Gingival Crevicular -nesteen, syljen ja seerumin biomarkkerit periodontaalisessa hoidossa

Parodontiitti on tulehdusprosessi, joka voi johtaa hampaiden menetykseen tuhoamalla hampaita tukevia kudoksia. Interleukiini (IL) 26 on yksi IL-10-sytokiiniperheen uusista jäsenistä. Kohonnut IL-26:n ilmentymistaso liittyy tulehdussairauksiin.

IL-6, pro-inflammatorinen sytokiini ja on yksi tärkeimmistä molekyyleistä tulehduksellisten immuunivasteiden säätelyssä parodontiittissa. IL-10, anti-inflammatorinen sytokiini, vaikuttaa monosyytteihin ja makrofageihin ja niiden immuunivälittäjän vapautumiseen.

Tämä tutkimus on ensimmäinen kontrolloitu kliininen tutkimus, jossa tarkastellaan IL-26:n pitoisuuksia GCF:ssä, syljessä ja seerumissa kahdessa eri periodontiitissa ja arvioidaan tilannetta ennen ja jälkeen hoidon. Tämän tutkimuksen ensimmäinen hypoteesi GCF-, syljen- ja seerumin IL-26- ja IL-6-tasot ovat korkeat ja GCF-, syljen- ja seerumin IL-10-tasot ovat alhaisia ​​parodontiittiryhmissä, toisin kuin parodontaalin terveydestä, tämän toinen hypoteesi. Tutkimuksen mukaan parodontaalihoidon jälkeen GCF, sylki ja seerumin IL-26 ja IL-6 vähenevät ja GCF, sylki ja seerumin IL-10 lisääntyvät.

Näihin hypoteeseihin perustuen tutkimuksen tavoitteena on; vertailla IL-26-, IL-6- ja IL-10-tasoja terveiden kontrollien, SIII-GB-P- ja SIII-GC-P-kohteiden GCF:ssä, syljessä ja seerumissa ja arvioida parodontaalihoidon vaikutusta.

Yhteensä 75 systeemisesti tervettä potilasta; Tähän tutkimukseen otettiin mukaan 25 periodontaalisesti tervettä, 25 SIII-GB-P:tä ja 25 SIII-GC-P:tä. Kliininen parodontaalitutkimus, mukaan lukien mittaussyvyyden (PD), kliinisen kiinnittymistason (CAL), verenvuoto koetuksella (BOP), ienindeksi (GI) ja plakkiindeksi (PI) mittaus, suoritettiin 6 kohdassa hammasta kohden, paitsi kolmannet poskihampaat. Alveolaarisen luukadon esiintyminen arvioitiin kullakin osallistujalla digitaalisella panoraamaröntgenkuvalla, jota täydennettiin tarvittaessa periapikaalisilla röntgenkuvilla.

Jokaisen potilaan parodontaalin tilan arvioi yksi kalibroitu parodontologi manuaalisella anturilla. Parodontiitti- tai parodontaalisen terveyden diagnoosi määritettiin vuonna 2017 järjestetyn World Workshop on Classification of Periodontal and Peri-Implant Diseases and Conditions mukaisesti. Periodontaalisesti terveillä henkilöillä (n=25) kontrolliryhmässä ei ollut kohtia, joissa PD >3 mm ja CAL >2 mm, eikä myöskään röntgenkuvaa alveolaarisesta luukadosta. BOP oli alle 10 % koko suussa, eikä siinä esiintynyt parodontiittia. Parodontiittivaiheen III potilailla oli vähintään 3 hammasta lukuun ottamatta ensimmäisiä poskihampaat ja etuhampaat, jotka osoittivat CAL ≥5 mm ja PD ≥6 mm, eikä havaittu yli 4 hampaan menetystä parodontiittista johtuen. Radiologinen luun menetys ulottuu koronaalisesta keskikolmanteen tai pidemmälle. Radiologinen luukado määritettiin hampaasta, joka osoitti vakavimman luukadon prosentteina juuren pituudesta. Jos luukadon %/ikä arvot olivat välillä 0,25 - 1,0, potilaat luokiteltiin luokkaan B (n = 25). Jos arvo oli korkeampi kuin 1,0, potilaat luokiteltiin C-luokkaan (n = 25).

Hoito Parodontiittipotilaat saivat tavanomaista hilseily- ja juurisuunnittelua (SRP) paikallispuudutuksessa yhteensä 4 kertaa kahdessa viikossa. Sama parodontologi suoritti SRP:n ultraääni-inserteillä ja manuaalisilla parodontaalikyreteillä. Uudelleenarvioinnit suoritettiin 1 ja 3 kuukauden kuluttua hoidon päättymisestä.

GCF-, sylki- ja seeruminäytteenottosuodatinpaperiliuskoja käytettiin GCF-näytteiden keräämiseen. Terveessä kontrolliryhmässä GCF kerättiin yksijuuristen ja monijuuristen hampaiden interproksimaalisista kohdista kustakin kvadrantista. GCF kerättiin kohdista, joissa PD oli ≥ 6 mm ja röntgenkuvaus parodontiittiryhmissä. Valitut paikat eristettiin puuvillarullilla. Paperiliuska poistettiin 30 sekunnin kuluttua parodontaalitaskun asettamisen jälkeen. Aamulla kerättiin passiivisella kuolaamismenetelmällä yhteensä 5 ml stimuloimatonta kokonaista sylkeä. Sylki kerättiin 5 minuutin aikana ohjeiden mukaisesti keräämään sylki suun pohjalle ja kuolaamaan se passiivisesti steriiliin lasilasiin ja näytteet siirretään välittömästi 2 ml:n polypropeeniputkeen. Kaiken kaikkiaan 5 ml verta otettiin kyynärpääkuopasta venepunktiomenetelmällä. Seerumi eristettiin verestä sentrifugoimalla nopeudella 5000 rpm 10 minuuttia, minkä jälkeen se siirrettiin nopeasti steriiliin polypropeeniputkeen. Kaikki näytteet säilytettiin -80 °C:ssa.

Biomarkkeri-immunoanalyysit GCF-, sylki- ja seeruminäytteet sulatettiin jäillä. Sylkinäytteet sentrifugoitiin nopeudella 5 000 rpm 15 minuuttia huoneenlämpötilassa, ja supernatantit käytettiin välittömästi määrityksiin. IL-26:n, IL-10:n ja IL-6:n GCF-, seerumi- ja sylkinäytteet mitattiin ELISA:lla käyttäen kaupallisia tarvikkeita.

Tilastollinen analyysi Kaikki tilastolliset analyysit suoritettiin standarditilastoohjelmistopaketilla. Ryhmän sisäisissä vertailuissa, jos tiedot eivät normaalisti häiriintyneet, Friedman-testiä ja Dunn-testiä Bonferroni-korjauksella käytettiin analysoimaan muutosta lähtötilanteen ja 1 kuukauden ja 3 kuukauden hoidon jälkeen. Ryhmien välisiä vertailuja varten suoritettiin Mann-Whitney U -testi. Spearmanin rankkorrelaatiotestiä käytettiin havaitsemaan biokemiallisten parametrien korrelaatioita kliinisten parametrien ja toistensa kanssa parodontiittiryhmässä ennen ja jälkeen hoidon. Kaikki testit suoritettiin merkitsevyystasolla p < 0,05.