液体クロマトグラフィー質量分析法によって同定された唾液中アミノ酸レベルと OSCC との関連 (OSCC)

1. 序章：

   口腔がんは組織の異常な増殖であり、周囲の正常な組織の組織と協調していない口の中および周囲の組織に由来します。 すべての口腔癌の中で、口腔扁平上皮癌 (OSCC) は、口腔の最も一般的な (90%) 悪性上皮新生物です。 有病率が高く、発生率が高く、死亡率が高いため、世界で憂慮すべき公衆衛生問題となっています。 GLOBOCAN 2020 の最近のデータによると、世界中で新たに診断された 377713 人の口唇および口腔扁平上皮がん患者が診断されました。これは、報告されたすべてのがんの約 2% です。 口腔扁平上皮癌 (OSCC) は、世界で 6 番目に多い癌です。 最近の世界的な報告によると、報告された症例の大部分はアジア (65.8%) からのものであることが示唆されていますが、南アジア地域では、口腔がんは 3 番目に多いがんです。 OSCC の高い死亡率の重要な要因の 1 つは、最初は病変の多くが無症候性であることです。 その結果、彼らは病気の後期段階で医師の診察を受け、最終的には予後不良になります。 研究によると、OSCC がステージ I の場合、5 年生存率は 80% ですが、病気がステージ IV になると 20 ～ 40% に低下します。 OSCCの診断では、最初の臨床検査の後、切開生検とそれに続く組織病理学的検査が依然としてゴールドスタンダードと見なされていますが、この方法には多くの制限があります。 侵襲的な手順では、代表的な領域から生検サンプルを採取するための特別な専門知識が必要であり、確認のために専門の組織病理学者が必要です。 さらに、舌の付け根、後柱、および顎の開口部が制限されている場合など、可視領域の後ろから組織サンプルを採取することは非常に困難であるか、場合によっては不可能です。

   人間の唾液は、耳下腺、顎下腺、舌下腺の 3 つの主要な唾液腺からの分泌物であり、口腔の粘膜のすぐ下にある多数の副次的な腺があります。 水（99.5％）で構成され、 無機塩および酵素 (0.2%) およびタンパク質 (0.3%)。 歯周炎、糖尿病、HIV、デング熱、おたふくかぜ、さらには乳がん、膵臓がん、胃がん、肺がん、口腔がんの診断に役立ちます。 さらに、唾液サンプルの採取には多くの利点があります。 唾液を採取する方が簡単で、侵襲的な処置や専門知識は必要ありません。 また、十分な生産量があり、患者自身が採取できるため、サンプル採取手順が安価になります。 唾液中のアミノ酸は、がん患者の診断にとって重要な代謝産物です。 アミノ酸はタンパク質合成の原料です。 このため、癌患者が代謝亢進および異化亢進状態を通過すると、タンパク質の不均衡の可能性があります. 研究者はアミノ酸がタンパク質の副産物であることを知っているので、口腔扁平上皮癌を含むあらゆる癌による不均衡状態のヒントを与えることができます. さらに、がん患者の体液中のアミノ酸濃度の変化は、いくつかの研究によると重要です。質量分析は、生物医学研究におけるプロテオミクスまたはメタボロミクスに現在使用されているプラ​​ットフォームです。 ガスクロマトグラフィー質量分析法（GC-MS）、キャピラリー電気泳動質量分析法（CE-MS）、二次元電気泳動質量分析法（2DE-MS）、マトリックス支援レーザー脱離イオン化飛行時間などの他の分析法と同様質量分析法 (MALDI-TOF) および表面増強レーザー脱離イオン化飛行時間型質量分析法 (SELDI-TOF)、液体クロマトグラフィー質量分析法 (LC-MS) は、現在広く使用されています。 これにより、特定のサンプル内の分析対象物の迅速かつ効率的な分離と特性評価が可能になります。 したがって、最小限の労力と費用でアミノ酸プロファイルを自動分析することにより、あらゆる疾患の迅速な診断に役立ちます。 いくつかの病気の診断のための唾液分析に LC-MS マシンを使用して多くの研究が行われ、重要な結果が得られました。 私の知る限りでは、口腔病変が疑われる患者の唾液中アミノ酸レベルをLC-MSで調べる研究はほとんど行われていません。 また、バングラデシュでは LC-MS を用いたアミノ酸プロファイル解析による口腔病変診断の研究は行われていない。 この研究の目的は、特定の唾液中アミノ酸レベルと OSCC 患者との関連を、液体クロマトグラフィー-質量分析 (LC-MS) によって調べることです。

2. 根拠:

   OSCC は世界で 6 番目に多いがんですが、最近報告されたのはアジアで最も多く、東南アジアでは 3 番目に多いがんです。 貧弱な社会経済状態、意識の欠如、喫煙の蔓延、ビンロウジの咀嚼、アルコール摂取が主な要因です。 研究によると、がんの早期診断は死亡率を低下させ、したがって治療結果を改善できることが示されています。 その結果、科学者は OSCC の簡単で迅速かつ信頼できる診断方法を見つけようとしています。

   メス (切開) 生検とそれに続く組織病理学的検査は依然として口腔病変の診断のゴールド スタンダードですが、可視領域の背後にあり、口の開口部が制限されている場合、代表的な標本を収集することは非常に困難です。 さらに、この手順は侵襲的であり、特別な機器と専門知識が必要です。 この側面では、侵襲的な処置や痛みのリスクを回避するために、体液分析は最近の研究者の関心のある分野です。

   他の体液の中でも唾液は非常に採取しやすく、非侵襲的であり、病変との接触にとどまるため、OSCCの診断に役立つ可能性があります。 流量が多く、他よりも低コストです。

   LC-MS 装置は現在、世界中でメタボロミクス分析に広く使用されています。 サンプルをより効果的に、非常に短時間で分析する能力があります。 唾液からアミノ酸などの成分を簡単に測定できます。 いくつかの病気のために、体液のアミノ酸濃度はいくつかの研究によって異なります. 調査官は、バングラデシュの人口について、いくつかの唾液中アミノ酸レベルと OSCC との間に有意な関連性があり、LC-MS で識別できると考えています。

3. 一般的な目的:

   唾液中のアミノ酸レベルと口腔扁平上皮癌 (OSCC) との関連を液体クロマトグラフィー質量分析法によって特定すること。

4. 研究の場所:

   口腔および顎顔面外科部門、バンガバンドゥ シェイク ムジブ医科大学 (BSMMU) およびバングラデシュ化学測定基準研究所 (BRICM)、サイエンス ラボ、ダンモンディ、ダッカ。

5. 調査対象母集団：

   包含および除外基準に従って、BSMMUの口腔および顎顔面外科の屋外および屋内クリニックに参加する患者およびその付き添い。 合計サンプル サイズは、各グループで 110 と 55 になります。 症例は切開生検により確認された口腔扁平上皮癌患者であり、対照は比較的同年齢の健常者である。

6. 研究サンプル:

   口腔顎顔面外科に通院し、病理組織学的に口腔扁平上皮癌と診断され、選択基準を満たす患者を症例として選択する。 対照被験者は、選択基準を維持する症例とほぼ同じ年齢層の患者の付添人の中で健康な個人から選択されます。 参加者は 2 つのグループに分類されます グループ A (ケース): 研究グループは、組織病理学的に確認された口腔扁平上皮癌 (OSCC) を有する 55 人の患者で構成されます グループ B (コントロール): このグループは、がんの既往歴がなく、55 人の健康な個人で構成されます。重度の歯周病や虫歯がありません。

7. スタディ変数:

   • 病理組織学レポート
   • 唾液中濃度 液体クロマトグラフィー質量分析法（LC-MS）で検出されるアミノ酸

8. 倫理的配慮:

   研究の倫理的許可は、この研究の開始前にBSMMUの治験審査委員会（IRB）から取得されます。 研究プロトコルが委員会によって承認された後、研究の許可は、バンガバンドゥ シェイク ムジブ医科大学の口腔顎顔面外科部門から取得されます。

   研究の目的と目的、およびこの研究の手順、リスク、段階、および利点は、簡単に理解できる現地の言語で研究対象者に説明されます。 彼らは、この研究のリスクが最小限であることが保証されます。 しかし、このリスクは専門医によって適切に対処されます。 生検手順に関連して、またはこの研究活動のいずれかのステップに起因して問題が発生した場合、彼らは無料で治療を受けることができます。 研究プログラム中および研究プログラム終了後は、機密性が厳重に保持されます。 彼らにはID番号が与えられ、それは研究プログラムに役立ちます。 この ID 番号に属するすべての論文は、オフィスでロックされます。 個人的な事項は、分析、記事の作成、リリースには使用されません。 これらすべてを知っているのは関係する捜査官だけであり、誰も彼らの情報を入手することはできません。

   この研究プログラムへの参加は完全に任意です。 彼らはいつでも研究プログラムへの参加を拒否したり、研究プログラムから離れたりすることができます。 それは彼らの治療プロセスに影響を与えません。 同意書に署名することによって、彼らの法的権利が損なわれることはありません。 書面によるインフォームド コンセントは、彼らの弱点のいずれかを悪用することなく、すべての研究対象から取得されます。 すべての研究対象者は、秘密保持と、いつでも研究を取り下げる自由について保証されます。

9. 結果の実装:

   この結果は、唾液中のアミノ酸レベルと口腔扁平上皮がん (OSCC) 患者との関連を調べるのに役立つかもしれません。 したがって、OSCC の早期発見に役立つ可能性があります。

   データは将来の研究に役立ち、公衆衛生部門のベースライン情報と見なされます。

10. 目的と手順:

この研究の目的は、唾液中のアミノ酸レベルと口腔扁平上皮癌（OSCC）との関連性を調べることです。この研究は、バンガバンドゥ シェイク ムジブ医科大学の口腔顎顔面外科部門で実施されます。組織学的に OSCC が確認された患者が登録されます。目的の数を達成するための目的のある便利なサンプリング手法による研究のケースとして。 ほぼ同数の健常者を比較対照群とする。 次に、OSCC 患者と対照群から唾液を採取します。 無菌容器に取り込んで適切な環境を確保した後、唾液サンプルは指定化学測定基準研究所 (DRICM)、サイエンス ラボ、ダンモンディに運ばれ、液体クロマトグラフィー質量分析 (LC-MS) マシンによる分析が行われます。 この機械により、6つの特定のアミノ酸（アラニン、バリン、グリシン、フェニルアラニン、イソロイシン、リジン）のレベルが測定されます。 各個人から得られたデータは、事前に設計されたデータ収集シートに個別に記録されます。 参加者がこの研究プログラムへの参加に同意する場合、担当医師は参加者に詳細を通知します。