SuPAR em pacientes adultos com Covid-19 (SPARCOL)

FUNDO

Receptor ativador do plasminogênio uroquinase solúvel

O biomarcador receptor solúvel do ativador do plasminogênio uroquinase (suPAR) é a forma solúvel do receptor ativador do plasminogênio uroquinase ligado à membrana celular (uPAR), que é expresso principalmente em células imunes, células endoteliais e células musculares lisas. O uPAR é liberado durante a inflamação ou ativação imune e, portanto, o nível de suPAR reflete a extensão da ativação imune no indivíduo. Todos os seres humanos têm um nível basal de suPAR que é determinado individualmente e aumenta com a idade. Estudos demonstraram que o nível de suPAR está associado à morbidade e mortalidade em várias doenças agudas e crônicas e na população em geral. O nível de suPAR é elevado em todas as doenças e não apenas associado a uma doença específica. Portanto, o suPAR é aplicável como marcador prognóstico e não como marcador diagnóstico. Essa característica pode ser utilizada para estratificação de risco em pacientes não selecionados.

Originalmente, o uPAR provou ser um receptor para uroquinase (uPA) que divide o plasminogênio em plasmina ativa. Além disso, o uPAR interage com outras proteínas e desempenha um papel em vários processos celulares importantes, como migração, adesão, angiogênese, proliferação e quimiotaxia. A proteína suPAR foi descoberta em 1991, quando se descobriu que era um marcador de progressão do câncer. Nos últimos anos, vários estudos mostraram que o suPAR está associado a várias doenças crônicas (incluindo doenças cardiovasculares, hepáticas, renais e pulmonares) e que o nível é um preditor de resultado negativo de várias doenças infecciosas (tuberculose, HIV , malária, sepse, meningite, pneumonia) e em pacientes gravemente enfermos.

Entre as doenças, o nível de suPAR discrimina os não sobreviventes dos sobreviventes. O suPAR reflete o nível de inflamação crônica e, portanto, tem sido estudado como um marcador potencial de desenvolvimento de doenças, e estudos mostraram que um nível elevado prediz o desenvolvimento de doenças crônicas e câncer na população em geral. O nível sanguíneo de suPAR é estável sem variação diurna e sem alterações após o jejum, enquanto o suPAR pode ser medido no sangue, plasma, urina, líquido cefalorraquidiano, líquido ascítico e líquido pleural. O nível aumenta e diminui com a progressão e melhora de uma doença, respectivamente, mas mais lentamente em comparação com, por exemplo, Proteína C reativa (PCR). O nível plasmático normal de suPAR é de 2-3 ng/mL em indivíduos saudáveis, cerca de 3-4 ng/mL em pacientes não selecionados em departamentos de emergência e cerca de 9-10 ng/mL em pacientes criticamente enfermos.

suPAR em terapia intensiva

Em pacientes criticamente enfermos, o nível de suPAR é significativamente aumentado. suPAR é um marcador de prognóstico independente, e a mudança ao longo do tempo se correlaciona com a disfunção orgânica. suPAR é elevado e tem valor prognóstico em pacientes com: SIRS (síndrome de resposta inflamatória sistêmica), sepse/choque séptico, queimaduras e lesões cerebrais traumáticas. O nível de suPAR reflete a resposta imune do corpo às infecções, e o nível aumenta com a gravidade da infecção. Em pacientes com disfunção orgânica, o valor suPAR é geralmente um valor de dois dígitos. Em particular, a disfunção hepática e renal afeta o nível de suPAR. O suPAR foi estudado em pacientes com SIRS que foram internados de forma aguda no departamento de emergência (n=902). Os estudos mostraram que o suPAR é um marcador mais forte de mortalidade em 2 dias, 30 dias e 90 dias do que idade, PCR, IL-6, creatinina e procalcitonina. No entanto, para fins de diagnóstico, a IL-6 e a PCR são superiores ao suPAR na previsão de hemocultura positiva. Um estudo multicêntrico grego incluindo 1.914 pacientes com sepse mostrou que o suPAR é um forte preditor de mortalidade e que um nível de suPAR acima de 12 ng/mL está associado a uma sensibilidade > 80% para mortalidade e a um valor preditivo negativo de 94,5%. Além disso, o valor prognóstico do suPAR em pacientes com sepse é independente de covariáveis ​​relevantes, como escore APACHE, PCR, etc.

Em pacientes com queimaduras e trauma por inalação que requerem ventilação mecânica, o nível plasmático de suPAR e o nível do líquido de lavagem broncoalveolar correlacionam-se com IL-6 e fatores de coagulação. Um nível plasmático elevado de suPAR está associado à permanência prolongada na Unidade de Terapia Intensiva (UTI) e à duração da ventilação mecânica. O nível de suPAR é elevado em pacientes com lesão cerebral traumática. Em pacientes com trauma que sofreram lesão cerebral nas 12 horas anteriores à coleta de sangue, o nível médio de suPAR é de 14,9 ng/mL ± 6,9 vs. 2,8 ng/mL ± 0,7 em indivíduos de controle. Nesses pacientes, o suPAR está associado à gravidade da lesão cerebral e à mortalidade.

suPAR e síndrome do desconforto respiratório agudo

As taxas de mortalidade de pacientes com síndrome do desconforto respiratório agudo (SDRA) são altas. Marcadores biológicos, bem como sistemas de pontuação de gravidade da doença, podem ser úteis para estratificação de risco e criação de grupos homogêneos de pacientes em ensaios clínicos. No entanto, atualmente nenhum marcador biológico isolado tem valor discriminativo suficiente para a previsão precisa de mortalidade ou tomada de decisão à beira do leito em pacientes com SDRA no ambiente clínico. publicado em 2015. Nesse estudo, os níveis plasmáticos de suPAR foram maiores com o aumento da gravidade da SDRA e mais altos em pacientes que morreram na UTI. Além disso, níveis plasmáticos mais altos de suPAR foram associados a menos dias sem ventilador e sem UTI.

Em um estudo observacional prospectivo, multicêntrico, incluindo pacientes de UTI ventilados mecanicamente, baixas concentrações de suPAR foram preditivas de sobrevida e altas concentrações para terapia renal substitutiva e mortalidade. Os autores concluíram que o SuPAR pode ser usado para triagem de pacientes com sobrevida potencialmente boa, enquanto sua associação com terapia renal substitutiva pode fornecer um sinal de alerta precoce para insuficiência renal aguda. Vários outros autores avaliaram o valor preditivo do suPAR em relação ao risco de SDRA em pacientes com sepse e relataram uma correlação/associação com a gravidade da doença, inflamação e mortalidade.

MIRAR

O SPARCOL é um estudo observacional multicêntrico com o objetivo de investigar se o suPAR medido na admissão pode predizer o risco de complicações futuras e mortalidade em pacientes adultos com Covid-19.

MÉTODOS

Projeto

Este é um estudo observacional prospectivo desenhado de acordo com a declaração de Helsinque. O estudo será registrado em Clinical Trials.gov e foi aprovado pelo Conselho de Revisão Institucional do Hospital Universitário de Larisa, sob o número de referência 17543. O estudo será aprovado pelo IRB de cada um dos centros participantes.

Elegibilidade do paciente

Os critérios de inclusão serão: (1) pacientes adultos (≥18 anos) hospitalizados principalmente por COVID-19; (2) uma infecção confirmada por SARS-CoV-2 diagnosticada por meio do teste de reação em cadeia da polimerase com transcriptase reversa de amostras nasofaríngeas ou orofaríngeas; e (3) pelo menos uma amostra de sangue coletada na admissão e armazenada para testes de biomarcadores. Pacientes com infecção confirmada por SARS-CoV-2 que não serão internados principalmente para COVID-19 e pacientes com dados incompletos serão excluídos.

Amostragem e medições laboratoriais

Os participantes serão submetidos à coleta de sangue venoso periférico, imediatamente após a admissão. Amostras de sangue coletadas de todos os pacientes e plasma EDTA serão armazenadas a -80° C até a medição posterior. Os níveis de suPAR no plasma serão determinados usando o ensaio suPARnostic® ELISA (ViroGates, Dinamarca), que é baseado em um ensaio ELISA sanduíche de anticorpo monoclonal duplo simplificado, no qual amostras e anti-suPAR conjugados com peroxidase são primeiro misturados e depois incubados em anti-suPAR micropoços pré-revestidos. Os padrões suPAR recombinantes do kit são calibrados contra amostras de doadores de sangue humano saudável. As concentrações de suPAR são determinadas como plasma ng/mL.

Resultados

O desfecho primário será a presença de complicações respiratórias [necessidade de ventilação não invasiva (CPAP-BiPAP), oxigênio nasal de alto fluxo ou ventilação mecânica], internação em UTI e sobrevida em 30 dias.

Os desfechos secundários serão hipotensão (definida como pressão arterial sistólica

Coleta e monitoramento de dados

A análise de dados será baseada em pontos de dados predefinidos em um formulário de coleta de dados prospectivos. A equipe não terá acesso às medições até o final do estudo e todos os dados serão analisados. O monitoramento clínico ao longo do estudo será realizado para maximizar a adesão ao protocolo, enquanto uma equipe de pesquisa independente de monitoramento de dados e segurança monitorará os aspectos científicos, éticos e de segurança do estudo. A coleta de dados também incluirá dados demográficos, hemograma geral, proteína C-reativa, APACHE II e SOFA.

Gestão de dados

O objetivo do plano de gerenciamento de dados clínicos é fornecer dados de alta qualidade, adotando procedimentos padronizados para minimizar o número de erros e dados perdidos e, consequentemente, gerar um banco de dados preciso para análise. O monitoramento remoto será realizado para sinalizar padrões aberrantes precoces, problemas com consistência, credibilidade e outras anomalias. Quaisquer valores de dados ausentes e atípicos serão revisados ​​individualmente e completados ou corrigidos sempre que possível.

Tamanho da amostra

Este estudo incluirá aproximadamente 500 pacientes. Com base em dados epidemiológicos internacionais e nacionais, prevemos que aproximadamente 30% dos pacientes incluídos atingirão os endpoints primários.

Ética e divulgação

O estudo será realizado de acordo com as diretrizes nacionais e internacionais. O estudo terá início após a obtenção da aprovação do Conselho de Revisão Institucional do Hospital, de acordo com a regulamentação local. O consentimento informado prospectivo por escrito será solicitado antes da inclusão de todos os pacientes elegíveis com base na decisão do Conselho de Revisão.

Interesses concorrentes Não declarados.