SuPAR hos voksne patienter med Covid-19 (SPARCOL)

BAGGRUND

Opløselig urokinase plasminogen aktivator receptor

Den biomarkør opløselige urokinase plasminogen activator receptor (suPAR) er den opløselige form af den cellemembranbundne protein urokinase plasminogen activator receptor (uPAR), som hovedsageligt udtrykkes på immunceller, endotelceller og glatte muskelceller. uPAR frigives under inflammation eller immunaktivering, og derfor afspejler suPAR-niveauet omfanget af immunaktivering hos individet. Alle mennesker har et basisniveau af suPAR, der er individuelt bestemt og stiger med alderen. Undersøgelser har vist, at suPAR-niveauet er forbundet med morbiditet og dødelighed i en række akutte og kroniske sygdomme og i befolkningen generelt. SuPAR-niveauet er forhøjet på tværs af sygdomme og er ikke kun forbundet med én specifik sygdom. Derfor er suPAR anvendelig som en prognostisk markør og ikke som en diagnostisk markør. Denne egenskab kan bruges til risikostratificering hos ikke-selekterede patienter.

Oprindeligt blev uPAR bevist som en receptor for urokinase (uPA), som spalter plasminogen til aktivt plasmin. Desuden interagerer uPAR med andre proteiner og spiller en rolle i flere vigtige celleprocesser som migration, adhæsion, angiogenese, proliferation og kemotaksi. SuPAR-proteinet blev opdaget i 1991, da det viste sig at være en markør for cancerprogression. I de senere år har flere studier vist, at suPAR er forbundet med en række kroniske sygdomme (herunder hjerte-kar-, lever-, nyre- og lungesygdomme), og at niveauet er en forudsigelse for et negativt udfald af forskellige infektionssygdomme (tuberkulose, hiv). , malaria, sepsis, meningitis, lungebetændelse) og hos kritisk syge patienter.

På tværs af sygdomme diskriminerer suPAR-niveauet ikke-overlevere fra overlevende. suPAR afspejler niveauet af kronisk inflammation, og derfor er det blevet undersøgt som en potentiel markør for udvikling af sygdomme, og studier har vist, at et forhøjet niveau forudsiger udvikling af kroniske sygdomme og cancer i den generelle befolkning. SuPAR blodniveauet er stabilt uden daglig variation og ingen ændringer efter faste, mens suPAR kan måles i blod, plasma, urin, cerebrospinalvæske, ascitesvæske og pleuravæske. Niveauet stiger og falder med henholdsvis progression og bedring af en sygdom, men langsommere sammenlignet med f.eks. C-reaktivt protein (CRP). Det normale suPAR-plasmaniveau er 2-3 ng/ml hos raske individer, ca. 3-4 ng/ml hos ikke-selekterede patienter på akutmodtagelser og ca. 9-10 ng/ml hos kritisk syge patienter.

suPAR på intensiv

Hos kritisk syge patienter er suPAR-niveauet væsentligt forhøjet. suPAR er en uafhængig prognostisk markør, og ændringen over tid korrelerer med organdysfunktion. suPAR er forhøjet og har en prognostisk værdi hos patienter med: SIRS (systemisk inflammatorisk respons syndrom), sepsis/septisk shock, forbrændingsskader og traumatiske hjerneskader. SuPAR-niveauet afspejler kroppens immunrespons på infektioner, og niveauet stiger med sværhedsgraden af ​​infektionen. Hos patienter med organdysfunktion er suPAR-værdien ofte en tocifret værdi. Især lever- og nyredysfunktion påvirker suPAR-niveauet. suPAR er blevet undersøgt hos patienter med SIRS, som blev akut indlagt på skadestuen (n=902). Studierne viste, at suPAR er en stærkere markør for 2-dages, 30-dages og 90-dages dødelighed end alder, CRP, IL-6, kreatinin og procalcitonin. Til diagnostiske formål er IL-6 og CRP imidlertid suPAR overlegne til at forudsige en positiv blodkultur. En græsk multicenterundersøgelse med 1914 patienter med sepsis viste, at suPAR er en stærk prædiktor for dødelighed, og at et suPAR-niveau over 12 ng/mL er forbundet med en >80 % følsomhed for dødelighed og en negativ prædiktiv værdi på 94,5 %. Derudover er den prognostiske værdi af suPAR hos patienter med sepsis uafhængig af relevante kovariater som APACHE-score, CRP osv.

Hos patienter med forbrændingsskader og inhalationstraumer, der kræver mekanisk ventilation, korrelerer plasma suPAR-niveauet og bronkoalveolært skyllevæskeniveau med IL-6 og koagulationsfaktorer. Et forhøjet plasma suPAR-niveau er forbundet med forlænget ophold på intensivafdelingen (ICU) og varigheden af ​​mekanisk ventilation. SuPAR-niveauet er forhøjet hos patienter med traumatisk hjerneskade. Hos traumepatienter, som led en hjerneskade inden for 12 timer før blodprøvetagning, er det gennemsnitlige suPAR-niveau 14,9 ng/ml ± 6,9 vs. 2,8 ng/ml ± 0,7 hos kontrolpersoner. Hos disse patienter er suPAR forbundet med sværhedsgraden af ​​hjerneskaden og med dødelighed.

suPAR og akut respiratory distress syndrome

Dødeligheden for patienter med akut respiratorisk distress syndrom (ARDS) er høj. Biologiske markører såvel som sygdomssværhedsscoringssystemer kan være nyttige til risikostratificering og skabelse af homogene patientgrupper i kliniske forsøg. Imidlertid har ingen enkelt biologisk markør i øjeblikket vist sig at have tilstrækkelig diskriminerende værdi til nøjagtig forudsigelse af dødelighed eller beslutningstagning ved sengen hos ARDS-patienter i kliniske omgivelser. Den første undersøgelse, der undersøgte sammenhængen mellem plasma-suPAR og dødelighed i en kohorte af ARDS-patienter var udgivet i 2015. I denne undersøgelse var plasmaniveauer af suPAR højere med stigende sværhedsgrad af ARDS og højere hos patienter, der døde på intensivafdelingen. Ydermere var højere plasma suPAR-niveauer forbundet med færre ventilator- og ICU-frie dage.

I et prospektivt, multicenter, observationsstudie, der inkluderede mekanisk ventilerede ICU-patienter, var lave koncentrationer af suPAR prædiktive for overlevelse og høje koncentrationer for nyreudskiftningsterapi og dødelighed. Forfatterne konkluderede, at SuPAR kan bruges til screening for patienter med potentielt god overlevelse, mens dets forbindelse med nyreudskiftningsterapi kan give et tidligt advarselstegn for akut nyresvigt. Adskillige andre forfattere har evalueret den prædiktive værdi af suPAR vedrørende risikoen for ARDS hos sepsispatienter og rapporteret en sammenhæng/association med sygdommens sværhedsgrad, inflammation og dødelighed.

SIGTE

SPARCOL er et multicenter observationsstudie, der har til formål at undersøge, om suPAR målt ved indlæggelse kan forudsige risikoen for fremtidige komplikationer og dødelighed hos voksne patienter med Covid-19.

METODER

Design

Dette er en prospektiv observationsundersøgelse designet i overensstemmelse med Helsinki-erklæringen. Undersøgelsen vil blive registreret på Clinical Trials.gov og er blevet godkendt af Institutional Review Board på University Hospital of Larisa under referencenummeret 17543. Undersøgelsen vil blive godkendt af IRB for hvert af de deltagende centre.

Patientberettigelse

Inklusionskriterier vil være: (1) voksne (≥18 år gamle) patienter indlagt primært på grund af COVID-19; (2) en bekræftet SARS-CoV-2-infektion diagnosticeret gennem revers transkriptase-polymerase-kædereaktionstest af nasopharyngeale eller oropharyngeale prøver; og (3) mindst én blodprøve indsamlet ved indlæggelse og opbevaret til biomarkørtestning. Patienter med bekræftet SARS-CoV-2-infektion, som ikke primært vil blive indlagt for COVID-19, og patienter med ufuldstændige data vil blive udelukket.

Prøveudtagning og laboratoriemålinger

Deltagerne vil gennemgå prøveudtagning af perifert veneblod umiddelbart efter indlæggelsen. Blodprøver fra alle patienter og EDTA-plasma vil blive opbevaret ved -80°C indtil senere måling. Plasma suPAR-niveauer vil blive bestemt ved hjælp af suPARnostic® ELISA-assayet (ViroGates, Danmark), som er baseret på et forenklet dobbelt monoklonalt antistof-sandwich ELISA-assay, hvor prøver og peroxidase-konjugeret anti-suPAR først blandes sammen og derefter inkuberes i anti-suPAR præcoatede mikrobrønde. Kittets rekombinante suPAR-standarder er kalibreret mod prøver fra raske humane bloddonorer. suPAR-koncentrationer bestemmes som ng/ml plasma.

Resultater

Det primære endepunkt vil være tilstedeværelsen af ​​respiratoriske komplikationer [behov for non-invasiv ventilation (CPAP-BiPAP), hi-flow nasal oxygen eller mekanisk ventilation], indlæggelse på intensivafdeling og overlevelse efter 30 dage.

Sekundære endepunkter vil være hypotension (defineret som systolisk blodtryk

Dataindsamling og overvågning

Dataanalyse vil være baseret på foruddefinerede datapunkter på en potentiel dataindsamlingsformular. Personalet vil blive blindet for målinger indtil afslutningen af ​​undersøgelsen, og alle data bliver analyseret. Klinisk overvågning gennem hele undersøgelsen vil blive udført for at maksimere protokoloverholdelse, mens en uafhængig data- og sikkerhedsovervågningsmedarbejder vil overvåge sikkerhedsmæssige, etiske og videnskabelige aspekter af undersøgelsen. Dataindsamling vil også omfatte demografi, generel blodtælling, C-reaktivt protein, APACHE II og SOFA.

Datastyring

Målet med den kliniske datahåndteringsplan er at levere data af høj kvalitet ved at vedtage standardiserede procedurer for at minimere antallet af fejl og manglende data og følgelig generere en nøjagtig database til analyse. Fjernovervågning vil blive udført for at signalere tidlige afvigende mønstre, problemer med konsistens, troværdighed og andre uregelmæssigheder. Eventuelle manglende og afvigende dataværdier vil blive revideret individuelt og udfyldt eller rettet, når det er muligt.

Prøvestørrelse

Denne undersøgelse vil omfatte cirka 500 patienter. Baseret på internationale og nationale epidemiologiske data forventer vi, at cirka 30 % af de inkluderede patienter vil nå de primære endepunkter.

Etik og formidling

Undersøgelsen vil blive udført i henhold til nationale og internationale retningslinjer. Undersøgelsen vil påbegyndes efter godkendelse er opnået fra Hospitalets Institutional Review Board i henhold til lokal lovgivning. Der vil blive anmodet om et potentielt skriftligt informeret samtykke før inklusion af alle kvalificerede patienter baseret på Bedømmelsesnævnets afgørelse.

Konkurrerende interesser Ingen erklæret.