SuPAR en pacientes adultos con Covid-19 (SPARCOL)

ANTECEDENTES

Receptor soluble del activador del plasminógeno de urocinasa

El biomarcador soluble del receptor activador del plasminógeno uroquinasa (suPAR) es la forma soluble del receptor activador del plasminógeno de la proteína uroquinasa unida a la membrana celular (uPAR), que se expresa principalmente en las células inmunitarias, las células endoteliales y las células del músculo liso. uPAR se libera durante la inflamación o la activación inmunitaria y, por lo tanto, el nivel de suPAR refleja el grado de activación inmunitaria en el individuo. Todos los seres humanos tienen un nivel de referencia de suPAR que se determina individualmente y aumenta con la edad. Los estudios han demostrado que el nivel de suPAR está asociado con morbilidad y mortalidad en varias enfermedades agudas y crónicas y en la población general. El nivel de suPAR está elevado en todas las enfermedades y no solo está asociado con una enfermedad específica. Por lo tanto, suPAR es aplicable como marcador de pronóstico y no como marcador de diagnóstico. Esta característica puede utilizarse para la estratificación del riesgo en pacientes no seleccionados.

Originalmente, se demostró que uPAR era un receptor de uroquinasa (uPA) que divide el plasminógeno en plasmina activa. Además, uPAR interactúa con otras proteínas y desempeña un papel en varios procesos celulares importantes como la migración, la adhesión, la angiogénesis, la proliferación y la quimiotaxis. La proteína suPAR se descubrió en 1991, cuando se descubrió que era un marcador de la progresión del cáncer. En los últimos años, varios estudios han demostrado que suPAR está asociado con una serie de enfermedades crónicas (incluyendo enfermedades cardiovasculares, hepáticas, renales y pulmonares), y que el nivel es un predictor de un resultado negativo de varias enfermedades infecciosas (tuberculosis, VIH , malaria, sepsis, meningitis, neumonía) y en pacientes críticamente enfermos.

En todas las enfermedades, el nivel de suPAR discrimina a los no sobrevivientes de los sobrevivientes. suPAR refleja el nivel de inflamación crónica y, por lo tanto, se ha estudiado como un marcador potencial del desarrollo de enfermedades, y los estudios han demostrado que un nivel elevado predice el desarrollo de enfermedades crónicas y cáncer en la población general. El nivel de suPAR en sangre es estable sin variación diurna y sin cambios después del ayuno, mientras que suPAR se puede medir en sangre, plasma, orina, líquido cefalorraquídeo, líquido de ascitis y líquido pleural. El nivel aumenta y disminuye con la progresión y la mejora de una enfermedad, respectivamente, pero más lentamente en comparación con, p. Proteína C reactiva (PCR). El nivel plasmático normal de suPAR es de 2 a 3 ng/mL en individuos sanos, de alrededor de 3 a 4 ng/mL en pacientes no seleccionados en los departamentos de emergencia y de alrededor de 9 a 10 ng/mL en pacientes en estado crítico.

suPAR en cuidados intensivos

En pacientes críticamente enfermos, el nivel de suPAR aumenta significativamente. suPAR es un marcador de pronóstico independiente y el cambio a lo largo del tiempo se correlaciona con la disfunción orgánica. suPAR está elevado y tiene un valor pronóstico en pacientes con: SIRS (síndrome de respuesta inflamatoria sistémica), sepsis/choque séptico, lesiones por quemaduras y lesiones cerebrales traumáticas. El nivel de suPAR refleja la respuesta inmunitaria del cuerpo a las infecciones y el nivel aumenta con la gravedad de la infección. En pacientes con disfunción orgánica, el valor de suPAR suele ser un valor de dos dígitos. En particular, la disfunción hepática y renal afecta el nivel de suPAR. SuPAR se ha estudiado en pacientes con SIRS que ingresaron de forma aguda en el departamento de emergencias (n = 902). Los estudios mostraron que suPAR es un marcador más potente de mortalidad a los 2, 30 y 90 días que la edad, la PCR, la IL-6, la creatinina y la procalcitonina. Sin embargo, para propósitos de diagnóstico, IL-6 y CRP son superiores a suPAR para predecir un hemocultivo positivo. Un estudio multicéntrico griego que incluyó a 1914 pacientes con sepsis mostró que suPAR es un fuerte predictor de mortalidad, y que un nivel de suPAR superior a 12 ng/mL está relacionado con una sensibilidad >80 % para la mortalidad y un valor predictivo negativo de 94,5 %. Además, el valor pronóstico de suPAR en pacientes con sepsis es independiente de covariables relevantes como la puntuación de APACHE, PCR, etc.

En pacientes con lesiones por quemaduras y trauma por inhalación que requieren ventilación mecánica, el nivel de suPAR en plasma y el nivel de líquido de lavado broncoalveolar se correlacionan con IL-6 y factores de coagulación. Un nivel elevado de suPAR en plasma se asocia con una estadía prolongada en la Unidad de Cuidados Intensivos (UCI) y la duración de la ventilación mecánica. El nivel de suPAR está elevado en pacientes con lesión cerebral traumática. En pacientes con traumatismos que sufrieron una lesión cerebral en las 12 horas anteriores a la toma de muestras de sangre, el nivel medio de suPAR es de 14,9 ng/ml ± 6,9 frente a 2,8 ng/ml ± 0,7 en sujetos de control. En estos pacientes, suPAR se asocia con la gravedad de la lesión cerebral y con la mortalidad.

suPAR y síndrome de dificultad respiratoria aguda

Las tasas de mortalidad de los pacientes con síndrome de dificultad respiratoria aguda (SDRA) son altas. Los marcadores biológicos, así como los sistemas de puntuación de la gravedad de la enfermedad, pueden ser útiles para la estratificación del riesgo y la creación de grupos de pacientes homogéneos en los ensayos clínicos. Sin embargo, actualmente no se ha encontrado ningún marcador biológico único que tenga suficiente valor discriminativo para la predicción precisa de la mortalidad o la toma de decisiones al lado de la cama en pacientes con SDRA en el entorno clínico. El primer estudio que investigó la asociación entre el suPAR plasmático y la mortalidad en una cohorte de pacientes con SDRA fue publicado en 2015. En ese estudio, los niveles plasmáticos de suPAR fueron más altos con el aumento de la gravedad del SDRA y más altos en pacientes que fallecieron en la UCI. Además, los niveles más altos de suPAR en plasma se asociaron con menos días sin ventilador y sin UCI.

En un estudio prospectivo, multicéntrico y observacional que incluyó pacientes de UCI con ventilación mecánica, las concentraciones bajas de suPAR fueron predictivas de supervivencia y las concentraciones altas de terapia de reemplazo renal y mortalidad. Los autores concluyeron que SuPAR puede usarse para la detección de pacientes con una supervivencia potencialmente buena, mientras que su asociación con la terapia de reemplazo renal puede proporcionar una señal de advertencia temprana de insuficiencia renal aguda. Varios otros autores han evaluado el valor predictivo de suPAR con respecto al riesgo de ARDS en pacientes con sepsis y han informado una correlación/asociación con la gravedad de la enfermedad, la inflamación y la mortalidad.

APUNTAR

SPARCOL es un estudio observacional multicéntrico que tiene como objetivo investigar si el suPAR medido al ingreso puede predecir el riesgo de futuras complicaciones y mortalidad en pacientes adultos con Covid-19.

MÉTODOS

Diseño

Este es un estudio observacional prospectivo diseñado de acuerdo con la declaración de Helsinki. El estudio se registrará en Clinical Trials.gov y ha sido aprobado por la Junta de Revisión Institucional del Hospital Universitario de Larisa, con el número de referencia 17543. El estudio será aprobado por el IRB de cada uno de los centros participantes.

Elegibilidad del paciente

Los criterios de inclusión serán: (1) pacientes adultos (≥18 años) hospitalizados principalmente por COVID-19; (2) una infección confirmada por SARS-CoV-2 diagnosticada mediante la prueba de reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa de muestras nasofaríngeas u orofaríngeas; y (3) al menos una muestra de sangre recolectada en el momento de la admisión y almacenada para la prueba de biomarcadores. Se excluirán los pacientes con infección confirmada por SARS-CoV-2 que no ingresarán principalmente por COVID-19 y los pacientes con datos incompletos.

Muestreo y mediciones de laboratorio

Los participantes se someterán a una muestra de sangre venosa periférica, inmediatamente después de la admisión. Las muestras de sangre extraídas de todos los pacientes y el plasma con EDTA se almacenarán a -80 °C hasta su posterior medición. Los niveles de suPAR en plasma se determinarán utilizando el ensayo ELISA suPARnostic® (ViroGates, Dinamarca), que se basa en un ensayo ELISA tipo sándwich de anticuerpo monoclonal doble simplificado en el que las muestras y el anti-suPAR conjugado con peroxidasa se mezclan primero y luego se incuban en anti-suPAR. micropocillos pre-revestidos. Los estándares de suPAR recombinante del kit se calibran frente a muestras de donantes de sangre humana sana. Las concentraciones de suPAR se determinan como ng/ml de plasma.

Resultados

La variable principal será la presencia de complicaciones respiratorias [necesidad de ventilación no invasiva (CPAP-BiPAP), oxígeno nasal de alto flujo o ventilación mecánica], ingreso en UCI y supervivencia a 30 días.

Los criterios de valoración secundarios serán la hipotensión (definida como presión arterial sistólica

Recopilación y seguimiento de datos

El análisis de datos se basará en puntos de datos predefinidos en un formulario de recopilación de datos prospectivos. El personal estará cegado a las mediciones hasta el final del estudio y se analizarán todos los datos. Se realizará un seguimiento clínico durante todo el estudio para maximizar el cumplimiento del protocolo, mientras que un personal de investigación independiente de Monitoreo de datos y seguridad controlará los aspectos de seguridad, éticos y científicos del estudio. La recopilación de datos también incluirá datos demográficos, hemograma general, proteína C reactiva, APACHE II y SOFA.

Gestión de datos

El objetivo del plan de gestión de datos clínicos es proporcionar datos de alta calidad mediante la adopción de procedimientos estandarizados para minimizar la cantidad de errores y datos faltantes y, en consecuencia, generar una base de datos precisa para el análisis. Se realizará un monitoreo remoto para señalar patrones aberrantes tempranos, problemas de consistencia, credibilidad y otras anomalías. Cualquier valor de datos atípico o faltante se revisará y completará o corregirá individualmente siempre que sea posible.

Tamaño de la muestra

Este estudio incluirá aproximadamente 500 pacientes. Con base en datos epidemiológicos internacionales y nacionales, anticipamos que aproximadamente el 30 % de los pacientes incluidos alcanzarán los criterios de valoración primarios.

Ética y divulgación

El estudio se realizará de acuerdo con las directrices nacionales e internacionales. El estudio comenzará después de obtener la aprobación de la Junta de Revisión Institucional del Hospital, de acuerdo con la regulación local. Se solicitará el consentimiento informado prospectivo por escrito antes de la inclusión de todos los pacientes elegibles según la decisión de la Junta de Revisión.

Conflicto de intereses Ninguno declarado.