Albumiinin katabolinen nopeus vakaalla isotoopilla mitattuna
Tämän fysiologisen tutkimuksen tavoitteena on verrata albumiinin katabolista nopeutta, joka mitataan stabiililla isotooppileimatulla aminohapolla terveillä vapaaehtoisilla ja potilailla, joilla on maksasairaus. Vakaassa tilassa synteesi ja katabolia tai hajoaminen ovat yhtä suuret.
Ensisijaiset kysymykset, joihin se pyrkii vastaamaan, ovat:
- Onko albumiinin katabolinen määrä alhaisempi potilailla, joilla on maksasairaus?
- Mitataanko albumiinin katabolinen nopeus stabiileilla isotoopeilla vapaaehtoisilla, kuten historiallisilla kontrolleilla, jotka mitattiin radiojodatulla albumiinilla laboratoriossamme tai muualla? Koehenkilöille annetaan suun kautta annos deuteriumleimattua aminohappoa fenyylialaniinia, jonka maksa sisällyttää vasta syntetisoituihin albumiinimolekyyleihin, ja verinäytteitä otetaan 12 viikon aikana albumiinin katabolisen nopeuden määrittämiseksi.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Yksityiskohtainen kuvaus
Tämä tutkimus on osa laajempaa tutkimusohjelmaa, jossa tutkitaan albumiini-infuusioiden kliinistä käyttöä leikkauksissa, maksasairaudissa ja kriittisissä sairauksissa. Käyttöaiheista keskustellaan edelleen yli 70 vuoden käytön jälkeen. Hyvällä menetelmällä synteesin tai hajoamisen arviointiin voi olla valtava arvo näissä tilanteissa.
Kultastandardi albumiinin vaihtuvuuden arvioinnissa on käyttää radiojodilla leimattua albumiinia ja ottaa verinäytteitä useiden viikkojen ajan. Tähän menetelmään liittyy kuitenkin monia sääntelyongelmia ja mahdollisia myös metodologisia puutteita.
Deuteriumleimatun D5-fenyylialaniinin suonensisäistä injektiota on käytetty albumiinisynteesin pikakuvauksessa, mutta tässä tutkimuksessa annamme tämän stabiilin isotooppimerkkiaineen suun kautta. Ajatuksena on, että suuri annos leimattua fenyylialaniinia virtaa yli kaikkien kehon osastojen ja siten sisällytetään maksaan äskettäin syntetisoituihin albumiinimolekyyleihin. Lyhyen ajan kuluttua aminohappopoolissa ei ole enää merkkiainetta ja leimattujen albumiinimolekyylien katoamista voidaan sitten käyttää mittaamaan albumiinin katoamisnopeutta, joka on yhtä suuri kuin katabolinen nopeus ja vakaassa tilassa myös yhtä suuri kuin synteesinopeus.
Uskomme, että tällä uudella menetelmällä voimme voittaa joitakin radiojodattuihin albumiiniin liittyviä ongelmia: 1) ei säteilyä, 2) ei ole vaaraa, että merkkiaine poistuu albumiinimolekyylistä ennen albumiinimolekyylin kataboliaa, 3) ei ole riskiä, että leimausprosessi vahingoittaa albumiinimolekyylin puoliintumisaikaa, 4) proteiinin muuntopotentiaali pitkäkestoiseksi.
Isotooppisesti leimatun fenyylialaniinin rikastumisen kvantitatiivinen mittaus tehdään käyttämällä kaasukromatografia-massaspektrometriaa Karolinska Stable Isotope Core -keskuksessa, jossa Olav Rooyackers on laboratorion johtaja. Kokonaisfenyylialaniinin (esiaste) kvantifiointi suoritetaan massaspektrometrialla sisäistä standardia vastaan.
Albumiinimolekyyli sitoutuu vapaisiin happoradikaaleihin (savenger-toiminto) sen sulfhydryyliryhmällä Cys-34-asemassa (ihmisen merkaptoalbumiini). Oksidatiivisen stressin aikana sulfhydryyliryhmä hapettuu sulfiinihapoksi (ihmisen ei-merkaptoalbumiini 1, HNA 1). Tämä on palautuva prosessi. Jatkettaessa hapettumista muodostuu sulfonihappoa, joka näyttää olevan irreversiibeli (ihmisen ei-merkaptoalbumiini 2, HNA2). Tuloksena on vaurioitunut albumiinimolekyyli, joka on menettänyt sieppaustoimintonsa. Oksidatiivisella stressillä korkealla HNA2-tasolla voi olla ratkaiseva rooli vakavan maksan vajaatoiminnan patogeneesissä.
Kirjallisuudessa ei ole tietoa hapettuneen albumiinin muutoksista ajan myötä. Haluamme yrittää mallintaa albumiinin vaihtuvuutta tarkastelemalla kuinka nämä fraktiot ja niiden väliset suhteet muuttuvat ajan myötä. Haluamme myös nähdä, voimmeko toistaa aikaisemmat tulokset, jotka viittaavat siihen, että hapettuneen albumiinin määrä on korkeampi maksakirroosipotilailla [Oettl 2013]. Lopuksi tutkimme albumiinin hapettumisen ja albumiinin katabolisen nopeuden välistä yhteyttä.
Tilastollinen analyysisuunnitelma, joka sisältää opiskelijoiden lukumäärän määrityksen, sisältyy oheiseen opintosuunnitelmaan.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Arvioitu)
Vaihe
- Ei sovellettavissa
Yhteystiedot ja paikat
Opiskeluyhteys
- Nimi: Åke Norberg, PhD
- Puhelinnumero: +46739669523
- Sähköposti: ake.norberg@ki.se
Tutki yhteystietojen varmuuskopiointi
- Nimi: Olav Rooyackers, Professor
- Puhelinnumero: +46739661645
- Sähköposti: olav.rooyackers@ki.se
Opiskelupaikat
-
-
-
Stockholm, Ruotsi, 14186
- Karolinska Institutet
-
Ottaa yhteyttä:
- Åke Norberg, PhD
- Puhelinnumero: +46739669523
- Sähköposti: ake.norberg@ki.se
-
Ottaa yhteyttä:
- Olav Rooyackers, Professor
- Puhelinnumero: +46739661645
- Sähköposti: olav.rooyackers@ki.se
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
- Aikuinen
- Vanhempi Aikuinen
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
Terveet vapaaehtoiset:
- miehet ja naiset > 40 vuotta (vastaa enemmän maksapotilaiden odotettua ikää)
- hyvät perifeeriset verisuonet
- kirjallinen tietoinen suostumus
Potilaat, joilla on maksakirroosi:
- aikuispotilaiden ikä on yli 18 vuotta
- tunnetut kompensoituneet maksakirroosi ja portaaliverenpaineen radiologiset tai endoskooppiset merkit, kuten suonikohjut, splenomegalia tai šuntit.
- kirjallinen tietoinen suostumus
Poissulkemiskriteerit:
- Suunniteltu kirurginen toimenpide 3 kuukauden sisällä (mahdollisesta verenhukasta, eli merkkiaineen katoamisesta)
- Raskaus annostelussa
- Fenyyliketonuria
- Osallistuminen muihin tutkimuksiin stabiileilla isotoopeilla 60 päivän sisällä.
- Tilanne, joka saa vastuullisen tutkijan arvioimaan tutkijan osallistumisen sopimattomaksi
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Ensisijainen käyttötarkoitus: Diagnostiikka
- Jako: Ei satunnaistettu
- Inventiomalli: Rinnakkaistehtävä
- Naamiointi: Ei mitään (avoin tarra)
Aseet ja interventiot
Osallistujaryhmä / Arm |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Kokeellinen: Potilaat, joilla on maksasairaus
potilaat, joilla on krooninen maksasairaus, saavat suun kautta annoksen stabiilia isotooppileimattua aminohappoa, 2H5-fenyylialaniinia (45 mg/kg ruumiinpainoa 50 % MPE). Verinäytteet otetaan 12 viikon aikana. |
Merkkiaine 2H5-fenyylialaniini on välttämätön deuteriumilla leimattu aminohappo, joka on stabiili isotooppi, eli ei säteilyä, mutta merkkiaine voidaan silti arvioida kaasukromatografian ja massaspektrometrian yhdistelmällä.
Merkkiaineilla ei ole mitattavissa olevia vaikutuksia, mutta niitä käytetään ihmisen fysiologian arviointiin.
|
|
Kokeellinen: Terveet vapaaehtoiset, joilla ei ole merkkejä maksasairaudesta
Terveet vapaaehtoiset, joilla ei ole merkkejä maksasairaudesta, saavat suun kautta annoksen stabiilia isotooppileimattua aminohappoa, 2H5-fenyylialaniinia (45 mg/kg ruumiinpainoa 50 % MPE). Verinäytteet otetaan 12 viikon aikana. |
Merkkiaine 2H5-fenyylialaniini on välttämätön deuteriumilla leimattu aminohappo, joka on stabiili isotooppi, eli ei säteilyä, mutta merkkiaine voidaan silti arvioida kaasukromatografian ja massaspektrometrian yhdistelmällä.
Merkkiaineilla ei ole mitattavissa olevia vaikutuksia, mutta niitä käytetään ihmisen fysiologian arviointiin.
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Albumiinin hajoamisnopeus stabiilin isotoopin mukaan
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
2H5-fenyylialaniinilla leimatun albumiinin katoamisnopeus ajan myötä eli albumiinin katabolinen nopeus mitataan molemmissa tutkimusryhmissä verinäytteistä 12 viikon aikana, ja tutkimusryhmiä verrataan.
|
12 viikkoa
|
|
Albumiinin hajoamisnopeus eri menetelmillä
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
Terveitä vapaaehtoisia verrataan laboratoriomme historiallisiin kontrolleihin, joissa albumiinin hajoamisnopeus mitattiin radiojodatulla ihmisen seerumin albumiinilla.
|
12 viikkoa
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Albumiinin hajoaminen mallintamalla erilaisia hapettuneen albumiinin fraktioita ajan myötä
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
Albumiinimolekyylin elinkaaren aikana ilmaantuu yhä enemmän hapettumista.
Kaksinkertaisesti hapettunut molekyyli ei voi enää kääntyä hapettumattomaksi albumiiniksi.
Haluamme tutkia, voidaanko hapettuneen albumiinin eri muotojen leimattujen ja leimaamattomien fraktioiden annoksia käyttää albumiinin hajoamisnopeuden mallintamiseen
|
12 viikkoa
|
|
Albumiinin hapettumisen ja hajoamisnopeuden välinen korrelaatio
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
Albumiinimolekyylien hapettumisen on raportoitu lisääntyneen maksasairaudessa.
Haluamme nähdä, onko hapettumisfraktion ja albumiinin hajoamisnopeuden välillä korrelaatiota.
|
12 viikkoa
|
|
Albumiinin synteesinopeus
Aikaikkuna: 120 minuuttia
|
Vertaamme oraalista tulva-annosta historiallisiin kontrolleihin, joissa isotooppi annettiin suonensisäisesti laboratoriossamme mittaamaan albumiinin synteesinopeuksia vapaaehtoisilla ja maksasairauspotilailla.
|
120 minuuttia
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Tutkijat
- Päätutkija: Åke Norberg, PhD, Karolinska Institutet, Stockholm
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Arvioitu)
Ensisijainen valmistuminen (Arvioitu)
Opintojen valmistuminen (Arvioitu)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- 4-2885/2022
- K2022-10941 (Muu tunniste: Karolinska University Hospital)
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .