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Valutazione delle risposte immunitarie umane alla vaccinazione contro il virus dell'influenza in volontari sani

5 ottobre 2023 aggiornato da: National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID)
Questo è uno studio in aperto, a braccio singolo, sulle risposte immunologiche longitudinali al vaccino antinfluenzale in soggetti adulti sani. Questo studio arruolerà maschi e femmine non gravide, 18-49 anni. I soggetti saranno sottoposti a screening al momento dell'iscrizione con una storia, un esame fisico e test di laboratorio per garantire che siano abbastanza sani per partecipare. I soggetti idonei saranno vaccinati con un vaccino contro l'influenza stagionale inattivato (IIV) approvato dalla FDA secondo il foglietto illustrativo. Lo studio arruolerà 10 volontari sani per stagione vaccinale negli anni 1, 2 e 4; così come 20 volontari sani per stagione vaccinale negli anni 5 e 6 di questo studio, per un arruolamento totale di 70 soggetti. L'obiettivo primario dello studio è quello di caratterizzare i plasmablasti HA-specifici e le cellule B di memoria dopo la vaccinazione antinfluenzale.

Panoramica dello studio

Stato

Terminato

Condizioni

Intervento / Trattamento

Descrizione dettagliata

Questo è uno studio in aperto, a braccio singolo, sulle risposte immunologiche longitudinali al vaccino antinfluenzale in soggetti adulti sani. Questo studio arruolerà maschi e femmine non gravide, 18-49 anni. La durata dello studio è di 6 anni e la durata dei partecipanti di 180 giorni. I soggetti saranno sottoposti a screening al momento dell'iscrizione con una storia, un esame fisico e test di laboratorio per garantire che siano abbastanza sani per partecipare. I soggetti idonei saranno vaccinati con un vaccino contro l'influenza stagionale inattivato (IIV) approvato dalla FDA secondo il foglietto illustrativo. Saranno raccolti circa 450 ml di sangue per i test di ricerca durante il corso dello studio. Nello specifico verranno raccolti 16 ml per lo screening; 48 ml saranno raccolti al momento dell'iscrizione; 96 ml saranno raccolti nei giorni di visita 7 e 14; e 64 ml saranno raccolti a 28, 90 e 180 giorni dopo la vaccinazione. Lo studio arruolerà 10 volontari sani per stagione vaccinale negli anni 1, 2 e 4; così come 20 volontari sani per stagione vaccinale negli anni 5 e 6 di questo studio, per un arruolamento totale di 70 soggetti. Le persone che completano lo studio avranno la possibilità di iscriversi nuovamente negli anni successivi purché continuino a soddisfare tutti i criteri di inclusione/esclusione. I soggetti che si iscrivono nuovamente riceveranno nuovamente il consenso, riceveranno nuovi identificativi del soggetto e verranno conteggiati per l'obiettivo del numero di immatricolazioni per ogni anno di partecipazione. A causa della pandemia di COVID-19, tutte le ricerche non essenziali sono state interrotte a metà marzo 2020. Le nuove iscrizioni sono state sospese per questo studio. L'obiettivo primario dello studio è quello di caratterizzare i plasmablasti HA-specifici e le cellule B di memoria dopo la vaccinazione antinfluenzale e l'obiettivo secondario è quello di indagare la longevità dell'immunità umorale al virus dell'influenza negli esseri umani.

Tipo di studio

Interventistico

Iscrizione (Effettivo)

60

Fase

  • Fase 4

Contatti e Sedi

Questa sezione fornisce i recapiti di coloro che conducono lo studio e informazioni su dove viene condotto lo studio.

Luoghi di studio

  • Stati Uniti
    • Georgia
      • Atlanta, Georgia, Stati Uniti, 30322-1059
        • Emory University Hospital - W. Dean Warren General Clinical Research Center (GCRC)

Criteri di partecipazione

I ricercatori cercano persone che corrispondano a una certa descrizione, chiamata criteri di ammissibilità. Alcuni esempi di questi criteri sono le condizioni generali di salute di una persona o trattamenti precedenti.

Criteri di ammissibilità

Età idonea allo studio

Da 18 anni a 49 anni (Adulto)

Accetta volontari sani

Sì

Descrizione

Criterio di inclusione:

  1. Soggetti di sesso maschile o femminile di età compresa tra i 18 ei 49 anni compresi.
  2. - Soggetti in grado di fornire il consenso informato scritto prima dell'inizio di qualsiasi procedura di studio. Soggetti in grado di comprendere e rispettare le procedure di studio pianificate ed essere disponibili per tutte le visite di studio.

  3. Screening di laboratori entro i limiti normali per gli intervalli normali del laboratorio locale o considerati clinicamente non significativi dallo sperimentatore. Gli intervalli di laboratorio normali sono elencati di seguito:

    A. Ematologia:

    • Emoglobina: maschio- 12,9-16,1 gm/dL, femmina- 11,4-14,4 g/dl
    • Globuli bianchi (WBC): maschi- 4,2-9,2/uL, Femmina- 4-10/uL
    • Conta piastrinica: 150-400/uL

    B. Chimiche:

    • Funzione renale: velocità di filtrazione glomerulare (VFG) > / = 60 mL/min/1,73 m^2;
    • Enzimi epatici: Albumina > / = 3,5 g/dL; ALT<66U/L; AST<62 U/L
  4. Soggetti che non hanno ricevuto il vaccino contro l'influenza stagionale nell'attuale stagione influenzale e non si sospetta che abbiano avuto un'infezione influenzale nell'attuale stagione influenzale.
  5. I soggetti di sesso femminile in età fertile devono presentare un test di gravidanza sulle urine negativo alla visita di screening, alla visita di iscrizione e a tutte le successive visite dello studio per più di 14 giorni dall'ultimo test di gravidanza.

Criteri di esclusione:

  1. Infezione nota da HIV, HCV o HBV. Queste informazioni saranno ottenute verbalmente dal paziente.
  2. Se donna, gravidanza attiva o allattamento al seno o prevede una gravidanza durante la partecipazione allo studio.
  3. Condizioni mediche croniche che causano immunodeficienza o che richiedono farmaci che potrebbero alterare la funzione immunitaria come immunosoppressori e immunostimolatori.
  4. Avere qualsiasi malattia o condizione medica che, a parere del ricercatore principale del sito o del sub-ricercatore appropriato, è una controindicazione alla partecipazione allo studio. Ciò include qualsiasi malattia o condizione medica cronica, definita come persistente per 3 mesi (definiti come 90 giorni) o più, che esporrebbe il soggetto a un rischio inaccettabile di lesioni, renderebbe il soggetto incapace di soddisfare i requisiti del protocollo o potrebbe interferire con la valutazione delle risposte o il completamento con successo di questo studio da parte del soggetto
  5. Avere una malattia acuta, come determinato dal ricercatore principale del sito o dal ricercatore secondario appropriato, entro 72 ore prima della vaccinazione dello studio. Una malattia acuta che è quasi risolta con solo sintomi residui minori rimanenti è ammissibile se, secondo l'opinione del ricercatore principale del sito o del subinvestigatore appropriato, i sintomi residui non interferiranno con la capacità di valutare i parametri di sicurezza come richiesto dal protocollo.
  6. Persone che assumono anticoagulanti, terapia aspirina a lungo termine o steroidi sistemici a lungo termine (più di 3 mesi negli ultimi 12 mesi e qualsiasi entro 30 giorni).
  7. Ipersensibilità o allergia nota alle uova, alle proteine ​​dell'uovo o del pollo o ad altri componenti del vaccino in studio;
  8. Avere una nota allergia al lattice;
  9. Avere una storia di reazioni gravi a seguito di precedente immunizzazione con vaccini contro il virus dell'influenza autorizzati.
  10. Avere una storia di sindrome di Guillain-Barre.
  11. Soggetti che hanno avuto o si sospetta che abbiano avuto un'infezione influenzale nell'attuale stagione influenzale.
  12. Soggetti che, allo screening, presentano segni vitali anormali e/o esame fisico, inclusa una temperatura > / = 38,0 C, pressione arteriosa sistolica < / = 90 o > / = 160 mmHg, polso < / = 60 o > 110 battiti al minuto, nuova eruzione cutanea, segni di infezione.
  13. Soggetti che hanno già ricevuto il vaccino antinfluenzale stagionale nell'attuale stagione vaccinale antinfluenzale.

Piano di studio

Questa sezione fornisce i dettagli del piano di studio, compreso il modo in cui lo studio è progettato e ciò che lo studio sta misurando.

Come è strutturato lo studio?

Dettagli di progettazione

  • Scopo principale: Prevenzione
  • Assegnazione: N / A
  • Modello interventistico: Assegnazione di gruppo singolo
  • Mascheramento: Nessuno (etichetta aperta)

Armi e interventi

Gruppo di partecipanti / Arm
Intervento / Trattamento
Sperimentale: Vaccino antinfluenzale stagionale/Volontari adulti sani
Per questo studio pluriennale, 0,5 ml di vaccino influenzale inattivato stagionale (IIV) sono stati somministrati per via intramuscolare (IM) il giorno 0 di ciascuna stagione di studio. In questo studio sono stati arruolati un totale di 60 partecipanti.
Biologico: Vaccino contro il virus dell'influenza inattivato
Un vaccino sintetico costituito da tre virus influenzali inattivati: due diversi ceppi influenzali di tipo A e un ceppo influenzale di tipo B. Il vaccino influenzale trivalente viene formulato ogni anno, sulla base dei ceppi influenzali che si prevede saranno prevalenti nella prossima stagione influenzale.

Cosa sta misurando lo studio?

Misure di risultato primarie

Misura del risultato
Misura Descrizione
Lasso di tempo
Percentuale di soggetti che hanno ottenuto sieroconversione (titolo di inibizione dell'emoagglutinazione (HI) pre-vaccinazione <1:10 e un titolo HI post-vaccinazione >1:40 o un titolo HI pre-vaccinazione >1:10 e un aumento minimo di quattro volte nel periodo post-vaccinazione -titolo anticorpale HI della vaccinazione)
Lasso di tempo: Giorno 28
I titoli di inibizione dell'emoagglutinazione sono stati misurati rispetto ai ceppi influenzali di riferimento A/H1N1 e A/H3N2, nonché ai ceppi influenzali del lignaggio influenzale B Yamagata. I ceppi sono stati abbinati alla composizione del vaccino ricevuto da ciascun soggetto. Per H1N1 e H3N2, l'emoagglutinazione è stata eseguita utilizzando plasma trattato con l'enzima distruttore dei recettori (RDE) e globuli rossi di tacchino seguendo il protocollo standard dell'Organizzazione Mondiale della Sanità (OMS). Per l’influenza B sono stati invece utilizzati globuli rossi di cavia.
Giorno 28
Percentuale di soggetti con titolo pre-vaccinazione <1:40
Lasso di tempo: Giorno 0
I titoli di inibizione dell'emoagglutinazione sono stati misurati rispetto ai ceppi influenzali di riferimento A/H1N1 e A/H3N2, nonché ai ceppi influenzali del lignaggio influenzale B Yamagata. I ceppi sono stati abbinati alla composizione del vaccino ricevuto da ciascun soggetto. Per H1N1 e H3N2, l'emoagglutinazione è stata eseguita utilizzando plasma trattato con RDE e globuli rossi di tacchino seguendo il protocollo standard dell'OMS. Per l’influenza B sono stati invece utilizzati globuli rossi di cavia.
Giorno 0

Misure di risultato secondarie

Misura del risultato
Misura Descrizione
Lasso di tempo
Titoli di immunoglobulina G (IgG) endpoint per le risposte anticorpali sieriche dirette contro la proteina emoagglutinina (HA) A/H1N1 a lunghezza intera
Lasso di tempo: Giorno 0
Gli ELISA sono stati eseguiti utilizzando diluizioni seriali di plasma incubato su piastre ELISA Maxisorp rivestite con 50 nanogrammi per pozzetto di proteina emoagglutinina H1N1 proveniente dal ceppo A/Michigan/45/2015. I campioni di plasma sono stati prelevati da donatori che hanno ricevuto il vaccino antinfluenzale 2017-18 o 2018-19. Le IgG sieriche legate sono state rilevate utilizzando la perossidasi di rafano (HRP) anti-IgG umane di capra diluite 1:1000 da Jackson Immunoresearch e le piastre sono state sviluppate utilizzando il substrato di o-fenilendiammina (OPD) e sviluppate per 7 minuti. Il titolo endpoint ELISA è stato definito come la diluizione reciproca del plasma che ha prodotto una densità ottica sottratta dal fondo a 490 (OD490) pari a 0,3, corrispondente al 10% del legame massimo. I titoli degli endpoint sono stati determinati mediante interpolazione dai risultati della curva di diluizione seriale utilizzando il software Graphpad Prism.
Giorno 0
Titoli IgG endpoint per le risposte anticorpali sieriche dirette contro la proteina emoagglutinina (HA) A/H1N1 a lunghezza intera
Lasso di tempo: Giorno 180
Gli ELISA sono stati eseguiti utilizzando diluizioni seriali di plasma incubato su piastre ELISA Maxisorp rivestite con 50 nanogrammi per pozzetto di proteina emoagglutinina H1N1 proveniente dal ceppo A/Michigan/45/2015. I campioni di plasma sono stati prelevati da donatori che hanno ricevuto il vaccino antinfluenzale 2017-18 o 2018-19. Le IgG sieriche legate sono state rilevate utilizzando IgG-HRP antiumani di capra diluiti 1:1000 da Jackson Immunoresearch e le piastre sono state sviluppate utilizzando il substrato OPD e sviluppate per 7 minuti. Il titolo endpoint ELISA è stato definito come la diluizione reciproca del plasma che ha prodotto un valore OD490 sottratto dal fondo pari a 0,3, corrispondente al 10% del legame massimo. I titoli degli endpoint sono stati determinati mediante interpolazione dai risultati della curva di diluizione seriale utilizzando il software Graphpad Prism.
Giorno 180
Titoli IgG endpoint per le risposte anticorpali sieriche dirette contro la proteina emoagglutinina (HA) A/H1N1 a lunghezza intera
Lasso di tempo: Giorno 28
Gli ELISA sono stati eseguiti utilizzando diluizioni seriali di plasma incubato su piastre ELISA Maxisorp rivestite con 50 nanogrammi per pozzetto di proteina emoagglutinina H1N1 proveniente dal ceppo A/Michigan/45/2015. I campioni di plasma sono stati prelevati da donatori che hanno ricevuto il vaccino antinfluenzale 2017-18 o 2018-19. Le IgG sieriche legate sono state rilevate utilizzando IgG-HRP antiumani di capra diluiti 1:1000 da Jackson Immunoresearch e le piastre sono state sviluppate utilizzando il substrato OPD e sviluppate per 7 minuti. Il titolo endpoint ELISA è stato definito come la diluizione reciproca del plasma che ha prodotto un valore OD490 sottratto dal fondo pari a 0,3, corrispondente al 10% del legame massimo. I titoli degli endpoint sono stati determinati mediante interpolazione dai risultati della curva di diluizione seriale utilizzando il software Graphpad Prism.
Giorno 28
Titoli IgG endpoint per le risposte anticorpali sieriche dirette contro la regione staminale dell'emoagglutinina (HA) H1N1
Lasso di tempo: Giorno 0
Gli ELISA sono stati eseguiti utilizzando diluizioni seriali di plasma incubato su piastre ELISA Maxisorp rivestite con 50 nanogrammi per pozzetto di una proteina chimerica HA contenente il dominio della testa di un virus influenzale H6 e il dominio dello stelo di A/California/07/2009. I campioni di plasma sono stati prelevati da donatori che hanno ricevuto il vaccino antinfluenzale 2017-18 o 2018-19. Le IgG sieriche legate sono state rilevate utilizzando IgG-HRP antiumani di capra diluiti 1:1000 da Jackson Immunoresearch e le piastre sono state sviluppate utilizzando il substrato OPD e sviluppate per 7 minuti. Il titolo endpoint ELISA è stato definito come la diluizione reciproca del plasma che ha prodotto un valore OD490 sottratto dal fondo pari a 0,3, corrispondente al 10% del legame massimo. I titoli degli endpoint sono stati determinati mediante interpolazione dai risultati della curva di diluizione seriale utilizzando il software Graphpad Prism.
Giorno 0
Titoli IgG endpoint per le risposte anticorpali sieriche dirette contro la regione staminale dell'emoagglutinina (HA) H1N1
Lasso di tempo: Giorno 180
Gli ELISA sono stati eseguiti utilizzando diluizioni seriali di plasma incubato su piastre ELISA Maxisorp rivestite con 50 nanogrammi per pozzetto di una proteina chimerica HA contenente il dominio della testa di un virus influenzale H6 e il dominio dello stelo di A/California/07/2009. I campioni di plasma sono stati prelevati da donatori che hanno ricevuto il vaccino antinfluenzale 2017-18 o 2018-19. Le IgG sieriche legate sono state rilevate utilizzando IgG-HRP antiumani di capra diluiti 1:1000 da Jackson Immunoresearch e le piastre sono state sviluppate utilizzando il substrato OPD e sviluppate per 7 minuti. Il titolo endpoint ELISA è stato definito come la diluizione reciproca del plasma che ha prodotto un valore OD490 sottratto dal fondo pari a 0,3, corrispondente al 10% del legame massimo. I titoli degli endpoint sono stati determinati mediante interpolazione dai risultati della curva di diluizione seriale utilizzando il software Graphpad Prism.
Giorno 180
Titoli IgG endpoint per le risposte anticorpali sieriche dirette contro la regione staminale dell'emoagglutinina (HA) H1N1.
Lasso di tempo: Giorno 28
Gli ELISA sono stati eseguiti utilizzando diluizioni seriali di plasma incubato su piastre ELISA Maxisorp rivestite con 50 nanogrammi per pozzetto di una proteina chimerica HA contenente il dominio della testa di un virus influenzale H6 e il dominio dello stelo di A/California/07/2009. I campioni di plasma sono stati prelevati da donatori che hanno ricevuto il vaccino antinfluenzale 2017-18 o 2018-19. Le IgG sieriche legate sono state rilevate utilizzando IgG-HRP antiumani di capra diluiti 1:1000 da Jackson Immunoresearch e le piastre sono state sviluppate utilizzando il substrato OPD e sviluppate per 7 minuti. Il titolo endpoint ELISA è stato definito come la diluizione reciproca del plasma che ha prodotto un valore OD490 sottratto dal fondo pari a 0,3, corrispondente al 10% del legame massimo. I titoli degli endpoint sono stati determinati mediante interpolazione dai risultati della curva di diluizione seriale utilizzando il software Graphpad Prism.
Giorno 28
Espressione di anticorpi monoclonali specifici dell'influenza umana da plasmablasti
Lasso di tempo: Giorno 7
Gli anticorpi monoclonali sono stati clonati da cellule H1 leganti l'emoagglutinina selezionate che esprimevano alti livelli di plasmablasti della proteina CD38 (CD38hi) isolati da un singolo donatore il giorno 7 dopo la vaccinazione.
Giorno 7
Frequenza delle cellule B di memoria secernenti IgG specifiche per la testa dell'emoagglutinina (HA) per cellule secernenti IgG totali
Lasso di tempo: Giorno 0
Le cellule mononucleate del sangue periferico di volontari che hanno ricevuto il vaccino antinfluenzale 2017-18 o 2018-19 sono state stimolate con R-848/interleuchina (IL)-2 per indurre la differenziazione dei plasmablasti policlonali. Le cellule B di memoria specifiche per H1 totali sono state rilevate utilizzando la proteina emoagglutinina di A/Michigan/45/2015 come antigene di cattura ELISPOT e rilevamento di IgG. Le frequenze sono state espresse come percentuale delle macchie osservate utilizzando l'anticorpo di cattura IgG totale. Le frequenze delle cellule B di memoria specifiche della testa sono state calcolate sottraendo la percentuale di cellule B di memoria IgG specifiche per lo stelo dalla percentuale di cellule H1 specifiche totali.
Giorno 0
Frequenza delle cellule B di memoria secernenti IgG specifiche per la testa dell'emoagglutinina (HA) per cellule secernenti IgG totali
Lasso di tempo: Giorno 180
Le cellule mononucleari del sangue periferico di volontari che hanno ricevuto il vaccino antinfluenzale 2017-18 o 2018-19 sono state stimolate con R-848/IL-2 per indurre la differenziazione dei plasmablasti policlonali. Le cellule B di memoria specifiche per H1 totali sono state rilevate utilizzando la proteina emoagglutinina di A/Michigan/45/2015 come antigene di cattura ELISPOT e rilevamento di IgG. Le frequenze sono state espresse come percentuale delle macchie osservate utilizzando l'anticorpo di cattura IgG totale. Le frequenze delle cellule B di memoria specifiche della testa sono state calcolate sottraendo la percentuale di cellule B di memoria IgG specifiche per lo stelo dalla percentuale di cellule H1 specifiche totali.
Giorno 180
Frequenza delle cellule B di memoria secernenti IgG specifiche per la testa dell'emoagglutinina (HA) per cellule secernenti IgG totali
Lasso di tempo: Giorno 28
Le cellule mononucleari del sangue periferico di volontari che hanno ricevuto il vaccino antinfluenzale 2017-18 o 2018-19 sono state stimolate con R-848/IL-2 per indurre la differenziazione dei plasmablasti policlonali. Le cellule B di memoria specifiche per H1 totali sono state rilevate utilizzando la proteina emoagglutinina di A/Michigan/45/2015 come antigene di cattura ELISPOT e rilevamento di IgG. Le frequenze sono state espresse come percentuale delle macchie osservate utilizzando l'anticorpo di cattura IgG totale. Le frequenze delle cellule B di memoria specifiche della testa sono state calcolate sottraendo la percentuale di cellule B di memoria IgG specifiche per lo stelo dalla percentuale di cellule H1 specifiche totali.
Giorno 28
Frequenza delle cellule B di memoria secernenti IgG specifiche per lo stelo dell'emoagglutinina (HA) per cellule secernenti IgG totali
Lasso di tempo: Giorno 0
Le cellule mononucleari del sangue periferico di volontari che hanno ricevuto il vaccino antinfluenzale 2017-18 o 2018-19 sono state stimolate con R-848/IL-2 per indurre la differenziazione dei plasmablasti policlonali. Le cellule B di memoria staminali specifiche sono state rilevate utilizzando un'emoagglutinina chimerica contenente un dominio della testa dell'influenza H6 e il dominio staminale di A/California/07/2009 come antigene di cattura ELISPOT. Le frequenze sono state espresse come percentuale delle macchie osservate utilizzando l'anticorpo di cattura IgG totale.
Giorno 0
Frequenza delle cellule B di memoria secernenti IgG specifiche per lo stelo dell'emoagglutinina (HA) per cellule secernenti IgG totali
Lasso di tempo: Giorno 180
Le cellule mononucleari del sangue periferico di volontari che hanno ricevuto il vaccino antinfluenzale 2017-18 o 2018-19 sono state stimolate con R-848/IL-2 per indurre la differenziazione dei plasmablasti policlonali. Le cellule B di memoria staminali specifiche sono state rilevate utilizzando un'emoagglutinina chimerica contenente un dominio della testa dell'influenza H6 e il dominio staminale di A/California/07/2009 come antigene di cattura ELISPOT. Le frequenze sono state espresse come percentuale delle macchie osservate utilizzando l'anticorpo di cattura IgG totale.
Giorno 180
Frequenza delle cellule B di memoria secernenti IgG specifiche per lo stelo dell'emoagglutinina (HA) per cellule secernenti IgG totali
Lasso di tempo: Giorno 28
Le cellule mononucleari del sangue periferico di volontari che hanno ricevuto il vaccino antinfluenzale 2017-18 o 2018-19 sono state stimolate con R-848/IL-2 per indurre la differenziazione dei plasmablasti policlonali. Le cellule B di memoria staminali specifiche sono state rilevate utilizzando un'emoagglutinina chimerica contenente un dominio della testa dell'influenza H6 e il dominio staminale di A/California/07/2009 come antigene di cattura ELISPOT. Le frequenze sono state espresse come percentuale delle macchie osservate utilizzando l'anticorpo di cattura IgG totale.
Giorno 28
Funzione degli anticorpi monoclonali specifici dell'influenza umana valutata mediante test di neutralizzazione del virus
Lasso di tempo: Giorno 7
Cellule di rene canino Madin-Darby (MDCK) in piastre da 96 pozzetti sono state infettate in duplicato per 5 ore con il virus dell'influenza H1N1 (ceppo A/Michigan/45/2015) che era stato pre-incubato per 15 minuti a 37 gradi con virus influenzale monoclonale anticorpi. Le pre-incubazioni sono state eseguite utilizzando diluizioni seriali doppie di ciascun anticorpo monoclonale, iniziando da una concentrazione di 30 microgrammi per millilitro. Il virus è stato utilizzato a una dose sufficiente a produrre il 5% di infezione in assenza di anticorpi. L'infezione è stata valutata dopo 5 ore in cellule permeabilizzate con metanolo mediante colorazione con un anticorpo murino specifico per la nucleoproteina influenzale (HB65), quindi IgG anti-topo coniugato con ficoeritrina (PE), seguito dall'identificazione delle cellule PE-positive mediante citometria a flusso. Il titolo neutralizzante del 50% riportato è equivalente alla concentrazione più bassa di anticorpo monoclonale che ha determinato una riduzione maggiore o uguale a 2 volte dell'infezione virale rispetto al controllo privo di anticorpi.
Giorno 7
Funzione degli anticorpi monoclonali specifici dell'influenza umana valutata mediante test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA)
Lasso di tempo: Giorno 7
I mAb specifici per l'influenza sono stati valutati per il legame dell'HA mediante ELISA utilizzando la proteina HA ricombinante del ceppo H1N1 A/California/07/2009. 50 ng di HA sono stati rivestiti per pozzetto nelle piastre Maxisorp ELISA e sono state aggiunte diluizioni seriali di mAb. È stata determinata la concentrazione di ciascun mAb che ha fornito il 50% di legame massimo (EC50).
Giorno 7
Funzione degli anticorpi monoclonali specifici dell'influenza umana valutata mediante test di inibizione dell'emoagglutinazione (HAI)
Lasso di tempo: Giorno 7
Il titolo HAI per ciascun anticorpo è stato determinato utilizzando il protocollo standard dell'Organizzazione Mondiale della Sanità (OMS) utilizzando il ceppo H1N1 A/Michigan/45/2015.
Giorno 7
Titolo endpoint ELISA dell'immunoglobulina gamma-1 (IgG1) del vaccino influenzale quadrivalente
Lasso di tempo: Giorno 0
I titoli ELISA sono stati misurati rispetto al vaccino antinfluenzale inattivato quadrivalente stagionale corrispondente ricevuto da ciascun soggetto utilizzando un anticorpo secondario specifico per l'IgG1 umana. Il titolo ELISA endpoint è stato definito come la diluizione reciproca del plasma che ha dato una lettura della densità ottica (OD) di 0,2, che corrispondeva a circa 3 deviazioni standard al di sopra della OD di fondo per i pozzetti ELISA incubati senza plasma.
Giorno 0
Titolo endpoint ELISA del vaccino influenzale quadrivalente IgG1
Lasso di tempo: Giorno 180
I titoli ELISA sono stati misurati rispetto al vaccino antinfluenzale inattivato quadrivalente stagionale corrispondente ricevuto da ciascun soggetto utilizzando un anticorpo secondario specifico per l'IgG1 umana. Il titolo ELISA endpoint è stato definito come la diluizione reciproca del plasma che ha dato una lettura della densità ottica (OD) di 0,2, che corrispondeva a circa 3 deviazioni standard al di sopra della OD di fondo per i pozzetti ELISA incubati senza plasma.
Giorno 180
Titolo endpoint ELISA del vaccino influenzale quadrivalente IgG1
Lasso di tempo: Giorno 28
I titoli ELISA sono stati misurati rispetto al vaccino antinfluenzale inattivato quadrivalente stagionale corrispondente ricevuto da ciascun soggetto utilizzando un anticorpo secondario specifico per l'IgG1 umana. Il titolo ELISA endpoint è stato definito come la diluizione reciproca del plasma che ha dato una lettura della densità ottica (OD) di 0,2, che corrispondeva a circa 3 deviazioni standard al di sopra della OD di fondo per i pozzetti ELISA incubati senza plasma.
Giorno 28
Risposte dei plasmablasti contro gli antigeni della testa dell'emoagglutinina (HA) valutate mediante immunospot legato all'enzima diretto ex vivo (ELISPOT)
Lasso di tempo: Giorno 7
I plasmablasti (PB) sono stati contati direttamente dai PBMC congelati senza stimolazione. Le cellule specifiche H1 totali sono state rilevate utilizzando la proteina emoagglutinina di A/Michigan/45/2015 come antigene di cattura ELISPOT e rilevamento di IgG. Le frequenze sono state espresse come numero di macchie osservate per milione di cellule mononucleari del sangue periferico. Le frequenze PB specifiche della testa sono state calcolate sottraendo il numero di PB specifico per lo stelo per milione di cellule mononucleari del sangue periferico dal numero di PB specifico per H1 totale per milione di cellule.
Giorno 7
Risposte dei plasmablasti contro gli antigeni staminali dell'emoagglutinina (HA) valutate mediante immunospot legato all'enzima diretto ex vivo (ELISPOT)
Lasso di tempo: Giorno 7
I plasmablasti (PB) sono stati contati direttamente dai PBMC congelati senza stimolazione. Le cellule staminali specifiche sono state rilevate utilizzando un'emoagglutinina chimerica contenente un dominio della testa dell'influenza H6 e il dominio staminale di A/California/07/2009 come antigene di cattura ELISPOT e rilevamento di IgG. Le frequenze sono state espresse come numero di macchie osservate per milione di cellule mononucleari del sangue periferico.
Giorno 7

Collaboratori e investigatori

Qui è dove troverai le persone e le organizzazioni coinvolte in questo studio.

Sponsor

National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID)

Investigatori

  • Investigatore principale: Aneesh Mehta, MD, Emory University

Pubblicazioni e link utili

La persona responsabile dell'inserimento delle informazioni sullo studio fornisce volontariamente queste pubblicazioni. Questi possono riguardare qualsiasi cosa relativa allo studio.

Pubblicazioni generali

Studiare le date dei record

Queste date tengono traccia dell'avanzamento della registrazione dello studio e dell'invio dei risultati di sintesi a ClinicalTrials.gov. I record degli studi e i risultati riportati vengono esaminati dalla National Library of Medicine (NLM) per assicurarsi che soddisfino specifici standard di controllo della qualità prima di essere pubblicati sul sito Web pubblico.

Studia le date principali

Inizio studio (Effettivo)

1 aprile 2015

Completamento primario (Effettivo)

6 dicembre 2019

Completamento dello studio (Effettivo)

31 dicembre 2020

Date di iscrizione allo studio

Primo inviato

5 marzo 2015

Primo inviato che soddisfa i criteri di controllo qualità

5 marzo 2015

Primo Inserito (Stimato)

11 marzo 2015

Aggiornamenti dei record di studio

Ultimo aggiornamento pubblicato (Effettivo)

25 ottobre 2023

Ultimo aggiornamento inviato che soddisfa i criteri QC

5 ottobre 2023

Ultimo verificato

1 novembre 2018

Maggiori informazioni

Termini relativi a questo studio

Parole chiave

Termini MeSH pertinenti aggiuntivi

Altri numeri di identificazione dello studio

  • 14-0071 (University of Colorado, Denver)
  • HHSN272201400004C

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Hai intenzione di condividere i dati dei singoli partecipanti (IPD)?

NO

Informazioni su farmaci e dispositivi, documenti di studio

Studia un prodotto farmaceutico regolamentato dalla FDA degli Stati Uniti

Sì

Studia un dispositivo regolamentato dalla FDA degli Stati Uniti

No

prodotto fabbricato ed esportato dagli Stati Uniti

No

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