SuPAR у взрослых пациентов с Covid-19 (SPARCOL)

ЗАДНИЙ ПЛАН

Рецептор растворимого активатора урокиназы плазминогена

Биомаркер растворимого рецептора активатора плазминогена урокиназы (suPAR) представляет собой растворимую форму связанного с клеточной мембраной рецептора активатора плазминогена урокиназы белка (uPAR), который экспрессируется в основном на иммунных клетках, эндотелиальных клетках и клетках гладкой мускулатуры. uPAR высвобождается во время воспаления или иммунной активации, поэтому уровень suPAR отражает степень иммунной активации у человека. Все люди имеют исходный уровень suPAR, который определяется индивидуально и увеличивается с возрастом. Исследования показали, что уровень suPAR связан с заболеваемостью и смертностью при ряде острых и хронических заболеваний и в общей популяции. Уровень suPAR повышен при разных заболеваниях, а не связан исключительно с одним конкретным заболеванием. Таким образом, suPAR применим как прогностический маркер, а не как диагностический маркер. Эта характеристика может быть использована для стратификации риска у невыбранных пациентов.

Первоначально было доказано, что uPAR является рецептором урокиназы (uPA), которая расщепляет плазминоген на активный плазмин. Более того, uPAR взаимодействует с другими белками и играет роль в нескольких важных клеточных процессах, таких как миграция, адгезия, ангиогенез, пролиферация и хемотаксис. Белок suPAR был открыт в 1991 году, когда было обнаружено, что он является маркером прогрессирования рака. В последние годы в ряде исследований показано, что suPAR ассоциирован с рядом хронических заболеваний (включая сердечно-сосудистые, печеночные, почечные, легочные), а его уровень является предиктором негативного исхода различных инфекционных заболеваний (туберкулез, ВИЧ-инфекция). , малярия, сепсис, менингит, пневмония) и у больных в критическом состоянии.

При разных заболеваниях уровень suPAR отличает невыживших от выживших. suPAR отражает уровень хронического воспаления, поэтому его изучали как потенциальный маркер развития заболеваний, и исследования показали, что повышенный уровень предсказывает развитие хронических заболеваний и рака в общей популяции. Уровень suPAR в крови стабилен, не изменяется ни в течение дня, ни после голодания, в то время как suPAR можно измерить в крови, плазме, моче, спинномозговой жидкости, асцитной жидкости и плевральной жидкости. Уровень повышается и снижается при прогрессировании и улучшении заболевания соответственно, но медленнее по сравнению, например, с С-реактивный белок (СРБ). Нормальный уровень suPAR в плазме составляет 2-3 нг/мл у здоровых людей, около 3-4 нг/мл у неотобранных пациентов в отделениях неотложной помощи и около 9-10 нг/мл у пациентов в критическом состоянии.

suPAR в реанимации

У больных в критическом состоянии уровень suPAR значительно повышен. suPAR является независимым прогностическим маркером, и его изменение с течением времени коррелирует с органной дисфункцией. suPAR повышен и имеет прогностическое значение у пациентов с: SIRS (синдромом системной воспалительной реакции), сепсисом/септическим шоком, ожоговыми повреждениями и черепно-мозговыми травмами. Уровень suPAR отражает иммунный ответ организма на инфекции, и его уровень увеличивается с тяжестью инфекции. У пациентов с органной дисфункцией значение suPAR часто представляет собой двузначное значение. В частности, печеночная и почечная дисфункция влияет на уровень suPAR. suPAR изучался у пациентов с SIRS, которые были срочно госпитализированы в отделение неотложной помощи (n = 902). Исследования показали, что suPAR является более сильным маркером 2-дневной, 30-дневной и 90-дневной смертности, чем возраст, СРБ, ИЛ-6, креатинин и прокальцитонин. Однако в диагностических целях ИЛ-6 и СРБ превосходят suPAR в прогнозировании положительной культуры крови. Греческое многоцентровое исследование, включавшее 1914 пациентов с сепсисом, показало, что suPAR является сильным прогностическим фактором смертности и что уровень suPAR выше 12 нг/мл связан с >80% чувствительностью к смертности и отрицательной прогностической ценностью 94,5%. Кроме того, прогностическое значение suPAR у пациентов с сепсисом не зависит от соответствующих ковариантов, таких как показатель APACHE, CRP и т. д.

У пациентов с ожоговыми и ингаляционными травмами, требующих ИВЛ, уровень suPAR в плазме и уровень бронхоальвеолярного лаважа коррелируют с ИЛ-6 и факторами свертывания крови. Повышенный уровень suPAR в плазме связан с длительным пребыванием в отделении интенсивной терапии (ОИТ) и продолжительностью искусственной вентиляции легких. Уровень suPAR повышен у пациентов с черепно-мозговой травмой. У пациентов с травмой, перенесших черепно-мозговую травму в течение 12 часов до забора крови, средний уровень suPAR составляет 14,9 нг/мл ± 6,9 против 2,8 нг/мл ± 0,7 у контрольных субъектов. У этих пациентов suPAR ассоциируется с тяжестью черепно-мозговой травмы и смертностью.

suPAR и острый респираторный дистресс-синдром

Смертность больных с острым респираторным дистресс-синдромом (ОРДС) высока. Биологические маркеры, а также системы оценки тяжести заболевания могут быть полезны для стратификации риска и создания однородных групп пациентов в клинических исследованиях. Однако в настоящее время не обнаружено ни одного биологического маркера, обладающего достаточной дискриминационной ценностью для точного прогнозирования смертности или принятия решений у постели больного с ОРДС в клинических условиях. опубликовано в 2015 году. В этом исследовании уровни suPAR в плазме были выше с увеличением тяжести ОРДС и выше у пациентов, умерших в отделении интенсивной терапии. Кроме того, более высокие уровни suPAR в плазме были связаны с меньшим количеством дней без ИВЛ и ОИТ.

В проспективном многоцентровом обсервационном исследовании, включавшем пациентов, находящихся на искусственной вентиляции легких в отделении интенсивной терапии, низкие концентрации suPAR были прогностическими факторами для выживаемости, а высокие концентрации — для заместительной почечной терапии и смертности. Авторы пришли к выводу, что SuPAR можно использовать для скрининга пациентов с потенциально хорошей выживаемостью, а его связь с заместительной почечной терапией может служить ранним предупреждающим признаком острой почечной недостаточности. Несколько других авторов оценили прогностическую ценность suPAR в отношении риска ОРДС у пациентов с сепсисом и сообщили о корреляции/ассоциации с тяжестью заболевания, воспалением и смертностью.

ЦЕЛЬ

SPARCOL — это многоцентровое обсервационное исследование, цель которого — выяснить, может ли suPAR, измеренный при поступлении, предсказать риск будущих осложнений и смертности у взрослых пациентов с Covid-19.

МЕТОДЫ

Дизайн

Это проспективное обсервационное исследование, разработанное в соответствии с Хельсинкской декларацией. Исследование будет зарегистрировано на веб-сайте Clinical Trials.gov и одобрено Институциональным наблюдательным советом Университетской больницы Ларисы под регистрационным номером 17543. Исследование будет одобрено IRB каждого из участвующих центров.

Право пациента

Критериями включения будут: (1) взрослые (≥18 лет) пациенты, госпитализированные преимущественно по поводу COVID-19; (2) подтвержденная инфекция SARS-CoV-2, диагностированная с помощью теста полимеразной цепной реакции с обратной транскриптазой образцов из носоглотки или ротоглотки; и (3) по крайней мере один образец крови, собранный при поступлении и сохраненный для тестирования биомаркеров. Пациенты с подтвержденной инфекцией SARS-CoV-2, которые не будут госпитализированы в первую очередь по поводу COVID-19, и пациенты с неполными данными будут исключены.

Отбор проб и лабораторные измерения

Участники пройдут забор периферической венозной крови сразу после поступления. Образцы крови, взятые у всех пациентов, и плазма с ЭДТА будут храниться при температуре -80°C до последующего измерения. Уровни suPAR в плазме будут определять с помощью анализа suPARnostic® ELISA (ViroGates, Дания), который основан на упрощенном сэндвич-анализе ELISA с двойными моноклональными антителами, при котором образцы и пероксидазно-конъюгированные антитела против suPAR сначала смешивают вместе, а затем инкубируют в анти-suPAR. предварительно покрытые микролунки. Стандарты рекомбинантного suPAR из набора откалиброваны по образцам крови здоровых доноров человека. Концентрации suPAR определяются как нг/мл плазмы.

Результаты

Первичной конечной точкой будет наличие респираторных осложнений [необходимость неинвазивной вентиляции (CPAP-BiPAP), высокопоточной назальной оксигенации или искусственной вентиляции легких], госпитализация в отделение интенсивной терапии и выживаемость через 30 дней.

Вторичными конечными точками будут гипотензия (определяемая как систолическое артериальное давление

Сбор данных и мониторинг

Анализ данных будет основываться на предварительно определенных точках данных в форме предполагаемого сбора данных. Персонал не будет знать об измерениях до окончания исследования и анализа всех данных. Клинический мониторинг на протяжении всего исследования будет проводиться для максимального соблюдения протокола, а независимый исследовательский персонал по мониторингу данных и безопасности будет следить за безопасностью, этическими и научными аспектами исследования. Сбор данных также будет включать демографические данные, общий анализ крови, С-реактивный белок, APACHE II и SOFA.

Управление данными

Целью плана управления клиническими данными является предоставление высококачественных данных путем принятия стандартизированных процедур для сведения к минимуму количества ошибок и отсутствующих данных и, следовательно, создания точной базы данных для анализа. Будет осуществляться удаленный мониторинг, чтобы сигнализировать о ранних отклонениях от нормы, проблемах с согласованностью, достоверностью и других аномалиях. Любые отсутствующие и выпадающие значения данных будут индивидуально пересмотрены и дополнены или исправлены, когда это возможно.

Размер образца

В этом исследовании примут участие около 500 пациентов. Основываясь на международных и национальных эпидемиологических данных, мы ожидаем, что примерно 30% включенных пациентов достигнут первичных конечных точек.

Этика и распространение

Исследование будет проводиться в соответствии с национальными и международными рекомендациями. Исследование начнется после получения одобрения Институционального наблюдательного совета больницы в соответствии с местным законодательством. На основании решения Контрольного совета перед включением всех подходящих пациентов будет запрошено проспективное письменное информированное согласие.

Конкурирующие интересы Не заявлено.