen. Sitoutunut seerumin IgG havaittiin käyttämällä 1:1000 laimennettua vuohen anti-ihmis-IgG-HRP:tä Jackson Immunoresearchilta ja levyt kehitettiin käyttämällä OPD-substraattia ja niitä kehitettiin 7 minuuttia. ELISA-päätepistetiitteri määriteltiin plasman vastavuoroiseksi laimennukseksi, joka tuotti taustasta vähennetyn OD490-arvon 0,3, mikä vastaa 10 % maksimisitoutumisesta. Päätepistetiitterit määritettiin interpoloimalla sarjalaimennuskäyrän tuloksista käyttämällä Graphpad Prism -ohjelmistoa.
Päivä 28
Ihmisen influenssaspesifisten monoklonaalisten vasta-aineiden ilmentyminen plasmablasteista
Aikaikkuna: Päivä 7
Monoklonaaliset vasta-aineet kloonattiin lajitelluista H1-hemagglutiniinia sitovista soluista, jotka ilmentävät korkeita pitoisuuksia CD38-proteiinin (CD38hi) plasmablasteja, jotka oli eristetty yhdestä luovuttajasta päivänä 7 rokotuksen jälkeen.
Päivä 7
Hemagglutiniinin (HA) pääspesifisten IgG:tä erittävien muisti-B-solujen tiheys IgG:tä erittävien solujen kokonaismäärää kohti
Aikaikkuna: Päivä 0
Perifeerisen veren mononukleaarisoluja vapaaehtoisilta, jotka saivat 2017-18 tai 2018-19 influenssarokotteen, stimuloitiin R-848/interleukiini (IL)-2:lla polyklonaalisen plasmablastien erilaistumisen indusoimiseksi. H1-spesifiset muisti-B-solut havaittiin käyttämällä hemagglutiniiniproteiinia A/Michigan/45/2015 ELISPOT-sieppausantigeeninä ja IgG-detektiorina. Frekvenssit ilmaistiin prosentteina havaituista täplistä käyttämällä kokonais-IgG-sieppausvasta-ainetta. Pääspesifiset muisti-B-solujen taajuudet laskettiin vähentämällä kantaspesifisten IgG-muisti-B-solujen prosenttiosuus H1-spesifisten solujen kokonaismäärästä.
Päivä 0
Hemagglutiniinin (HA) pääspesifisten IgG:tä erittävien muisti-B-solujen tiheys IgG:tä erittävien solujen kokonaismäärää kohti
Aikaikkuna: Päivä 180
Perifeerisen veren mononukleaarisoluja vapaaehtoisilta, jotka saivat 2017-18 tai 2018-19 influenssarokotteen, stimuloitiin R-848/IL-2:lla polyklonaalisen plasmablastien erilaistumisen indusoimiseksi. H1-spesifiset muisti-B-solut havaittiin käyttämällä hemagglutiniiniproteiinia A/Michigan/45/2015 ELISPOT-sieppausantigeeninä ja IgG-detektiorina. Frekvenssit ilmaistiin prosentteina havaituista täplistä käyttämällä kokonais-IgG-sieppausvasta-ainetta. Pääspesifiset muisti-B-solujen taajuudet laskettiin vähentämällä kantaspesifisten IgG-muisti-B-solujen prosenttiosuus H1-spesifisten solujen kokonaismäärästä.
Päivä 180
Hemagglutiniinin (HA) pääspesifisten IgG:tä erittävien muisti-B-solujen tiheys IgG:tä erittävien solujen kokonaismäärää kohti
Aikaikkuna: Päivä 28
Perifeerisen veren mononukleaarisoluja vapaaehtoisilta, jotka saivat 2017-18 tai 2018-19 influenssarokotteen, stimuloitiin R-848/IL-2:lla polyklonaalisen plasmablastien erilaistumisen indusoimiseksi. H1-spesifiset muisti-B-solut havaittiin käyttämällä hemagglutiniiniproteiinia A/Michigan/45/2015 ELISPOT-sieppausantigeeninä ja IgG-detektiorina. Frekvenssit ilmaistiin prosentteina havaituista täplistä käyttämällä kokonais-IgG-sieppausvasta-ainetta. Pääspesifiset muisti-B-solujen taajuudet laskettiin vähentämällä kantaspesifisten IgG-muisti-B-solujen prosenttiosuus H1-spesifisten solujen kokonaismäärästä.
Päivä 28
Hemagglutiniinin (HA) kantaspesifisten IgG:tä erittävien B-muistisolujen tiheys IgG:tä erittävien solujen kokonaismäärää kohti
Aikaikkuna: Päivä 0
Perifeerisen veren mononukleaarisoluja vapaaehtoisilta, jotka saivat 2017-18 tai 2018-19 influenssarokotteen, stimuloitiin R-848/IL-2:lla polyklonaalisen plasmablastien erilaistumisen indusoimiseksi. Kantaspesifiset muisti-B-solut havaittiin käyttämällä kimeeristä hemagglutiniinia, joka sisälsi H6-influenssapäädomeenin ja kantadomeenin A/California/07/2009 ELISPOT-sieppausantigeeninä. Frekvenssit ilmaistiin prosentteina havaituista täplistä käyttämällä kokonais-IgG-sieppausvasta-ainetta.
Päivä 0
Hemagglutiniinin (HA) kantaspesifisten IgG:tä erittävien B-muistisolujen tiheys IgG:tä erittävien solujen kokonaismäärää kohti
Aikaikkuna: Päivä 180
Perifeerisen veren mononukleaarisoluja vapaaehtoisilta, jotka saivat 2017-18 tai 2018-19 influenssarokotteen, stimuloitiin R-848/IL-2:lla polyklonaalisen plasmablastien erilaistumisen indusoimiseksi. Kantaspesifiset muisti-B-solut havaittiin käyttämällä kimeeristä hemagglutiniinia, joka sisälsi H6-influenssapäädomeenin ja kantadomeenin A/California/07/2009 ELISPOT-sieppausantigeeninä. Frekvenssit ilmaistiin prosentteina havaituista täplistä käyttämällä kokonais-IgG-sieppausvasta-ainetta.
Päivä 180
Hemagglutiniinin (HA) kantaspesifisten IgG:tä erittävien B-muistisolujen tiheys IgG:tä erittävien solujen kokonaismäärää kohti
Aikaikkuna: Päivä 28
Perifeerisen veren mononukleaarisoluja vapaaehtoisilta, jotka saivat 2017-18 tai 2018-19 influenssarokotteen, stimuloitiin R-848/IL-2:lla polyklonaalisen plasmablastien erilaistumisen indusoimiseksi. Kantaspesifiset muisti-B-solut havaittiin käyttämällä kimeeristä hemagglutiniinia, joka sisälsi H6-influenssapäädomeenin ja kantadomeenin A/California/07/2009 ELISPOT-sieppausantigeeninä. Frekvenssit ilmaistiin prosentteina havaituista täplistä käyttämällä kokonais-IgG-sieppausvasta-ainetta.
Päivä 28
Ihmisen influenssaspesifisten monoklonaalisten vasta-aineiden toiminta viruksen neutralointimäärityksellä arvioituna
Aikaikkuna: Päivä 7
Madin-Darby koiran munuaissolut (MDCK) 96-kuoppaisilla levyillä infektoitiin kahtena rinnakkaisena 5 tunnin ajan H1N1-influenssaviruksella (kanta A/Michigan/45/2015), jota oli esi-inkuboitu 15 minuuttia 37 asteessa monoklonaalisen influenssan kanssa. vasta-aineita. Esi-inkubaatiot suoritettiin käyttämällä kunkin monoklonaalisen vasta-aineen 2-kertaisia ​​laimennoksia, alkaen pitoisuudesta 30 mikrogrammaa millilitraa kohti. Virusta käytettiin annoksena, joka oli riittävä tuottamaan 5 % infektion vasta-aineen puuttuessa. Infektio arvioitiin 5 tunnin kuluttua metanolilla läpäisevistä soluista värjäämällä influenssan nukleoproteiinispesifisellä hiiren vasta-aineella (HB65), sitten fykoerytriiniin (PE) konjugoidulla anti-hiiri-IgG:llä, mitä seurasi PE-positiivisten solujen tunnistaminen virtaussytometrisesti. Raportoitu 50 % neutraloiva tiitteri vastaa alinta monoklonaalisen vasta-aineen pitoisuutta, joka johti vähintään kaksinkertaiseen virusinfektion vähenemiseen verrattuna kontrolliin, jossa ei ollut vasta-ainetta.
Päivä 7
Ihmisen influenssaspesifisten monoklonaalisten vasta-aineiden toiminta entsyymi-immunosorbenttimäärityksellä (ELISA) arvioituna
Aikaikkuna: Päivä 7
Influenssaspesifisten mAb:iden HA-sitoutuminen arvioitiin ELISA:lla käyttämällä rekombinantti-HA-proteiinia H1N1-kannasta A/California/07/2009. 50 ng HA:ta päällystettiin Maxisorp ELISA-levyjen kuoppaa kohti ja lisättiin mAb:n sarjalaimennoksia. Määritettiin kunkin mAb:n pitoisuus, joka antoi 50 % maksimaalisen sitoutumisen (EC50).
Päivä 7
Ihmisinfluenssaspesifisten monoklonaalisten vasta-aineiden toiminta hemagglutinaation estomäärityksellä (HAI) arvioituna
Aikaikkuna: Päivä 7
Kunkin vasta-aineen HAI-tiitteri määritettiin käyttämällä Maailman terveysjärjestön (WHO) standardiprotokollaa käyttäen H1N1-kantaa A/Michigan/45/2015.
Päivä 7
Quadrivalentin influenssarokotteen immunoglobuliini Gamma-1 (IgG1) ELISA-päätepistetiitteri
Aikaikkuna: Päivä 0
ELISA-tiitterit mitattiin kunkin kohteen saamaa vastaavaa kausiluonteista neliarvoista inaktivoitua influenssarokottetta käyttäen ihmisen IgGl:lle spesifistä sekundaarista vasta-ainetta. Päätepisteen ELISA-tiitteri määriteltiin plasman käänteislaimennukseksi, joka antoi optisen tiheyden (OD) lukeman 0,2, mikä vastasi ~3 standardipoikkeamaa tausta-OD:n yläpuolella ilman plasmaa inkuboitujen ELISA-kuoppien osalta.
Päivä 0
Quadrivalent Influenza Vaccine IgG1 ELISA Endpoint Titer
Aikaikkuna: Päivä 180
ELISA-tiitterit mitattiin kunkin kohteen saamaa vastaavaa kausiluonteista neliarvoista inaktivoitua influenssarokottetta käyttäen ihmisen IgGl:lle spesifistä sekundaarista vasta-ainetta. Päätepisteen ELISA-tiitteri määriteltiin plasman käänteislaimennukseksi, joka antoi optisen tiheyden (OD) lukeman 0,2, mikä vastasi ~3 standardipoikkeamaa tausta-OD:n yläpuolella ilman plasmaa inkuboitujen ELISA-kuoppien osalta.
Päivä 180
Quadrivalent Influenza Vaccine IgG1 ELISA Endpoint Titer
Aikaikkuna: Päivä 28
ELISA-tiitterit mitattiin kunkin kohteen saamaa vastaavaa kausiluonteista neliarvoista inaktivoitua influenssarokottetta käyttäen ihmisen IgGl:lle spesifistä sekundaarista vasta-ainetta. Päätepisteen ELISA-tiitteri määriteltiin plasman käänteislaimennukseksi, joka antoi optisen tiheyden (OD) lukeman 0,2, mikä vastasi ~3 standardipoikkeamaa tausta-OD:n yläpuolella ilman plasmaa inkuboitujen ELISA-kuoppien osalta.
Päivä 28
Plasmablastivasteet hemagglutiniinin (HA) pään antigeenejä vastaan ​​arvioituna suoralla ex Vivo Enzyme-linked Immunospotilla (ELISPOT)
Aikaikkuna: Päivä 7
Plasmablastit (PB) laskettiin suoraan jäädytetystä PBMC:stä ilman stimulaatiota. H1-spesifisten solujen kokonaismäärä havaittiin käyttämällä hemagglutiniiniproteiinia A/Michigan/45/2015 ELISPOT-sieppausantigeeninä ja IgG-detektioina. Taajuudet ilmaistiin havaittujen täplien lukumääränä miljoonaa perifeerisen veren mononukleaarisolua kohti. Pääspesifiset PB-taajuudet laskettiin vähentämällä kantaspesifisten PB:iden lukumäärä miljoonaa perifeerisen veren mononukleaarisolua kohden H1-spesifisen PB:n kokonaismäärästä miljoonaa solua kohti.
Päivä 7
Plasmablastivasteet hemagglutiniinin (HA) kantaantigeenejä vastaan ​​arvioituna suoralla ex Vivo Enzyme-linked Immunospotilla (ELISPOT)
Aikaikkuna: Päivä 7
Plasmablastit (PB) laskettiin suoraan jäädytetystä PBMC:stä ilman stimulaatiota. Kantaspesifiset solut havaittiin käyttämällä kimeeristä hemagglutiniinia, joka sisälsi H6-influenssapäädomeenin ja kantadomeenin A/California/07/2009 ELISPOT-sieppausantigeeninä ja IgG-detektioina. Taajuudet ilmaistiin havaittujen täplien lukumääränä miljoonaa perifeerisen veren mononukleaarisolua kohti.
Päivä 7

Yhteistyökumppanit ja tutkijat

Täältä löydät tähän tutkimukseen osallistuvat ihmiset ja organisaatiot.

Sponsori

National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID)

Tutkijat

  • Päätutkija: Aneesh Mehta, MD, Emory University

Julkaisuja ja hyödyllisiä linkkejä

Tutkimusta koskevien tietojen syöttämisestä vastaava henkilö toimittaa nämä julkaisut vapaaehtoisesti. Nämä voivat koskea mitä tahansa tutkimukseen liittyvää.

Yleiset julkaisut

Opintojen ennätyspäivät

Nämä päivämäärät seuraavat ClinicalTrials.gov-sivustolle lähetettyjen tutkimustietueiden ja yhteenvetojen edistymistä. National Library of Medicine (NLM) tarkistaa tutkimustiedot ja raportoidut tulokset varmistaakseen, että ne täyttävät tietyt laadunvalvontastandardit, ennen kuin ne julkaistaan ​​julkisella verkkosivustolla.

Opi tärkeimmät päivämäärät

Opiskelun aloitus (Todellinen)

Keskiviikko 1. huhtikuuta 2015

Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)

Perjantai 6. joulukuuta 2019

Opintojen valmistuminen (Todellinen)

Torstai 31. joulukuuta 2020

Opintoihin ilmoittautumispäivät

Ensimmäinen lähetetty

Torstai 5. maaliskuuta 2015

Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit

Torstai 5. maaliskuuta 2015

Ensimmäinen Lähetetty (Arvioitu)

Keskiviikko 11. maaliskuuta 2015

Tutkimustietojen päivitykset

Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)

Keskiviikko 25. lokakuuta 2023

Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit

Torstai 5. lokakuuta 2023

Viimeksi vahvistettu

Torstai 1. marraskuuta 2018

Lisää tietoa

Tähän tutkimukseen liittyvät termit

Avainsanat

Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja

Muut tutkimustunnusnumerot

  • 14-0071 (University of Colorado, Denver)
  • HHSN272201400004C

Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)

Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?

EI

Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat

Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta

Joo

Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta

Ei

Yhdysvalloissa valmistettu ja sieltä viety tuote

Ei

Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .

Tilaa