Monipeptidirokotteen turvallisuus- ja immunogeenisuuskoe COVID-19-infektion estämiseksi aikuisilla (pVAC)

SARS-CoV-2-peptidirokote Tämän tutkimuksen tavoitteena on tutkia SARS-CoV-2-spesifisistä HLA-luokan II peptideistä koostuvan peptidirokotteen turvallisuutta ja immunogeenisyyttä vapaaehtoisilla, joilla ei ole aiempaa tai nykyistä SARS-CoV-2-infektiota.

T-soluepitooppien tunnistaminen ja karakterisointi on immunologian laitoksen pitkäaikainen ja vertaansa vailla oleva asiantuntemus. Tämä ainutlaatuinen lähestymistapa perustuu i) HLA-sitoutumissekvenssien ennustamiseen HLA-luokan I ja luokan II alleeleille käyttämällä maailman ensimmäistä ennustustyökalua (www.syfpeithi.de) ja uudempia, jalostuneempia menetelmiä, jotka kaikki perustuvat SYFPEITHI:hen (MHC-tietokanta). ligandit), ii) luonnollisesti esiintyvien HLA luokan I ja luokan II ligandien tunnistaminen, iii) synteettisten peptidien synteesi ja iv) T-soluepitooppien ja peptidispesifisten erilaistumisklustereiden (CD)4+ ja CD8+ karakterisointi. T-soluvasteet. Tätä strategiaa on viime vuosina sovellettu menestyksekkäästi eri viruksista, kuten sytomegaloviruksesta (CMV), Epstein-Barr-viruksesta (EBV), adenoviruksesta (ADV) ja influenssasta peräisin olevien T-soluepitooppien määrittelyssä ja karakterisoinnissa sekä kasvaimeen liittyvien antigeenien erilaiset kiinteät ja hematologiset pahanlaatuiset kasvaimet.

Tämän työn perusteella tulokset muunnettiin terapeuttisiin rokotuksiin ja T-solunsiirtotutkimuksiin syöpäpotilailla (esim. NCT02802943) ja virusinfektiot. Tämän suoran käännöksen tekee mahdolliseksi Wirkstoffpeptidlabor (Prof. Dr. rer. nat. Stefan Stevanović) immunologian laitokselta ja Tuebingenin yliopistollisen sairaalan yksilöllisten lääkkeiden hyvän valmistustavan (GMP) laitoksesta sekä immuunijärjestelmän seuranta-alustasta, joka on varustettu huippuluokan, validoiduilla T-solumäärityksillä ja -menetelmillä.

Nykyistä kokemusta ja logistiikkaa voidaan käyttää suoraan COVID-19-taudin hoitoon ja ehkäisyyn. Tämän tutkimuksen alustavassa työssä CD4+ T-soluepitoopit on jo karakterisoitu suuressa SARS-CoV-2-tartunnan saaneiden luovuttajien ryhmässä, mikä vahvistaa niiden suuren merkityksen COVID-19:n luonnollisessa kulussa. Tutkimuksen rokotusseos koostuu kahdeksasta HLA-luokan II peptidistä SARS-CoV-2-viruksen eri proteiineista, joiden ennustetaan sitoutuvan useisiin HLA-luokan II allotyyppeihin. Lisäksi valittiin erityisesti ne peptidit, jotka sisältävät upotettuja HLA luokan I sekvenssejä CD4+ T-soluvasteiden ja CD8+ T-soluvasteiden indusoimiseksi samanaikaisesti. Lisäksi erityisesti viruksen pintaproteiineista peräisin oleville peptideille valittiin vain sekvenssit, jotka eivät edusta vasta-aineepitooppeja. Tämän pitäisi estää vasta-aineiden muodostuminen rokotettuja peptidejä vastaan, millä voi mahdollisesti olla heikentävä vaikutus COVID-19:ään. Immunogeenisuus osoitettiin kaikille HLA-luokan II peptideille, jotka sisältyivät peptidicocktailuun suuressa SARS-CoV-2-toipuvien luovuttajien ryhmässä, sekä yksittäisille peptideille terveen vapaaehtoisen ensimmäisessä rokotuksessa.

Edellytyksenä onnistuneelle peptidirokotukselle optimaalisten antigeenikohteiden valinnan lisäksi on sopivan adjuvantin käyttö, joka pystyy indusoimaan voimakkaita ja pitkäkestoisia immuunivasteita. Yksi tehokkaimmista ihmisillä testatuista lähestymistavoista on Montanide ISA 51 VG:ssä, vesi-öljyssä-emulsiossa, emulgoitujen peptidien ihonalainen injektio yhdistettynä TLR9-ligandiin CpG. CpG:tä ei kuitenkaan ole saatavilla kliinisiin kokeisiin, ja peptidi /antigeenirokote, joka on emulgoitu Montanideen ilman lisäadjuvanttia, ei aiheuta immuunivasteita tai indusoi vain heikkoja immuunivasteita. P-pVac-SARS-CoV-2-kokeessa uutta TLR1/2-ligandia XS15, joka on emulgoitu Montanide ISA 51 VG:hen, käytetään adjuvanttina, annettuna ihonalaisesti yhdessä peptidirokotteen kanssa. XS15 on TLR1/2-ligandin Pam3Cys vesiliukoinen johdannainen ja indusoi vahvan CD8+- ja Th1CD4+ T-soluvasteen vapaita lyhyitä peptidejä vastaan ​​Montanide ISA 51 VG:ssä yhden s.c.:n jälkeen. injektio terveelle vapaaehtoiselle sekä syöpäpotilaille. Immuunivasteita voidaan indusoida viruspeptidejä (mukaan lukien SARS-CoV-2-peräiset peptidit), syöpäspesifisistä mutaatioista peräisin olevia neoepitooppeja sekä kasvaimeen liittyviä itsepeptidejä vastaan. XS15 johtaa granulooman muodostumiseen rokotuskohdassa, jossa rokotetut peptidit säilyvät vähintään 7 viikkoa. Peptidispesifisiä T-soluja havaittiin granuloomakohdassa kuitenkin harvemmin kuin ääreisverestä, mikä sulkee pois T-solujen sekvestroitumisen, toimintahäiriön tai deleetion riskin rokotuskohdassa XS15:n käytöstä Montanide ISA 51:ssä. VG. Hämmästyttävästi indusoituneiden immuunivasteiden havaittiin jatkuvan yli 1,5 vuotta.

Suunniteltuun tutkimukseen liittyen voisimme myös osoittaa, että tämä rokotusmenetelmä pystyy indusoimaan voimakkaita SARS-CoV-2-spesifisiä T-soluvasteita vapaaehtoisessa ihmisessä.