SuPAR aikuispotilailla, joilla on Covid-19 (SPARCOL)

TAUSTA

Liukoinen urokinaasiplasminogeeniaktivaattorireseptori

Biomarkkeri liukoinen urokinaasiplasminogeeniaktivaattorireseptori (suPAR) on solukalvoon sitoutuneen urokinaasiplasminogeeniaktivaattorireseptorin (uPAR) liukoinen muoto, joka ilmentyy pääasiassa immuunisoluissa, endoteelisoluissa ja sileissä lihassoluissa. uPAR vapautuu tulehduksen tai immuuniaktivaation aikana, ja siksi suPAR-taso heijastaa immuuniaktivaation laajuutta yksilössä. Kaikilla ihmisillä on suPAR-perustaso, joka määräytyy yksilöllisesti ja nousee iän myötä. Tutkimukset ovat osoittaneet, että suPAR-taso liittyy sairastuvuuteen ja kuolleisuuteen useissa akuuteissa ja kroonisissa sairauksissa sekä koko väestössä. SuPAR-taso on kohonnut kaikissa sairauksissa, eikä se liity pelkästään yhteen tiettyyn sairauteen. Siksi suPAR on käyttökelpoinen prognostisena markkerina eikä diagnostisena markkerina. Tätä ominaisuutta voidaan käyttää riskin jakamiseen valitsemattomilla potilailla.

Alun perin uPAR osoitettiin urokinaasin (uPA) reseptoriksi, joka jakaa plasminogeenin aktiiviseksi plasmiiniksi. Lisäksi uPAR on vuorovaikutuksessa muiden proteiinien kanssa ja sillä on rooli useissa tärkeissä soluprosesseissa, kuten migraatiossa, adheesiossa, angiogeneesissä, proliferaatiossa ja kemotaksisessa. SuPAR-proteiini löydettiin vuonna 1991, jolloin sen havaittiin olevan syövän etenemisen merkki. Viime vuosina useat tutkimukset ovat osoittaneet, että suPAR liittyy useisiin kroonisiin sairauksiin (mukaan lukien sydän- ja verisuoni-, maksa-, munuais- ja keuhkosairaudet) ja että taso ennustaa erilaisten tartuntatautien (tuberkuloosi, HIV) negatiivista lopputulosta. , malaria, sepsis, aivokalvontulehdus, keuhkokuume) ja kriittisesti sairailla potilailla.

Kaikilla sairauksilla suPAR-taso erottaa ei-eloonjääneet eloonjääneistä. suPAR heijastaa kroonisen tulehduksen tasoa, ja siksi sitä on tutkittu mahdollisena sairauksien kehittymisen merkkiaineena ja tutkimukset ovat osoittaneet, että kohonnut taso ennustaa kroonisten sairauksien ja syövän kehittymistä väestössä. SuPAR-veren taso on vakaa ilman vuorokausivaihtelua eikä muutoksia paaston jälkeen, kun taas suPAR voidaan mitata verestä, plasmasta, virtsasta, aivo-selkäydinnesteestä, askitesnesteestä ja pleuranesteestä. Taso nousee ja laskee vastaavasti sairauden etenemisen ja paranemisen myötä, mutta hitaammin verrattuna esim. C-reaktiivinen proteiini (CRP). Normaali plasman suPAR-taso on 2-3 ng/ml terveillä henkilöillä, noin 3-4 ng/ml valitsemattomilla potilailla ensiapuosastoilla ja noin 9-10 ng/ml kriittisesti sairailla potilailla.

suPAR tehohoidossa

Kriittisesti sairailla potilailla suPAR-taso on kohonnut merkittävästi. suPAR on itsenäinen prognostinen markkeri, ja ajan mittaan tapahtuva muutos korreloi elinten toimintahäiriöiden kanssa. suPAR on kohonnut ja sillä on ennustearvo potilailla, joilla on: SIRS (systeeminen tulehdusreaktiooireyhtymä), sepsis/septinen shokki, palovammat ja traumaattiset aivovammat. SuPAR-taso heijastaa elimistön immuunivastetta infektioita vastaan, ja taso nousee infektion vakavuuden mukaan. Potilailla, joilla on elinhäiriö, suPAR-arvo on usein kaksinumeroinen arvo. Erityisesti maksan ja munuaisten toimintahäiriöt vaikuttavat suPAR-tasoon. suPARia on tutkittu SIRS-potilailla, jotka joutuivat akuutisti päivystykseen (n=902). Tutkimukset osoittivat, että suPAR on vahvempi 2 päivän, 30 päivän ja 90 päivän kuolleisuuden merkki kuin ikä, CRP, IL-6, kreatiniini ja prokalsitoniini. Diagnostisia tarkoituksia varten IL-6 ja CRP ovat kuitenkin parempia kuin suPAR positiivisen veriviljelmän ennustamisessa. Kreikkalainen monikeskustutkimus, johon osallistui 1914 sepsispotilasta, osoitti, että suPAR ennustaa vahvasti kuolleisuutta ja että yli 12 ng/ml oleva suPAR-taso liittyy >80 %:n herkkyyteen kuolleisuuden suhteen ja negatiiviseen ennustearvoon 94,5 %. Lisäksi suPAR:n ennustearvo sepsispotilailla on riippumaton relevanteista kovariaateista, kuten APACHE-pisteistä, CRP:stä jne.

Potilailla, joilla on palovammoja ja inhalaatiovammat, jotka vaativat mekaanista ventilaatiota, plasman suPAR-taso ja bronkoalveolaarinen huuhtelunesteen taso korreloivat IL-6:een ja hyytymistekijöihin. Kohonnut plasman suPAR-taso liittyy pitkittyneeseen tehohoitoyksikössä (ICU) oleskeluun ja koneellisen ventilaation kestoon. SuPAR-taso on kohonnut potilailla, joilla on traumaattinen aivovaurio. Traumapotilailla, jotka kärsivät aivovauriosta 12 tunnin sisällä ennen verinäytteen ottoa, keskimääräinen suPAR-taso on 14,9 ng/ml ± 6,9 vs. 2,8 ng/ml ± 0,7 kontrollihenkilöillä. Näillä potilailla suPAR liittyy aivovaurion vakavuuteen ja kuolleisuuteen.

suPAR ja akuutti hengitysvaikeusoireyhtymä

Akuuttia hengitysvaikeusoireyhtymää (ARDS) sairastavien potilaiden kuolleisuus on korkea. Biologiset markkerit sekä taudin vakavuuden pisteytysjärjestelmät voivat olla hyödyllisiä riskien jakamisessa ja homogeenisten potilasryhmien luomisessa kliinisissä tutkimuksissa. Tällä hetkellä yhdelläkään biologisella markkerilla ei kuitenkaan ole havaittu olevan riittävää erottelevaa arvoa ARDS-potilaiden kuolleisuuden tai sängyn vierellä tehdyn päätöksenteon tarkkaan ennustamiseen kliinisissä olosuhteissa. Ensimmäinen tutkimus, joka tutki plasman suPAR:n ja kuolleisuuden välistä yhteyttä ARDS-potilaiden kohortissa, oli julkaistu vuonna 2015. Tuossa tutkimuksessa plasman suPAR-pitoisuudet olivat korkeammat ARDS:n vakavuuden lisääntyessä ja korkeammat teho-osastolla kuolleilla potilailla. Lisäksi korkeammat plasman suPAR-tasot liittyivät vähemmän ventilaattori- ja tehohoitovapaisiin päiviin.

Prospektiivisessa, monikeskustutkimuksessa, johon sisältyi koneellisesti ventiloituja tehohoitopotilaita, alhaiset suPAR-pitoisuudet ennakoivat eloonjäämistä ja korkeat munuaiskorvaushoitoa ja kuolleisuutta. Kirjoittajat päättelivät, että SuPARia voidaan käyttää sellaisten potilaiden seulomiseen, joilla on mahdollisesti hyvä eloonjääminen, kun taas sen yhteys munuaisten korvaushoitoon voi olla varhainen varoitusmerkki akuutista munuaisten vajaatoiminnasta. Useat muut kirjoittajat ovat arvioineet suPAR:n ennustavaa arvoa koskien ARDS-riskiä sepsispotilailla ja raportoineet korrelaation/assosiaatiosta taudin vaikeusasteen, tulehduksen ja kuolleisuuden kanssa.

AIM

SPARCOL on monikeskustutkimus, jonka tavoitteena on selvittää, voiko vastaanoton yhteydessä mitattu suPAR ennustaa tulevien komplikaatioiden ja kuolleisuuden riskiä aikuispotilailla, joilla on Covid-19.

MENETELMÄT

Design

Tämä on Helsingin julistuksen mukaisesti suunniteltu prospektiivinen havaintotutkimus. Tutkimus rekisteröidään osoitteessa Clinical Trials.gov, ja Larisan yliopistollisen sairaalan Institutional Review Board on hyväksynyt sen viitenumerolla 17543. Tutkimuksen hyväksyy jokaisen osallistuvan keskuksen IRB.

Potilaan kelpoisuus

Sisällyttämiskriteerit ovat: (1) aikuiset (≥18-vuotiaat) potilaat, jotka joutuvat sairaalaan ensisijaisesti COVID-19:n vuoksi; (2) vahvistettu SARS-CoV-2-infektio, joka on diagnosoitu nenänielun tai suunnielun näytteiden käänteiskopioijapolymeraasiketjureaktiotestillä; ja (3) vähintään yksi verinäyte, joka on kerätty vastaanoton yhteydessä ja tallennettu biomarkkeritestausta varten. Potilaat, joilla on vahvistettu SARS-CoV-2-infektio, joita ei pääsääntöisesti oteta hoitoon COVID-19:n vuoksi, ja potilaat, joiden tiedot ovat puutteelliset, suljetaan pois.

Näytteenotto ja laboratoriomittaukset

Osallistujilta otetaan perifeerinen laskimoveri välittömästi sisäänpääsyn jälkeen. Kaikilta potilailta otetut verinäytteet ja EDTA-plasma säilytetään -80 °C:ssa myöhempään mittaukseen saakka. Plasman suPAR-tasot määritetään käyttämällä suPARnostic® ELISA -määritystä (ViroGates, Tanska), joka perustuu yksinkertaistettuun kaksoismonoklonaalisen vasta-aineen sandwich-ELISA-määritykseen, jossa näytteet ja peroksidaasiin konjugoitu anti-suPAR sekoitetaan ensin yhteen ja inkuboidaan sitten anti-suPARissa. esipinnoitetut mikrokuopat. Kitin rekombinantti-suPAR-standardit on kalibroitu terveiden ihmisverenluovuttajien näytteitä vastaan. suPAR-pitoisuudet määritetään ng/ml plasmassa.

Tulokset

Ensisijainen päätetapahtuma on hengityselinten komplikaatioiden esiintyminen [ei-invasiivisen ventilaation (CPAP-BiPAP), hi-flow-nenähapen tai mekaanisen ventilaation tarve], teho-osastolle pääsy ja eloonjääminen 30 päivän kohdalla.

Toissijainen päätepiste on hypotensio (määritelty systoliseksi verenpaineeksi

Tiedonkeruu ja seuranta

Tietojen analysointi perustuu ennalta määritettyihin tietopisteisiin tulevalla tiedonkeruulomakkeella. Henkilökunta sokeutuu mittauksiin tutkimuksen loppuun asti ja kaikki tiedot analysoidaan. Kliinistä seurantaa suoritetaan koko tutkimuksen ajan protokollan noudattamisen maksimoimiseksi, kun taas riippumaton Data and Safety Monitoring -tutkija valvoo tutkimuksen turvallisuutta, eettisiä ja tieteellisiä näkökohtia. Tiedonkeruu sisältää myös väestötiedot, yleisen verenkuvan, C-reaktiivisen proteiinin, APACHE II:n ja SOFAn.

Tiedonhallinta

Kliinisen tiedon hallintasuunnitelman tavoitteena on tuottaa laadukasta tietoa ottamalla käyttöön standardoituja menetelmiä virheiden ja puuttuvien tietojen määrän minimoimiseksi ja näin luoda tarkka tietokanta analysointia varten. Etävalvonta suoritetaan varhaisten poikkeavien kuvioiden, johdonmukaisuuden, uskottavuuden ja muiden poikkeamien ilmoittamiseksi. Puuttuvat ja poikkeavat tietoarvot tarkistetaan ja täydennetään tai korjataan yksilöllisesti aina kun mahdollista.

Otoskoko

Tutkimukseen osallistuu noin 500 potilasta. Kansainvälisten ja kansallisten epidemiologisten tietojen perusteella arvioimme, että noin 30 % mukana olevista potilaista saavuttaa ensisijaiset päätetapahtumat.

Etiikka ja levitys

Tutkimus tehdään kansallisten ja kansainvälisten ohjeiden mukaisesti. Tutkimus aloitetaan, kun sairaalan laitosarviointilautakunnalta on saatu lupa paikallisten määräysten mukaisesti. Mahdollista kirjallista suostumusta pyydetään ennen kaikkien kelpoisten potilaiden sisällyttämistä arviointilautakunnan päätöksen perusteella.

Kilpailevat intressit Ei ilmoitettu.