SuPAR in pazienti adulti con Covid-19 (SPARCOL)

SFONDO

Recettore attivatore del plasminogeno urochinasi solubile

Il biomarcatore solubile recettore dell'attivatore del plasminogeno dell'urochinasi (suPAR) è la forma solubile del recettore dell'attivatore del plasminogeno dell'urochinasi legato alla membrana cellulare (uPAR), che è espresso principalmente sulle cellule immunitarie, sulle cellule endoteliali e sulle cellule muscolari lisce. uPAR viene rilasciato durante l'infiammazione o l'attivazione immunitaria, e quindi il livello di suPAR riflette l'entità dell'attivazione immunitaria nell'individuo. Tutti gli esseri umani hanno un livello basale di suPAR che è determinato individualmente e aumenta con l'età. Gli studi hanno dimostrato che il livello di suPAR è associato a morbilità e mortalità in una serie di malattie acute e croniche e nella popolazione generale. Il livello di suPAR è elevato in tutte le malattie e non solo associato a una malattia specifica. Pertanto, suPAR è applicabile come marker prognostico e non come marker diagnostico. Questa caratteristica può essere utilizzata per la stratificazione del rischio in pazienti non selezionati.

Originariamente, uPAR è stato dimostrato un recettore per l'urochinasi (uPA) che divide il plasminogeno in plasmina attiva. Inoltre, l'uPAR interagisce con altre proteine ​​e svolge un ruolo in diversi importanti processi cellulari come la migrazione, l'adesione, l'angiogenesi, la proliferazione e la chemiotassi. La proteina suPAR è stata scoperta nel 1991, quando si è scoperto che era un marker della progressione del cancro. Negli ultimi anni, diversi studi hanno dimostrato che il suPAR è associato a una serie di malattie croniche (comprese malattie cardiovascolari, epatiche, renali e polmonari) e che il livello è un predittore di un esito negativo di varie malattie infettive (tubercolosi, HIV , malaria, sepsi, meningite, polmonite) e nei pazienti critici.

In tutte le malattie, il livello suPAR discrimina i non sopravvissuti dai sopravvissuti. suPAR riflette il livello di infiammazione cronica, e quindi è stato studiato come potenziale marcatore di sviluppo di malattie, e studi hanno dimostrato che un livello elevato predice lo sviluppo di malattie croniche e cancro nella popolazione generale. Il livello ematico di suPAR è stabile senza variazioni diurne e senza cambiamenti dopo il digiuno, mentre il suPAR può essere misurato nel sangue, nel plasma, nelle urine, nel liquido cerebrospinale, nel liquido ascite e nel liquido pleurico. Il livello aumenta e diminuisce rispettivamente con la progressione e il miglioramento di una malattia, ma più lentamente rispetto ad es. Proteina C-reattiva (CRP). Il normale livello plasmatico di suPAR è di 2-3 ng/ml in individui sani, circa 3-4 ng/ml in pazienti non selezionati nei reparti di emergenza e circa 9-10 ng/ml in pazienti critici.

suPAR in terapia intensiva

Nei pazienti critici, il livello di suPAR è significativamente aumentato. suPAR è un marcatore prognostico indipendente e il cambiamento nel tempo è correlato alla disfunzione d'organo. Il suPAR è elevato e ha un valore prognostico nei pazienti con: SIRS (sindrome da risposta infiammatoria sistemica), sepsi/shock settico, ustioni e lesioni cerebrali traumatiche. Il livello di suPAR riflette la risposta immunitaria del corpo alle infezioni e il livello aumenta con la gravità dell'infezione. Nei pazienti con disfunzione d'organo, il valore suPAR è spesso un valore a due cifre. In particolare la disfunzione epatica e renale influisce sul livello di suPAR. suPAR è stato studiato in pazienti con SIRS ricoverati in pronto soccorso (n=902). Gli studi hanno dimostrato che il suPAR è un marcatore più forte di mortalità a 2 giorni, 30 giorni e 90 giorni rispetto a età, CRP, IL-6, creatinina e procalcitonina. Tuttavia, per scopi diagnostici, IL-6 e CRP sono superiori a suPAR nel predire un'emocoltura positiva. Uno studio multicentrico greco che includeva 1914 pazienti con sepsi ha dimostrato che il suPAR è un forte predittore di mortalità e che un livello di suPAR superiore a 12 ng/mL è collegato a una sensibilità >80% per la mortalità e a un valore predittivo negativo del 94,5%. Inoltre, il valore prognostico di suPAR nei pazienti con sepsi è indipendente da covariate rilevanti come il punteggio APACHE, CRP, ecc.

Nei pazienti con ustioni e traumi da inalazione che richiedono ventilazione meccanica, il livello plasmatico di suPAR e il livello del fluido di lavaggio broncoalveolare sono correlati all'IL-6 e ai fattori della coagulazione. Un livello plasmatico elevato di suPAR è associato a una prolungata degenza in unità di terapia intensiva (ICU) e alla durata della ventilazione meccanica. Il livello di suPAR è elevato nei pazienti con trauma cranico. Nei pazienti traumatizzati che hanno subito una lesione cerebrale nelle 12 ore precedenti il ​​prelievo di sangue, il livello medio di suPAR è di 14,9 ng/mL ± 6,9 rispetto a 2,8 ng/mL ± 0,7 nei soggetti di controllo. In questi pazienti il ​​suPAR è associato alla gravità della lesione cerebrale e alla mortalità.

suPAR e sindrome da distress respiratorio acuto

I tassi di mortalità dei pazienti con sindrome da distress respiratorio acuto (ARDS) sono elevati. I marcatori biologici così come i sistemi di punteggio della gravità della malattia possono essere utili per la stratificazione del rischio e la creazione di gruppi di pazienti omogenei negli studi clinici. Tuttavia, attualmente nessun singolo marcatore biologico è stato trovato avere un valore discriminante sufficiente per una previsione accurata della mortalità o per il processo decisionale al letto nei pazienti con ARDS in ambito clinico. Il primo studio che ha indagato l'associazione tra suPAR plasmatico e mortalità in una coorte di pazienti con ARDS è stato pubblicato nel 2015. In quello studio, i livelli plasmatici di suPAR erano più alti con l'aumentare della gravità dell'ARDS e più alti nei pazienti deceduti in terapia intensiva. Inoltre, livelli plasmatici più elevati di suPAR erano associati a meno giorni senza ventilazione e in terapia intensiva.

In uno studio prospettico, multicentrico, osservazionale che includeva pazienti in terapia intensiva ventilati meccanicamente, basse concentrazioni di suPAR erano predittive per la sopravvivenza e alte concentrazioni per la terapia renale sostitutiva e la mortalità. Gli autori hanno concluso che il SuPAR può essere utilizzato per lo screening di pazienti con una sopravvivenza potenzialmente buona, mentre la sua associazione con la terapia sostitutiva renale può fornire un segnale di allarme precoce per l'insufficienza renale acuta. Diversi altri autori hanno valutato il valore predittivo del suPAR per quanto riguarda il rischio di ARDS nei pazienti con sepsi e hanno riportato una correlazione/associazione con la gravità della malattia, l'infiammazione e la mortalità.

SCOPO

SPARCOL è uno studio osservazionale multicentrico che mira a indagare se il suPAR misurato al momento del ricovero può prevedere il rischio di future complicanze e mortalità nei pazienti adulti con Covid-19.

METODI

Design

Questo è uno studio osservazionale prospettico progettato in accordo con la dichiarazione di Helsinki. Lo studio sarà registrato su Clinical Trials.gov ed è stato approvato dall'Institutional Review Board dell'University Hospital of Larisa, con il numero di riferimento 17543. Lo studio sarà approvato dall'IRB di ciascuno dei centri partecipanti.

Eleggibilità del paziente

I criteri di inclusione saranno: (1) pazienti adulti (≥18 anni) ricoverati principalmente per COVID-19; (2) un'infezione confermata da SARS-CoV-2 diagnosticata attraverso il test di reazione a catena della polimerasi della trascrittasi inversa di campioni nasofaringei o orofaringei; e (3) almeno un campione di sangue raccolto al momento del ricovero e conservato per il test dei biomarcatori. Saranno esclusi i pazienti con infezione da SARS-CoV-2 confermata che non saranno ricoverati principalmente per COVID-19 e i pazienti con dati incompleti.

Campionamento e misure di laboratorio

I partecipanti saranno sottoposti a prelievo di sangue venoso periferico, immediatamente dopo il ricovero. I campioni di sangue prelevati da tutti i pazienti e il plasma EDTA saranno conservati a -80° C fino alla successiva misurazione. I livelli plasmatici di suPAR saranno determinati utilizzando il test ELISA suPARnostic® (ViroGates, Danimarca), che si basa su un test ELISA semplificato a sandwich con doppio anticorpo monoclonale in cui i campioni e l'anti-suPAR coniugato con perossidasi vengono prima miscelati insieme e quindi incubati in anti-suPAR micropozzetti prerivestiti. Gli standard suPAR ricombinanti del kit sono calibrati rispetto a campioni di donatori di sangue umano sani. Le concentrazioni di suPAR sono determinate come ng/mL di plasma.

Risultati

L'endpoint primario sarà la presenza di complicanze respiratorie [necessità di ventilazione non invasiva (CPAP-BiPAP), ossigeno nasale ad alto flusso o ventilazione meccanica], ricovero in terapia intensiva e sopravvivenza a 30 giorni.

Gli endpoint secondari saranno l'ipotensione (definita come pressione arteriosa sistolica

Raccolta dati e monitoraggio

L'analisi dei dati si baserà su punti dati predefiniti su un modulo di raccolta dati prospettici. Il personale sarà cieco alle misurazioni fino alla fine dello studio e tutti i dati vengono analizzati. Il monitoraggio clinico durante lo studio verrà eseguito per massimizzare l'aderenza al protocollo, mentre uno staff di ricerca indipendente per il monitoraggio dei dati e della sicurezza monitorerà gli aspetti di sicurezza, etici e scientifici dello studio. La raccolta dei dati includerà anche dati demografici, emocromo generale, proteina C-reattiva, APACHE II e SOFA.

Gestione dei dati

L'obiettivo del piano di gestione dei dati clinici è fornire dati di alta qualità adottando procedure standardizzate per ridurre al minimo il numero di errori e dati mancanti e, di conseguenza, generare un database accurato per l'analisi. Il monitoraggio remoto verrà eseguito per segnalare modelli aberranti precoci, problemi di coerenza, credibilità e altre anomalie. Eventuali valori di dati mancanti e anomali verranno rivisti individualmente e completati o corretti quando possibile.

Misura di prova

Questo studio includerà circa 500 pazienti. Sulla base dei dati epidemiologici internazionali e nazionali, prevediamo che circa il 30% dei pazienti inclusi raggiungerà gli endpoint primari.

Etica e divulgazione

Lo studio sarà condotto secondo le linee guida nazionali e internazionali. Lo studio inizierà dopo che l'approvazione sarà stata ottenuta dall'Institutional Review Board dell'ospedale, secondo la normativa locale. Il potenziale consenso informato scritto sarà richiesto prima dell'inclusione di tutti i pazienti idonei in base alla decisione del comitato di revisione.

Interessi in competizione Nessuno dichiarato.