通过液相色谱质谱法鉴定唾液氨基酸水平与 OSCC 的关联 (OSCC)

1. 介绍：

   口腔癌是组织的异常生长，起源于口腔内及周围的组织与周围正常组织的组织不协调。 在所有口腔癌中，口腔鳞状细胞癌 (OSCC) 是最常见 (90%) 的口腔恶性上皮性肿瘤。 由于其流行率高、发病率高和死亡率高，已成为世界范围内令人担忧的公共卫生问题。 根据 GLOBOCAN 2020 的最新数据，全球新确诊的唇和口腔鳞状细胞癌患者有 377713 例，约占所有癌症报告的 2%。 口腔鳞状细胞癌 (OSCC) 是全球第 6 大常见癌症。 最近的全球报告表明，大部分报告病例来自亚洲 (65.8%)，但在南亚地区，口腔癌是第三大常见癌症。 OSCC高死亡率的关键因素之一是最初许多病变是无症状的。 结果，他们在疾病晚期就诊，最终预后不佳。 研究表明，当 OSCC 处于 I 期时，5 年生存率为 80%，但当疾病处于 IV 期时，5 年生存率降至 20-40%。 对于 OSCC 的诊断，初步临床检查后，切开活检后进行组织病理学检查仍被认为是金标准，但该方法有许多局限性。 侵入性手术需要特殊的专业知识，才能从代表性区域采集活检样本，并需要专业的组织病理学家进行确认。 此外，从可见区域（如舌根、后柱和下颌张开受限的情况）后面采集组织样本非常困难，有时甚至是不可能的。

   人类的唾液是腮腺、下颌下腺、舌下腺和口腔粘膜下方的众多小腺体三大唾液腺的分泌物。 它由水 (99.5%)、 无机盐和酶 (0.2%) 和蛋白质 (0.3%)。 有助于牙周炎、糖尿病、HIV、登革热、腮腺炎甚至乳腺癌、胰腺癌、胃癌、肺癌和口腔癌的诊断。 此外，采集唾液样本有许多优点。 取唾液更容易，不需要侵入性操作或专业知识。 此外，它有足够的生产量，可以由患者自己服用，使取样程序更便宜。 唾液氨基酸是诊断癌症患者的重要代谢物。 氨基酸是蛋白质合成的粗产物。 为此，当癌症患者处于高代谢和高分解代谢状态时，就有可能出现蛋白质失衡。 由于研究人员知道氨基酸是蛋白质的副产品，因此它可以提示我们任何癌症（包括口腔鳞状细胞癌）导致的失衡状态。 此外，根据几项研究，癌症患者体液中氨基酸浓度的变化是显着的。质谱是目前生物医学研究中蛋白质组学或代谢组学使用的平台。 与其他光谱法如气相色谱-质谱法（GC-MS）、毛细管电泳-质谱法（CE-MS）、二维电泳质谱法（2DE-MS）、基质辅助激光解吸电离-飞行时间法等质谱分析法（MALDI-TOF）和表面增强激光解吸电离飞行时间质谱分析法（SELDI-TOF）、液相色谱-质谱分析法（LC-MS）现在被广泛应用。 它允许快速有效地分离和表征给定样品中的分析物。 因此，它可以通过以最少的努力和费用自动分析氨基酸谱来帮助快速诊断任何疾病。 许多研究使用 LC-MS 机器进行唾液分析以诊断多种疾病，并发现了显着的结果。 据我所知，很少有研究通过 LC-MS 确定疑似口腔病变患者的唾液氨基酸水平。 此外，孟加拉国没有通过使用 LC-MS 分析氨基酸谱来进行口腔病变诊断的研究。 本研究的目的是通过液相色谱-质谱法 (LC-MS) 找出特定唾液氨基酸水平与 OSCC 患者的关联。

2. 理由：

   OSCC 是全球第 6 大常见癌症，但最近在亚洲报告的比例最大，而在东南亚，它是第 3 大常见癌症。 社会经济状况不佳、意识淡薄以及广泛使用烟草、嚼槟榔和饮酒是造成这种情况的主要因素。 研究表明，癌症的早期诊断可降低死亡率，从而改善治疗效果。 因此，科学家们正在努力寻找一种简单、快速和可靠的诊断 OSCC 的方法。

   虽然手术刀（切开）活检后进行组织病理学检查仍然是诊断口腔病变的金标准，但在可见区域后面和张口受限的情况下，很难收集到代表性标本。 此外，该过程是侵入性的，需要特殊设备和专业知识。 在这方面，为了避免侵入性操作和疼痛的风险，体液分析是当今研究人员感兴趣的领域。

   在其他体液中，唾液非常容易收集，无创，并可能具有诊断 OSCC 的特性，因为它与病灶保持接触。 它具有充足的流量并且比其他的成本更低。

   LC-MS机器现在在全世界广泛用于代谢组学分析。 它有能力在很短的时间内更有效地分析样品。 通过这种方法可以很容易地测量唾液中的氨基酸和其他成分。 根据一些研究，由于某些疾病，体液中的氨基酸浓度会有所不同。 研究人员认为，对于孟加拉国人口而言，几种唾液氨基酸水平与 OSCC 之间存在显着关联，这可以通过 LC-MS 识别。

3. 总体目标：

   找出唾液氨基酸水平与通过液相色谱-质谱法鉴定的口腔鳞状细胞癌 (OSCC) 之间的关联。

4. 学习地点：

   Bangabandhu Sheikh Mujib 医科大学 (BSMMU) 口腔颌面外科和孟加拉国化学测量参考研究所 (BRICM) 科学实验室，Dhanmondi，达卡。

5. 研究人群：

   根据纳入和排除标准，在 BSMMU 口腔颌面外科的室外和室内诊所就诊的患者及其陪护人员。 每组的总样本量为 110 和 55。 病例为经切开活检确诊的口腔鳞状细胞癌患者，对照为年龄相对相同的健康个体。

6. 研究样本：

   就诊于口腔颌面外科，经组织病理学诊断为口腔鳞状细胞癌且符合选择标准的患者将被选为病例。 对照受试者将取自几乎来自保持纳入标准的同一年龄组病例的患者的陪护人员中的健康个体。 参与者分为两组 A 组（病例）：研究组由 55 名经组织病理学证实患有口腔鳞状细胞癌 (OSCC) 的患者组成 B 组（对照组）：该组由 55 名没有任何癌症病史的健康个体组成没有严重的牙周问题和龋齿。

7. 研究变量：

   • 组织病理报告
   • 液相色谱-质谱法（LC-MS）检测唾液氨基酸水平

8. 伦理考虑：

   在本研究开始之前，BSMMU 的机构审查委员会 (IRB) 将对本研究进行伦理审查。 研究方案经委员会批准后，将获得 Bangabandhu Sheikh Mujib 医科大学口腔颌面外科系的研究许可。

   将以易于理解的当地语言向研究对象解释研究的目的和目标及其程序、风险、阶段和益处。 他们将确信这项研究的风险是最小的。 但是，这种风险将由专科医生妥善解决。 如果出现与活检程序相关的任何问题或由于该研究活动的任何步骤，他们将免费获得整个治疗。 在研究计划期间和之后将严格保密。 将为他们提供一个 ID 号，这将有助于研究计划。 所有属于这个身份证号码的文件都会被锁在办公室里。 个人事务不会用于分析、制作文章和发布。 只有参与调查的人会知道这一切，没有人会得到他们的信息。

   他们参与这项研究计划是完全自愿的。 他们可以随时拒绝参与或退出研究项目。 这不会影响他们的治疗过程。 签署同意书不会损害他们的合法权益。 在不利用他们的任何弱点的情况下，将从所有研究对象处获得书面知情同意书。 所有研究对象都将得到保密和随时退出研究的自由的保证。

9. 执行结果：

   该结果可能有助于找出唾液氨基酸水平与口腔鳞状细胞癌（OSCC）患者之间的关系。 因此，可能有助于早期发现 OSCC。

   这些数据将有助于未来的研究，并将被视为公共卫生部门的基线信息。

10. 目的和程序：

该研究的目的是找出唾液氨基酸水平与口腔鳞状细胞癌 (OSCC) 的关联。该研究将在 Bangabandhu Sheikh Mujib 医科大学口腔颌面外科进行。将招募组织学确诊为 OSCC 的患者作为研究中的案例，通过有目的的方便抽样技术来达到所需的数量。 取大约相同数量的健康个体作为对照组进行比较。 然后将从 OSCC 患者和对照组中取出唾液。 在放入无菌容器并确保适当的环境后，唾液样本将被运送到指定的化学测量参考研究所 (DRICM)、科学实验室、Dhanmondi，通过液相色谱-质谱 (LC-MS) 机器进行分析。 通过这台机器，将测量 6 种特定氨基酸（丙氨酸、缬氨酸、甘氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、赖氨酸）的水平。 从每个人那里获得的数据将分别记录在预先设计的数据收集表中。 如果参与者同意参与本研究计划，负责医生将详细告知参与者。