SuPAR bij volwassen patiënten met Covid-19 (SPARCOL)

ACHTERGROND

Oplosbare urokinase-plasminogeenactivatorreceptor

De biomarker oplosbare urokinase plasminogeen activator receptor (suPAR) is de oplosbare vorm van de celmembraan-gebonden eiwit urokinase plasminogeen activator receptor (uPAR), die voornamelijk tot expressie wordt gebracht op immuuncellen, endotheelcellen en gladde spiercellen. uPAR komt vrij tijdens ontsteking of immuunactivering, en daarom weerspiegelt het suPAR-niveau de mate van immuunactivatie in het individu. Alle mensen hebben een basisniveau van suPAR dat individueel wordt bepaald en toeneemt met de leeftijd. Studies hebben aangetoond dat het suPAR-niveau geassocieerd is met morbiditeit en mortaliteit bij een aantal acute en chronische ziekten en bij de algemene bevolking. Het suPAR-niveau is verhoogd bij alle ziekten en niet uitsluitend geassocieerd met één specifieke ziekte. SuPAR is daarom toepasbaar als prognostische marker en niet als diagnostische marker. Dit kenmerk kan worden gebruikt voor risicostratificatie bij niet-geselecteerde patiënten.

Oorspronkelijk was bewezen dat uPAR een receptor is voor urokinase (uPA) die plasminogeen splitst in actief plasmine. Bovendien interageert uPAR met andere eiwitten en speelt het een rol in verschillende belangrijke celprocessen zoals migratie, adhesie, angiogenese, proliferatie en chemotaxis. Het suPAR-eiwit werd ontdekt in 1991, toen bleek dat het een marker was voor kankerprogressie. In de afgelopen jaren hebben verschillende onderzoeken aangetoond dat suPAR in verband wordt gebracht met een aantal chronische ziekten (waaronder cardiovasculaire, lever-, nier- en longziekten), en dat het niveau een voorspeller is van een negatief resultaat van verschillende infectieziekten (tuberculose, HIV). , malaria, sepsis, meningitis, longontsteking) en bij ernstig zieke patiënten.

Bij alle ziekten onderscheidt het suPAR-niveau niet-overlevenden van overlevenden. suPAR weerspiegelt het niveau van chronische ontsteking en daarom is het bestudeerd als een potentiële marker voor de ontwikkeling van ziekten, en studies hebben aangetoond dat een verhoogd niveau de ontwikkeling van chronische ziekten en kanker in de algemene bevolking voorspelt. De suPAR-bloedspiegel is stabiel zonder dagelijkse variatie en zonder veranderingen na vasten, terwijl suPAR kan worden gemeten in bloed, plasma, urine, cerebrospinale vloeistof, ascitesvloeistof en pleuravocht. Het niveau neemt respectievelijk toe en af ​​met progressie en verbetering van een ziekte, maar langzamer in vergelijking met b.v. C-reactief proteïne (CRP). De normale plasmaspiegel van suPAR is 2-3 ng/ml bij gezonde personen, ongeveer 3-4 ng/ml bij niet-geselecteerde patiënten op spoedeisende hulp en ongeveer 9-10 ng/ml bij ernstig zieke patiënten.

suPAR op de intensive care

Bij ernstig zieke patiënten is het suPAR-niveau aanzienlijk verhoogd. suPAR is een onafhankelijke prognostische marker en de verandering in de tijd correleert met orgaandisfunctie. suPAR is verhoogd en heeft een voorspellende waarde bij patiënten met: SIRS (systemisch inflammatoir responssyndroom), sepsis/septische shock, brandwonden en traumatisch hersenletsel. Het suPAR-niveau weerspiegelt de immuunrespons van het lichaam op infecties en het niveau neemt toe met de ernst van de infectie. Bij patiënten met orgaandisfunctie is de suPAR-waarde vaak een tweecijferige waarde. Met name lever- en nierfunctiestoornissen hebben invloed op de suPAR-spiegel. suPAR is onderzocht bij patiënten met SIRS die acuut werden opgenomen op de afdeling spoedeisende hulp (n=902). De onderzoeken toonden aan dat suPAR een sterkere marker is voor sterfte na 2 dagen, 30 dagen en 90 dagen dan leeftijd, CRP, IL-6, creatinine en procalcitonine. Voor diagnostische doeleinden zijn IL-6 en CRP echter superieur aan suPAR bij het voorspellen van een positieve bloedkweek. Een Grieks multicenter onderzoek met 1914 patiënten met sepsis toonde aan dat suPAR een sterke voorspeller is van mortaliteit, en dat een suPAR-niveau boven 12 ng/ml gekoppeld is aan een >80% gevoeligheid voor mortaliteit en een negatief voorspellende waarde van 94,5%. Bovendien is de prognostische waarde van suPAR bij patiënten met sepsis onafhankelijk van relevante covariaten zoals APACHE-score, CRP, etc.

Bij patiënten met brandwonden en inhalatietrauma die mechanische beademing nodig hebben, correleren het plasma suPAR-niveau en bronchoalveolaire lavage-vloeistofniveau met IL-6 en stollingsfactoren. Een verhoogde plasma suPAR-spiegel wordt in verband gebracht met een langdurig verblijf op de Intensive Care (ICU) en de duur van mechanische beademing. Het suPAR-niveau is verhoogd bij patiënten met traumatisch hersenletsel. Bij traumapatiënten die binnen 12 uur voorafgaand aan de bloedafname hersenletsel opliepen, is het gemiddelde suPAR-niveau 14,9 ng/ml ± 6,9 vs. 2,8 ng/ml ± 0,7 bij controlepersonen. Bij deze patiënten wordt suPAR in verband gebracht met de ernst van het hersenletsel en met mortaliteit.

suPAR en acute respiratory distress syndrome

De sterftecijfers van patiënten met het acute respiratory distress syndrome (ARDS) zijn hoog. Biologische markers en scoresystemen voor de ernst van de ziekte kunnen nuttig zijn voor risicostratificatie en het creëren van homogene patiëntengroepen in klinische onderzoeken. Momenteel is er echter geen enkele biologische marker gevonden die voldoende discriminerende waarde heeft voor een nauwkeurige voorspelling van mortaliteit of besluitvorming aan het bed bij ARDS-patiënten in de klinische setting. gepubliceerd in 2015. In die studie waren de plasmaspiegels van suPAR hoger bij toenemende ernst van ARDS, en hoger bij patiënten die stierven op de IC. Bovendien waren hogere plasma suPAR-spiegels geassocieerd met minder beademings- en IC-vrije dagen.

In een prospectieve, multicenter, observationele studie met mechanisch beademde IC-patiënten waren lage concentraties suPAR voorspellend voor overleving en hoge concentraties voor niervervangende therapie en mortaliteit. De auteurs concludeerden dat SuPAR kan worden gebruikt voor het screenen van patiënten met een potentieel goede overleving, terwijl de associatie met niervervangende therapie een vroeg waarschuwingssignaal kan zijn voor acuut nierfalen. Verschillende andere auteurs hebben de voorspellende waarde van suPAR met betrekking tot het risico op ARDS bij sepsispatiënten geëvalueerd en een correlatie/associatie met de ernst van de ziekte, ontsteking en mortaliteit gerapporteerd.

DOEL

SPARCOL is een observatiestudie in meerdere centra die tot doel heeft te onderzoeken of suPAR gemeten bij opname het risico op toekomstige complicaties en mortaliteit bij volwassen patiënten met Covid-19 kan voorspellen.

METHODEN

Ontwerp

Dit is een prospectieve observationele studie die is opgezet in overeenstemming met de verklaring van Helsinki. De studie zal worden geregistreerd op Clinical Trials.gov en is goedgekeurd door de Institutional Review Board van het Universitair Ziekenhuis van Larisa, onder het referentienummer 17543. De studie zal worden goedgekeurd door de IRB van elk van de deelnemende centra.

Geschiktheid van de patiënt

Inclusiecriteria zijn: (1) volwassen (≥18 jaar) patiënten die voornamelijk in het ziekenhuis zijn opgenomen voor COVID-19; (2) een bevestigde SARS-CoV-2-infectie gediagnosticeerd door reverse transcriptase-polymerasekettingreactietest van nasofaryngeale of orofaryngeale monsters; en (3) ten minste één bloedmonster afgenomen bij opname en bewaard voor biomarkertesten. Patiënten met een bevestigde SARS-CoV-2-infectie die niet primair worden opgenomen voor COVID-19 en patiënten met onvolledige gegevens worden uitgesloten.

Bemonstering en laboratoriummetingen

Bij de deelnemers wordt direct na opname perifeer veneus bloed afgenomen. Bloedmonsters van alle patiënten en EDTA-plasma worden tot latere meting bij -80°C bewaard. Plasma suPAR-niveaus zullen worden bepaald met behulp van de suPARnostic® ELISA-assay (ViroGates, Denemarken), die is gebaseerd op een vereenvoudigde dubbele monoklonale antilichaam-sandwich-ELISA-assay waarbij monsters en peroxidase-geconjugeerd anti-suPAR eerst met elkaar worden gemengd en vervolgens worden geïncubeerd in anti-suPAR. voorgecoate microwells. De recombinante suPAR-standaarden van de kit zijn gekalibreerd tegen monsters van gezonde menselijke bloeddonoren. suPAR-concentraties worden bepaald als ng/ml plasma.

Uitkomsten

Het primaire eindpunt is de aanwezigheid van respiratoire complicaties [behoefte aan niet-invasieve beademing (CPAP-BiPAP), hi-flow nasale zuurstof of mechanische beademing], opname op de IC en overleving na 30 dagen.

Secundaire eindpunten zijn hypotensie (gedefinieerd als systolische bloeddruk).

Gegevensverzameling en -bewaking

Gegevensanalyse zal gebaseerd zijn op vooraf gedefinieerde gegevenspunten op een prospectief gegevensverzamelingsformulier. Het personeel wordt tot het einde van het onderzoek geblindeerd voor metingen en alle gegevens worden geanalyseerd. Gedurende de hele studie zal klinische monitoring worden uitgevoerd om de naleving van het protocol te maximaliseren, terwijl een onafhankelijk onderzoeksteam voor gegevens- en veiligheidsbewaking toezicht zal houden op de veiligheids-, ethische en wetenschappelijke aspecten van de studie. De gegevensverzameling omvat ook demografische gegevens, algemeen bloedbeeld, C-reactief proteïne, APACHE II en SOFA.

Gegevensbeheer

Het doel van het beheerplan voor klinische gegevens is om gegevens van hoge kwaliteit te leveren door gestandaardiseerde procedures toe te passen om het aantal fouten en ontbrekende gegevens te minimaliseren en bijgevolg een nauwkeurige database voor analyse te genereren. Monitoring op afstand zal worden uitgevoerd om vroegtijdig afwijkende patronen, problemen met consistentie, geloofwaardigheid en andere anomalieën te signaleren. Waar mogelijk ontbrekende en afwijkende gegevenswaarden worden individueel herzien en aangevuld of gecorrigeerd.

Steekproefgrootte

Deze studie zal ongeveer 500 patiënten omvatten. Op basis van internationale en nationale epidemiologische gegevens verwachten we dat ongeveer 30% van de geïncludeerde patiënten de primaire eindpunten zal bereiken.

Ethiek en verspreiding

Het onderzoek zal worden uitgevoerd volgens nationale en internationale richtlijnen. De studie zal beginnen nadat goedkeuring is verkregen van de Institutional Review Board van het ziekenhuis, volgens de lokale regelgeving. Voorafgaand aan opname van alle in aanmerking komende patiënten zal op basis van de beslissing van de Review Board om prospectieve schriftelijke geïnformeerde toestemming worden gevraagd.

Concurrerende belangen Geen aangegeven.