Association du niveau d'acides aminés salivaires avec OSCC identifiée par spectroscopie de masse par chromatographie liquide (OSCC)

1. Introduction:

   Le cancer de la bouche est une croissance anormale de tissu, provient du tissu dans et autour de la bouche qui n'est pas coordonné avec celui du tissu normal environnant. Parmi tous les cancers de la bouche, le carcinome épidermoïde de la bouche (CCSO) est la tumeur épithéliale maligne la plus fréquente (90 %) de la cavité buccale. C'est un problème de santé publique alarmant dans le monde en raison de sa prévalence, de son taux d'incidence élevé et de sa mortalité. Selon les données récentes de GLOBOCAN 2020, 377713 patients nouvellement diagnostiqués avec un carcinome épidermoïde de la lèvre et de la cavité buccale ont été diagnostiqués dans le monde, ce qui représente environ 2 % de tous les cancers signalés. Le carcinome épidermoïde de la bouche (CCSO) est le 6ème cancer le plus répandu dans le monde. Des rapports mondiaux récents suggèrent que la plus grande partie des cas signalés proviennent d'Asie (65,8 %), mais dans la région de l'Asie du Sud, le cancer de la bouche est le 3e cancer le plus courant. L'un des facteurs critiques du taux de mortalité élevé de l'OSCC est qu'au départ, une grande partie de la lésion est asymptomatique. En conséquence, ils viennent au stade avancé de la maladie chez le médecin et ont finalement un mauvais pronostic. La recherche a montré que, lorsqu'un OSCC est au stade I, le taux de survie à 5 ans est de 80% mais qu'il tombe à 20-40% lorsque la maladie est au stade IV. Pour le diagnostic de CCCO, après l'examen clinique initial, la biopsie incisionnelle suivie d'un examen histopathologique est toujours considérée comme un examen de référence, mais la méthode présente de nombreuses limites. La procédure invasive nécessite une expertise particulière pour prélever un échantillon de biopsie dans les zones représentatives et nécessite un histopathologiste expert pour confirmation. De plus, prélever un échantillon de tissu derrière la zone visible telle que la base de la langue, le pilier postérieur et en cas d'ouverture restreinte de la mâchoire est très difficile, voire parfois impossible.

   La salive humaine est la sécrétion de trois glandes salivaires principales parotide, sous-mandibulaire, sublinguale et de nombreuses glandes mineures se trouvent juste sous la muqueuse de la cavité buccale. Il est composé d'eau (99,5%), sels inorganiques et enzymes (0,2%) et protéines (0,3%). Il est utile pour le diagnostic de la parodontite, du diabète sucré, du VIH, de la dengue, des oreillons et même du cancer du sein, du cancer du pancréas, du cancer gastrique, du cancer du poumon et du cancer de la bouche. De plus, le prélèvement d'échantillons de salive présente de nombreux avantages. La prise de salive est plus facile et ne nécessite aucune procédure ou expertise invasive. En outre, il a une quantité suffisante de production et peut être prélevé par le patient lui-même, ce qui rend la procédure de prélèvement d'échantillon moins chère. Les acides aminés salivaires sont les métabolites importants pour le diagnostic d'un patient atteint de cancer. L'acide aminé est le produit brut de la synthèse des protéines. Pour cela, lorsqu'un patient cancéreux passe par un état hypermétabolique et hypercatabolique, il existe un risque de déséquilibre protéique. Comme les chercheurs savent que les acides aminés sont les sous-produits des protéines, cela peut nous donner un indice sur l'état de déséquilibre dû à tout cancer, y compris le carcinome épidermoïde de la bouche. De plus, les changements de concentration en acides aminés dans les fluides corporels des patients atteints de cancer sont importants selon plusieurs études. La spectrométrie de masse est une plateforme actuellement utilisée pour la protéomique ou la métabolomique dans la recherche biomédicale. Comme d'autres méthodes de spectrométrie telles que la chromatographie en phase gazeuse-spectrométrie de masse (GC-MS), l'électrophorèse capillaire-spectrométrie de masse (CE-MS), la spectrométrie de masse par électrophorèse bidimensionnelle (2DE-MS), la désorption laser assistée par matrice ionisation-temps de vol la spectrométrie de masse (MALDI-TOF) et la spectrométrie de masse à temps de vol par ionisation par désorption laser améliorée en surface (SELDI-TOF), la chromatographie liquide-spectrométrie de masse (LC-MS) est largement utilisée de nos jours. Il permet une séparation et une caractérisation rapides et efficaces des analytes dans un échantillon donné. Ainsi, il peut aider au diagnostic rapide de toute maladie par une analyse automatisée des profils d'acides aminés avec un minimum d'efforts et de dépenses. De nombreuses études ont été menées à l'aide de la machine LC-MS pour l'analyse de la salive pour le diagnostic de plusieurs maladies et ont trouvé des résultats significatifs. Au meilleur de ma connaissance, très peu d'études ont été faites pour connaître le niveau d'acides aminés salivaires du patient suspecté de lésion buccale par LC-MS. De plus, aucune étude n'a été réalisée pour le diagnostic des lésions buccales par analyse du profil des acides aminés par LC-MS au Bangladesh. Le but de cette étude est de découvrir l'association des niveaux spécifiques d'acides aminés salivaires avec le patient d'OSCC par chromatographie liquide-spectrométrie de masse (LC-MS).

2. Raisonnement:

   L'OSCC est le 6e cancer le plus courant dans le monde, mais en Asie, la plus grande partie a été signalée récemment et en Asie du Sud-Est, c'est le 3e cancer le plus courant. La mauvaise condition socio-économique, le manque de conscience et l'usage généralisé du tabac, la mastication de la chique de bétel et la consommation d'alcool en sont les principaux facteurs. La recherche a montré que le diagnostic précoce du cancer réduit le taux de mortalité et peut donc améliorer les résultats du traitement. En conséquence, les scientifiques tentent de trouver une méthode de diagnostic simple, rapide et fiable de l'OSCC.

   Bien que la biopsie au scalpel (incisionnelle) suivie d'un examen histopathologique soit toujours l'étalon-or pour le diagnostic de la lésion buccale, mais dans le cas de derrière la zone visible et d'une ouverture buccale restreinte, il est très difficile de prélever le spécimen représentatif. De plus, la procédure est invasive et nécessite un équipement et une expertise spéciaux. Dans cet aspect, pour éviter le risque de procédures invasives et de douleur, l'analyse des fluides corporels est aujourd'hui le domaine d'intérêt du chercheur.

   Parmi les autres fluides corporels, la salive est très facile à prélever, non invasive et pourrait avoir la propriété de diagnostiquer l'OSCC car elle reste au contact de la lésion. Il a beaucoup de débit et moins coûteux que les autres.

   La machine LC-MS est maintenant largement utilisée pour l'analyse métabolomique dans le monde entier. Il a la capacité d'analyser un échantillon plus efficacement et dans un délai très court. La mesure de l'acide aminé et d'autres composants de la salive peut facilement être effectuée par cette méthode. En raison de certaines maladies, la concentration en acides aminés des fluides corporels diffère selon plusieurs études. Les enquêteurs pensent que pour la population bangladaise, il existe des associations significatives entre plusieurs niveaux d'acides aminés salivaires et OSCC, qui peuvent être identifiées par LC-MS.

3. Objectif général:

   Découvrir l'association des niveaux d'acides aminés salivaires avec le carcinome épidermoïde oral (CCSO) identifié par chromatographie liquide-spectrométrie de masse.

4. Lieu d'étude:

   Département de chirurgie buccale et maxillo-faciale, Université médicale Bangabandhu Sheikh Mujib (BSMMU) et Institut de référence du Bangladesh pour les mesures chimiques (BRICM), laboratoire scientifique, Dhanmondi, Dhaka.

5. Population étudiée :

   Patients et leurs accompagnateurs fréquentant la clinique extérieure et intérieure du département de chirurgie buccale et maxillo-faciale, BSMMU selon les critères d'inclusion et d'exclusion. La taille totale de l'échantillon sera de 110 et 55 dans chaque groupe. Les cas sont les patients atteints de carcinome épidermoïde de la bouche confirmés par biopsie incisionnelle et les témoins sont relativement du même groupe d'âge et des individus en bonne santé.

6. Échantillon d'étude :

   Les patients fréquentant le département de chirurgie buccale et maxillo-faciale, diagnostiqués histopathologiquement comme un carcinome épidermoïde de la bouche qui rempliront les critères de sélection seront sélectionnés comme cas. Les sujets témoins seront choisis parmi des individus sains parmi les accompagnateurs de patients presque du même groupe d'âge des cas en maintenant les critères d'inclusion. Les participants sont classés en deux groupes Groupe A (Cas) : Le groupe d'étude se compose de 55 patients ayant un carcinome épidermoïde oral (CCSO) confirmé par histopathologie Groupe B (Contrôles) : Ce groupe se compose de 55 personnes en bonne santé sans antécédent de cancer et sans problèmes parodontaux graves ni caries dentaires.

7. Variables d'étude :

   • Rapport d'histopathologie
   • Niveau d'acides aminés salivaires détecté par chromatographie liquide-spectrométrie de masse (LC-MS)

8. Considération éthique:

   L'autorisation éthique de l'étude sera obtenue auprès du Comité d'examen institutionnel (IRB) de la BSMMU avant le début de cette étude. Une fois le protocole de recherche approuvé par le comité, l'autorisation de l'étude sera prise par le Département de chirurgie buccale et maxillo-faciale de l'Université médicale Bangabandhu Sheikh Mujib.

   Les buts et objectifs de l'étude ainsi que sa procédure, les risques, les étapes et les avantages de cette étude seront expliqués aux sujets de l'étude dans une langue locale facilement compréhensible. Ils seront assurés que le risque de cette recherche est minime. Mais, ce risque sera correctement traité par un médecin spécialiste. Si un problème survient lié à la procédure de biopsie ou à une étape de cette activité de recherche, ils recevront l'ensemble du traitement gratuitement. Pendant et après le programme de recherche, la confidentialité serait strictement maintenue. Un numéro d'identification leur sera attribué et cela sera utile au programme de recherche. Tous les papiers appartenant à ce numéro d'identification seront enfermés dans le bureau. Les affaires personnelles ne seront pas utilisées pour l'analyse, la production d'articles et la publication. Seul l'enquêteur impliqué saura tout cela et personne n'obtiendra ses informations.

   Leur participation à ce programme de recherche est absolument volontaire. Ils peuvent soit refuser de participer, soit quitter le programme de recherche à tout moment. Cela n'affectera pas leur processus de traitement. Leur droit légal ne sera pas lésé en signant le formulaire de consentement. Un consentement éclairé écrit sera recueilli auprès de tous les sujets de l'étude sans exploiter aucune de leurs faiblesses. Tous les sujets de l'étude seront assurés de leur confidentialité et de leur liberté de se retirer de l'étude à tout moment.

9. Mise en œuvre des résultats :

   Le résultat pourrait être utile pour découvrir l'association entre les niveaux d'acides aminés salivaires et les patients atteints de carcinome épidermoïde oral (CCSO). Ainsi, pourrait être utile dans la détection précoce de l'OSCC.

   Les données seront utiles pour les recherches futures et seront considérées comme des informations de base pour le service de santé publique.

10. Objectif et procédure :

Le but de l'étude est de découvrir l'association des niveaux d'acides aminés salivaires avec le carcinome épidermoïde oral (OSCC). L'étude sera menée au département de chirurgie buccale et maxillo-faciale de l'Université médicale de Bangabandhu Sheikh Mujib. Un patient avec un OSCC confirmé histologiquement sera inscrit. comme cas dans l'étude par une technique d'échantillonnage pratique et raisonnée pour atteindre le nombre souhaité. Approximativement le même nombre d'individus en bonne santé sera pris comme groupe témoin pour la comparaison. Ensuite, la salive sera prélevée sur le patient OSCC et sur le groupe témoin. Après avoir pris le récipient stérile et s'être assuré que l'échantillon de salive de l'environnement approprié sera transporté à l'Institut de référence désigné pour les mesures chimiques (DRICM), laboratoire scientifique, Dhanmondi pour analyse par chromatographie liquide-spectrométrie de masse (LC-MS). Par cette machine, les niveaux de 6 acides aminés spécifiques (alanine, valine, glycine, phénylalanine, isoleucine, lysine) seront mesurés. Les données obtenues de chaque individu seront enregistrées séparément dans une feuille de collecte de données prédéfinie. Si les participants acceptent de participer à ce programme de recherche, le médecin responsable en informera les participants en détail.