Syljen aminohappotason yhdistäminen nestekromatografian massaspektroskopialla tunnistetun OSCC:n kanssa (OSCC)

1. Esittely:

   Suun syöpä on epänormaali kudoskasvu, joka on peräisin suussa ja sen ympärillä olevasta kudoksesta, joka ei ole koordinoitunut ympäröivän normaalin kudoksen kanssa. Kaikista suun syövistä suun okasolusyöpä (OSCC) on yleisin (90 %) suuontelon pahanlaatuinen epiteelin kasvain. Se on hälyttävä kansanterveysongelma maailmassa esiintyvyyden, korkean ilmaantuvuusasteen ja kuolleisuuden vuoksi. GLOBOCAN 2020 -tutkimuksen tuoreiden tietojen mukaan 377713 äskettäin diagnosoitua huuli- ja suuontelon okasolusyöpäpotilasta on diagnosoitu maailmanlaajuisesti, mikä on noin 2 % kaikista raportoiduista syövistä. Suun okasolusyöpä (OSCC) on kuudenneksi yleisin syöpä maailmanlaajuisesti. Viimeaikaiset maailmanlaajuiset raportit viittaavat siihen, että suurin osa raportoiduista tapauksista on Aasiasta (65,8 %), mutta Etelä-Aasian alueella suusyöpä on kolmanneksi yleisin syöpä. Yksi OSCC:n korkean kuolleisuuden kriittisistä tekijöistä on, että monet leesioista ovat aluksi oireettomia. Tämän seurauksena ne tulevat lääkärin vastaanotolle taudin myöhäisessä vaiheessa ja niillä on lopulta huono ennuste. Tutkimukset osoittivat, että kun OSCC on vaiheessa I, viiden vuoden eloonjäämisaste on 80 %, mutta se laskee 20-40 prosenttiin, kun sairaus on vaiheessa IV. OSCC:n diagnosoinnissa alkuperäisen kliinisen tutkimuksen jälkeen leikkausbiopsiaa ja histopatologista tutkimusta pidetään edelleen kultaisena standardina, mutta menetelmällä on monia rajoituksia. Invasiivinen toimenpide vaatii erityisosaamista biopsianäytteen ottamiseksi edustavilta alueilta ja tarvitsee asiantuntevan histopatologin vahvistusta varten. Lisäksi kudosnäytteen ottaminen näkyvän alueen, kuten kielen pohjan, takapilarin ja leuan rajoittuneen aukon takaa, takaa on erittäin vaikeaa tai joskus mahdotonta.

   Ihmisen sylki on eritettä kolmesta suuresta sylkirauhasesta, jotka sijaitsevat aivan suuontelon limakalvon alla. Se koostuu vedestä (99,5 %), epäorgaaniset suolat ja entsyymit (0,2 %) ja proteiinit (0,3 %). Se on hyödyllinen periodontiitin, diabeteksen, HIV:n, denguekuumeen, sikotautien, jopa rintasyövän, haimasyövän, mahasyövän, keuhkosyövän ja suun syövän diagnosoinnissa. Lisäksi sylkinäytteiden otolla on monia etuja. Syljen ottaminen on helpompaa, eikä se vaadi invasiivista toimenpidettä tai asiantuntemusta. Lisäksi siinä on riittävästi tuotantoa ja potilas voi ottaa sen itse, jolloin näytteenotto on halvempaa. Syljen aminohapot ovat tärkeitä metaboliitteja syöpäpotilaan diagnosoinnissa. Aminohappo on proteiinisynteesin raakatuote. Tätä varten, kun syöpäpotilas kulkee hypermetabolisen ja hyperkatabolisen tilan läpi, on mahdollisuus proteiinien epätasapainoon. Koska tutkijat tietävät, että aminohapot ovat proteiinin sivutuotteita, se voi antaa meille vihjeen mistä tahansa syövästä, mukaan lukien suun okasolusyöpä, johtuvasta epätasapainosta. Lisäksi syöpäpotilaan kehon nesteen aminohappopitoisuuksien muutokset ovat useiden tutkimusten mukaan merkittäviä. Massaspektrometria on tällä hetkellä käytetty alusta biolääketieteen tutkimuksessa proteomiikan tai metabolomiikan alalla. Kuten muutkin spektrometriamenetelmät, kuten kaasukromatografia-massaspektrometria (GC-MS), kapillaarielektroforeesi-massaspektrometria (CE-MS), kaksiulotteinen elektroforeesimassaspektrometria (2DE-MS), matriisiavusteinen laserdesorptio-ionisaatio-lentoaika massaspektrometria (MALDI-TOF) ja pintatehostettu laserdesorptio-ionisaatio-lennonaikamassaspektrometria (SELDI-TOF), nestekromatografia-massaspektrometria (LC-MS) on nykyään laajalti käytössä. Se mahdollistaa tietyn näytteen analyyttien nopean ja tehokkaan erottamisen ja karakterisoinnin. Siten se voi auttaa minkä tahansa sairauden nopeassa diagnosoinnissa aminohappoprofiilien automaattisen analyysin avulla minimaalisella vaivalla ja kustannuksilla. Monet tutkimukset suoritettiin käyttämällä LC-MS-konetta sylkianalyysissä useiden sairauksien diagnosoimiseksi, ja niistä saatiin merkittäviä tuloksia. Tietääkseni hyvin vähän tutkimuksia tehtiin syljen aminohappotason selvittämiseksi potilaalta, joka epäili LC-MS:n perusteella suun leesiota. Lisäksi mitään tutkimusta ei suoritettu suun leesion diagnosoimiseksi analysoimalla aminohappoprofiili LC-MS:llä Bangladeshissa. Tämän tutkimuksen tavoitteena on selvittää syljen spesifisten aminohappotasojen yhteys OSCC-potilaan kanssa nestekromatografia-massaspektrometrialla (LC-MS).

2. Perustelut:

   OSCC on kuudenneksi yleisin syöpä maailmanlaajuisesti, mutta Aasiassa suurin osa todettiin viime aikoina ja Kaakkois-Aasiassa se on kolmanneksi yleisin syöpä. Huono sosioekonominen tila, tajunnan puute ja tupakan laaja käyttö, betel-quin pureskelu ja alkoholin nauttiminen ovat tärkeimmät tekijät tämän taustalla. Tutkimukset osoittivat, että syövän varhainen diagnosointi vähentää kuolleisuutta ja voi siten parantaa hoidon tuloksia. Tämän seurauksena tutkijat yrittävät löytää helpon, nopean ja luotettavan menetelmän OSCC:n diagnosointiin.

   Vaikka leikkausveitsellä (incisionaalinen) biopsia, jota seuraa histopatologinen tutkimus, on edelleen kultainen standardi suuvaurion diagnosoinnissa, mutta näkyvän alueen takana ja suuaukon rajoitetussa tapauksessa edustavan näytteen kerääminen on erittäin vaikeaa. Lisäksi toimenpide on invasiivinen ja vaatii erikoislaitteita ja asiantuntemusta. Tältä osin invasiivisten toimenpiteiden ja kivun riskin välttämiseksi kehon nesteanalyysi on tutkijan kiinnostuksen kohde nykyään.

   Muiden kehon nesteiden joukossa sylkeä on erittäin helppo kerätä, se ei ole invasiivista ja sillä voi olla ominaisuus diagnosoida OSCC, koska se pysyy kosketuksissa vaurioon. Siinä on runsaasti virtausta ja se on halvempi kuin muut.

   LC-MS-konetta käytetään nykyään laajalti metabolomiikan analysointiin kaikkialla maailmassa. Sillä on kyky analysoida näyte tehokkaammin ja erittäin lyhyessä ajassa. Aminohapon ja muiden komponenttien mittaaminen syljestä voidaan tehdä helposti tällä menetelmällä. Joistakin sairauksista johtuen kehon nesteen aminohappopitoisuus vaihtelee useiden tutkimusten mukaan. Tutkijat uskovat, että Bangladeshin väestössä on merkittäviä assosiaatioita useiden syljen aminohappotasojen ja OSCC:n välillä, jotka voidaan tunnistaa LC-MS:llä.

3. Yleinen tavoite:

   Selvittää syljen aminohappotasojen yhteys nestekromatografia-massaspektrometrialla tunnistettuun suun okasolusyöpään (OSCC).

4. Opiskelupaikka:

   Suun ja leukakirurgian osasto, Bangabandhu Sheikh Mujib Medical University (BSMMU) ja Bangladesh Reference Institute for Chemical Measurements (BRICM), Science lab, Dhanmondi, Dhaka.

5. Tutkimusväestö:

   BSMMU:n suu- ja leukakirurgian osaston ulko- ja sisäklinikalla olevat potilaat ja heidän avustajansa mukaanotto- ja poissulkemiskriteerien mukaan. Otoskoko on 110 ja 55 kussakin ryhmässä. Tapauksia ovat incisional biopsialla varmistetut suun levyepiteelisyöpäpotilaat, ja kontrollit ovat suhteellisen samaa ikäryhmää ja terveitä yksilöitä.

6. Tutkimusnäyte:

   Tapauksiksi valitaan suu- ja leukakirurgian osastolla olevat potilaat, joilla on histopatologisesti diagnosoitu suun okasolusyöpä ja jotka täyttävät valintakriteerit. Vertailukoehenkilöt otetaan terveistä henkilöistä lähes saman ikäryhmän potilaiden hoitohenkilöiden joukosta, säilyttäen mukaanottokriteerit. Osallistujat luokitellaan kahteen ryhmään Ryhmä A (tapaukset): Tutkimusryhmä koostuu 55 potilaasta, joilla on histopatologisesti varmistettu suun levyepiteelisyöpä (OSCC) Ryhmä B (kontrollit): Tämä ryhmä koostuu 55 terveestä yksilöstä, joilla ei ole aiemmin ollut syöpää ja ilman vakavia periodontaaliongelmia ja kariesta.

7. Tutkimusmuuttujat:

   • Histopatologinen raportti
   • Nestekromatografia-massaspektrometrialla (LC-MS) havaittu syljen aminohappomäärä

8. Eettinen huomio:

   Tutkimuksen eettinen hyväksyntä hankitaan BSMMU:n Institutional Review Boardilta (IRB) ennen tämän tutkimuksen aloittamista. Kun komitea on hyväksynyt tutkimusprotokollan, lupa tutkimukseen otetaan Bangabandhu Sheikh Mujib Medical Universityn suu- ja leukakirurgian osastolta.

   Tämän tutkimuksen tavoitteet ja tavoitteet sekä sen menettelytavat, riskit, vaiheet ja hyödyt selitetään opiskelijoille helposti ymmärrettävällä paikallisella kielellä. Heille varmistetaan, että tämän tutkimuksen riski on minimaalinen. Mutta tämän riskin käsittelee asianmukaisesti erikoislääkäri. Jos biopsiatoimenpiteeseen tai tämän tutkimustoiminnan vaiheeseen liittyy ongelmia, he saavat koko hoidon ilmaiseksi. Tutkimusohjelman aikana ja sen jälkeen luottamuksellisuutta säilytetään tiukasti. Heille annetaan tunnusnumero, joka on hyödyllinen tutkimusohjelmassa. Kaikki tähän tunnusnumeroon kuuluvat paperit lukitaan toimistoon. Henkilökohtaisia ​​asioita ei käytetä analysointiin, artikkelin tuottamiseen ja julkaisuun. Vain asianomainen tutkija tietää nämä kaikki, eikä kukaan saa heidän tietojaan.

   Heidän osallistumisensa tähän tutkimusohjelmaan on täysin vapaaehtoista. He voivat joko kieltäytyä osallistumasta tai poistua tutkimusohjelmasta milloin tahansa. Se ei vaikuta heidän hoitoprosessiinsa. Suostumuslomakkeen allekirjoittaminen ei vahingoita heidän laillista oikeuttaan. Kaikilta opiskelijoilta otetaan kirjallinen tietoinen suostumus käyttämättä heidän heikkouksiaan. Kaikille koehenkilöille varmistetaan luottamuksellisuus ja vapaus vetäytyä tutkimuksesta milloin tahansa.

9. Tulosten toteutus:

   Tulos saattaa olla hyödyllinen syljen aminohappotason ja suun levyepiteelisyöpäpotilaiden (OSCC) välisen yhteyden selvittämisessä. Siten se voi olla hyödyllinen OSCC:n varhaisessa havaitsemisessa.

   Tiedot ovat hyödyllisiä tulevaa tutkimusta varten, ja niitä pidetään kansanterveysosaston perustietoina.

10. Tavoite ja toimintatapa:

Tutkimuksen tavoitteena on selvittää syljen aminohappotasojen yhteys suun okasolusyöpään (OSCC). Tutkimus suoritetaan Bangabandhun suu- ja leukakirurgian osastolla Sheikh Mujib Medical Universityn potilas, jolla on histologisesti vahvistettu OSCC, otetaan mukaan. kuten tutkimuksessa tarkoituksenmukaisella kätevällä näytteenottotekniikalla halutun määrän saavuttamiseksi. Vertailun vuoksi verrokkiryhmäksi otetaan suunnilleen sama määrä terveitä yksilöitä. Sitten sylki otetaan OSCC-potilaalta ja kontrolliryhmältä. Steriiliin astiaan ottamisen ja asianmukaisen ympäristön varmistamisen jälkeen sylkinäyte kuljetetaan kemiallisten mittausten määrättyyn vertailuinstituuttiin (DRICM), tiedelaboratorioon, Dhanmondiin analysoitavaksi nestekromatografia-massaspektrometrialla (LC-MS) -laitteella. Tällä koneella mitataan 6 tietyn aminohapon (alaniini, valiini, glysiini, fenyylialaniini, isoleusiini, lysiini) tasot. Jokaiselta henkilöltä saadut tiedot kirjataan erikseen ennalta suunniteltuun tiedonkeruulehteen. Jos osallistujat suostuvat osallistumaan tähän tutkimusohjelmaan, asiasta vastaava lääkäri ilmoittaa osallistujille yksityiskohtaisesti.