Asociación del nivel de aminoácidos salivales con OSCC identificado por espectroscopia de masas de cromatografía líquida (OSCC)

1. Introducción:

   El cáncer oral es un crecimiento anormal de tejido, que se origina en el tejido dentro y alrededor de la boca que no está coordinado con el tejido normal circundante. Entre todos los cánceres orales, el carcinoma oral de células escamosas (OSCC) es la neoplasia epitelial maligna más común (90%) de la cavidad oral. Es un problema de salud pública alarmante en el mundo por su prevalencia, alta tasa de incidencia y mortalidad. Según los datos recientes de GLOBOCAN 2020, 377713 pacientes con carcinoma de células escamosas de labio y cavidad oral recién diagnosticados en todo el mundo, lo que representa aproximadamente el 2% de todos los cánceres informados. El carcinoma oral de células escamosas (OSCC) es el sexto cáncer más común en todo el mundo. Informes globales recientes sugieren que la mayor parte de los casos informados provienen de Asia (65,8%), pero en la región del sur de Asia, el cáncer oral es el tercer cáncer más común. Uno de los factores críticos de la alta tasa de mortalidad de OSCC es que inicialmente muchas de las lesiones son asintomáticas. Como resultado, acuden al médico en la última etapa de la enfermedad y, en última instancia, tienen un mal pronóstico. La investigación demostró que, cuando un OSCC se encuentra en la etapa I, la tasa de supervivencia a 5 años es del 80 %, pero se reduce al 20-40 % cuando la enfermedad se encuentra en la etapa IV. Para el diagnóstico de OSCC, después del examen clínico inicial, la biopsia incisional seguida de un examen histopatológico todavía se considera el estándar de oro, pero el método tiene muchas limitaciones. El procedimiento invasivo necesita experiencia especial para tomar una muestra de biopsia de las áreas representativas y necesita un histopatólogo experto para su confirmación. Además, tomar una muestra de tejido detrás del área visible, como la base de la lengua, el pilar posterior y en caso de apertura mandibular restringida, es muy difícil o, a veces, imposible.

   La saliva humana es la secreción de tres glándulas salivales mayores parótida, submandibular, sublingual y numerosas glándulas menores que se encuentran justo debajo de la mucosa de la cavidad oral. Se compone de agua (99,5%), sales inorgánicas y enzimas (0,2%) y proteínas (0,3%). Es de ayuda para el diagnóstico de periodontitis, diabetes mellitus, VIH, dengue, paperas incluso cáncer de mama, cáncer de páncreas, cáncer gástrico, cáncer de pulmón y cáncer oral. Además, la toma de muestras de saliva tiene muchas ventajas. Tomar saliva es más fácil y no necesita ningún procedimiento invasivo ni experiencia. Además, tiene suficiente cantidad de producción y puede ser tomado por el propio paciente abaratando el procedimiento de toma de muestra. Los aminoácidos salivales son los metabolitos importantes para el diagnóstico de un paciente con cáncer. El aminoácido es el producto crudo de la síntesis de proteínas. Por eso, cuando un paciente con cáncer pasa por un estado hipermetabólico e hipercatabólico, existe la posibilidad de un desequilibrio proteico. Como los investigadores saben que los aminoácidos son los subproductos de las proteínas, pueden darnos una pista sobre el estado de desequilibrio debido a cualquier cáncer, incluido el carcinoma de células escamosas orales. Además, los cambios en la concentración de aminoácidos en el fluido corporal del paciente con cáncer son significativos según varios estudios. La espectrometría de masas es una plataforma utilizada actualmente para la proteómica o la metabolómica en la investigación biomédica. Al igual que otros métodos de espectrometría como cromatografía de gases-espectrometría de masas (GC-MS), electroforesis capilar-espectrometría de masas (CE-MS), espectrometría de masas de electroforesis bidimensional (2DE-MS), ionización por desorción láser asistida por matriz-tiempo de vuelo espectrometría de masas (MALDI-TOF) y espectrometría de masas de tiempo de vuelo de ionización por desorción láser mejorada de superficie (SELDI-TOF), la cromatografía líquida-espectrometría de masas (LC-MS) se usa ampliamente en la actualidad. Permite una separación y caracterización rápida y eficiente de los analitos en una muestra dada. Por lo tanto, puede ayudar en el diagnóstico rápido de cualquier enfermedad mediante el análisis automatizado de perfiles de aminoácidos con el mínimo esfuerzo y gastos. Se realizaron muchos estudios utilizando una máquina LC-MS para el análisis de saliva para el diagnóstico de varias enfermedades y se encontraron resultados significativos. Que yo sepa, se realizaron muy pocos estudios para averiguar el nivel de aminoácidos en la saliva del paciente con sospecha de lesión oral por LC-MS. Además, no se realizó ningún estudio para el diagnóstico de lesiones orales mediante el análisis del perfil de aminoácidos mediante LC-MS en Bangladesh. El objetivo de este estudio es conocer la asociación de niveles específicos de aminoácidos salivales con el paciente de COCE mediante Cromatografía Líquida-Espectrometría de Masas (LC-MS).

2. Razón fundamental:

   El OSCC es el sexto cáncer más común en todo el mundo, pero en Asia se informó recientemente la porción más grande y en el sudeste asiático es el tercer cáncer más común. Las malas condiciones socioeconómicas, la falta de conciencia y el uso generalizado del tabaco, la masticación de betel quid y el consumo de alcohol son los principales factores detrás de esto. La investigación mostró que el diagnóstico temprano del cáncer reduce la tasa de mortalidad y, por lo tanto, puede mejorar el resultado del tratamiento. Como resultado, los científicos están tratando de encontrar un método fácil, rápido y confiable de diagnóstico de OSCC.

   Aunque la biopsia con bisturí (incisional) seguida de un examen histopatológico sigue siendo el estándar de oro para el diagnóstico de la lesión oral, en el caso de detrás del área visible y en la apertura de la boca restringida, es muy difícil recolectar la muestra representativa. Además, el procedimiento es invasivo y necesita equipo y experiencia especiales. En este aspecto, para evitar el riesgo de procedimientos invasivos y dolor, el análisis de fluidos corporales es el área de interés del investigador en la actualidad.

   Entre los otros fluidos corporales, la saliva es muy fácil de recolectar, no invasiva y podría tener la propiedad de diagnosticar OSCC porque permanece en contacto con la lesión. Tiene un montón de flujo y menos costoso que los demás.

   La máquina LC-MS ahora se usa ampliamente para el análisis de metabolómica en todo el mundo. Tiene la capacidad de analizar una muestra de forma más eficaz y en muy poco tiempo. La medición del aminoácido y otros componentes de la saliva se puede realizar fácilmente con este método. Debido a algunas enfermedades, la concentración de aminoácidos en los fluidos corporales difiere según varios estudios. Los investigadores creen que para la población de Bangladesh existen asociaciones significativas entre varios niveles de aminoácidos salivales y OSCC, que pueden identificarse mediante LC-MS.

3. Objetivo general:

   Conocer la asociación de los niveles de aminoácidos salivales con el carcinoma epidermoide bucal (COCE) identificado por cromatografía líquida-espectrometría de masas.

4. Lugar de estudio:

   Departamento de Cirugía Oral y Maxilofacial, Universidad Médica Bangabandhu Sheikh Mujib (BSMMU) e Instituto de Referencia de Bangladesh para Mediciones Químicas (BRICM), Laboratorio de Ciencias, Dhanmondi, Dhaka.

5. Población de estudio:

   Pacientes y sus acompañantes atendidos en clínica exterior e interior del Departamento de Cirugía Oral y Maxilofacial, BSMMU según criterios de inclusión y exclusión. El tamaño total de la muestra será de 110 y 55 en cada grupo. Los casos son pacientes con carcinoma oral de células escamosas confirmado por biopsia incisional y los controles son relativamente del mismo grupo de edad e individuos sanos.

6. Muestra de estudio:

   Se seleccionarán como casos los pacientes que acudan al Departamento de Cirugía Oral y Maxilofacial, con diagnóstico histopatológico de carcinoma epidermoide oral que cumplan con los criterios de selección. Los sujetos de control se tomarán de individuos sanos entre los asistentes de pacientes casi del mismo grupo de edad de los casos manteniendo los criterios de inclusión. Los participantes se clasifican en dos grupos Grupo A (Casos): El grupo de estudio consta de 55 pacientes con carcinoma de células escamosas orales (OCCE) confirmado histopatológicamente Grupo B (Controles): Este grupo consta de 55 individuos sanos sin antecedentes de cáncer y sin problemas periodontales severos y caries dental.

7. Variables de estudio:

   • Informe de histopatología
   • Nivel de aminoácidos salivales detectados por cromatografía líquida-espectrometría de masas (LC-MS)

8. Consideración ética:

   La autorización ética para el estudio se tomará de la Junta de Revisión Institucional (IRB) de BSMMU antes del comienzo de este estudio. Después de que el comité apruebe el protocolo de investigación, se obtendrá el permiso para el estudio del Departamento de Cirugía Oral y Maxilofacial de la Universidad Médica Bangabandhu Sheikh Mujib.

   Los fines y objetivos del estudio junto con su procedimiento, riesgos, etapas y beneficios de este estudio se explicarán a los sujetos del estudio en un idioma local fácilmente comprensible. Se les asegurará que el riesgo de esta investigación es mínimo. Pero, este riesgo será debidamente abordado por el médico especialista. Si surge algún problema relacionado con el procedimiento de la biopsia o debido a cualquier paso de esta actividad de investigación, obtendrán el tratamiento completo sin costo alguno. Durante y después del programa de investigación se mantendría estrictamente la confidencialidad. Se les dará un número de identificación que será útil para el programa de investigación. Todos los papeles pertenecientes a este número de cédula quedarán bajo llave en oficina. Los asuntos personales no se utilizarán para el análisis, la producción del artículo y la publicación. Solo el investigador involucrado sabrá todo esto y nadie obtendrá su información.

   Su participación en este programa de investigación es absolutamente voluntaria. Pueden negar la participación o abandonar el programa de investigación en cualquier momento. Eso no afectará su proceso de tratamiento. Su derecho legal no se verá perjudicado al firmar el formulario de consentimiento. Se tomará un consentimiento informado por escrito de todos los sujetos del estudio sin explotar ninguna de sus debilidades. A todos los sujetos del estudio se les asegurará su confidencialidad y la libertad de retirarse del estudio en cualquier momento.

9. Implementación de resultados:

   El resultado podría ser útil para descubrir la asociación entre los niveles de aminoácidos salivales y los pacientes con carcinoma oral de células escamosas (OSCC). Por lo tanto, podría ser útil en la detección temprana de OSCC.

   Los datos serán útiles para investigaciones futuras y se considerarán información de referencia para el departamento de salud pública.

10. Objeto y Procedimiento:

El objetivo del estudio es averiguar la asociación de los niveles de aminoácidos salivales con el carcinoma de células escamosas orales (OSCC). El estudio se llevará a cabo en el Departamento de Cirugía Oral y Maxilofacial de la Universidad Médica Bangabandhu Sheikh Mujib. Se inscribirá a pacientes con OSCC confirmado histológicamente. como casos en el estudio por técnica de muestreo conveniente intencional para lograr el número deseado. Se tomará aproximadamente el mismo número de individuos sanos como grupo de control para la comparación. Luego se tomará la saliva del paciente con OSCC y del grupo de control. Después de tomar el recipiente estéril y garantizar un entorno adecuado, la muestra de saliva se llevará al Instituto de referencia designado para mediciones químicas (DRICM), laboratorio de ciencias, Dhanmondi para su análisis mediante una máquina de cromatografía líquida-espectrometría de masas (LC-MS). Mediante esta máquina, se medirán los niveles de 6 aminoácidos específicos (alanina, valina, glicina, fenilalanina, isoleucina, lisina). Los datos obtenidos de cada individuo serán registrados en ficha de recogida de datos prediseñada por separado. Si los participantes están de acuerdo en participar en este programa de investigación, el médico responsable informará a los participantes en detalle.