Ydinmagneettiseen resonanssiin perustuva metabolinen profilointi fibromyalgiapotilailla

1. Tutkimuksen koko nimi: Ydinmagneettiseen resonanssiin perustuva metabolinen profilointi fibromyalgiapotilailla

2. Tutkimuksen tavoite ja tärkeys (ensisijainen tavoite, toissijaiset tavoitteet, jos sellaisia ​​on):

   Metaboliittien ja entsyymiaktiivisuuksien määritys ja kvantifiointi NMR:llä fibromyalgiapotilailla, muutokset sitraatissa, isositraatissa, alfaketoglutaraatissa, alfaketoglutaraatissa, sukkinyyli-CoA:ssa, fumaraatissa, malaatissa, glutamaatissa, G-6 PD:ssä, fosfoglukonaatissa, glyseraldehydissä ja erityisesti p-asetaldehydi-3-arvoissa näiden potilaiden energia-aineenvaihdunnassa ja niiden arvioinnissa kliininen käyttökelpoisuus tutkitaan.

3. Tutkimuksen odotetut hyödyt ja riskit:

   Fibromyalgia määritellään krooniseksi tuntemattomasta syystä johtuvaksi oireyhtymäksi, jolle on tunnusomaista laajalle levinnyt kehon kipu, väsymys, unihäiriöt, kognitiivisen toiminnan heikkeneminen ja ahdistuneisuus, ja mahdollisia syitä ovat geneettiset, neurologiset, psykologiset, uneen liittyvät ja immunologiset tekijät. Sairaus on 6-9 kertaa yleisempi naisilla. American College of Rheumatologyn (ACR) vuoden 1990 luokituskriteerien julkaisemisen jälkeen todelliseksi oireyhtymäksi määritellyn fibromyalgian diagnoosi on vaikea oireiden subjektiivisuuden vuoksi, koska arviointi perustuu potilaaseen. raportit ja objektiivisten diagnostisten testien puuttuminen diagnoosin vahvistamiseksi. Fibromyalgian diagnostiset kriteerit, jotka kuvattiin ensimmäisen kerran 1800-luvulla ja on nivelrikon jälkeen yleisin reumaattinen sairaus, muuttuvat jatkuvasti. Sen lisäksi, että taudin diagnosointi on vaikeaa, fysiopatologiaa ei täysin ymmärretä eikä erityistä hoidon kohdetta ole määritetty.

   Fibromyalgiapotilaiden seerumi- ja virtsaanalyyseissä tehtävien metabolomien tutkimusten määrä on rajallinen, ja tämän aukon täyttämiseksi käytämme Bruker 500 MHertz NMR -laitetta kokeneen tiimin kanssa tutkimaan metaboliitin määritystä ja kvantitointia, entsyymiaktiivisuutta ja erityisesti energia-aineenvaihduntaa Fibromyalgiapotilaat. Siten tutkitaan, onko fibromyalgiapotilailla taipumusta rappeuttaville tai proliferatiivisille sairauksille johtuen energia-aineenvaihdunnan kiihtymisestä tai vähenemisestä. Kirjallisuuskatsauksen mukaan fibromyalgiapotilailla ei ole tutkimuksia, joissa tutkittaisiin sekä entsyymejä että metaboliitteja yhdessä.

   Tutkijoiden julkaisemissa töissä NMR:ää käytetään usein rakenneanalyysiin. Kvantitatiivista NMR:ää (qNMR) sitä vastoin kehitetään laajentamaan niiden metaboliittien valikoimaa, jotka se pystyy havaitsemaan kehon nesteissä (pienten aineiden pitoisuuksien sieppaamiseksi). qNMR aloitettiin hyvin vanhoilla tutkimuksilla ja alitekniikoita optimoidaan korkean herkkyyden aikaansaamiseksi. Kehittyvän teknologian myötä tämä spektri laajenee ja tulevaisuudessa voidaan määrittää satoja metaboliitteja yhdellä viitteellä. Vaikka NMR-laitteita on saatavilla rajoitetussa määrässä yliopistoja maassamme, olemme päättäneet, että tutkimuksemme tuloksena ei ole olemassa kvantitatiivista analyysiä varten työskentelevää ryhmää. Pyrimme soveltamaan teoreettista tietämyksemme käytäntöön Bezmi Alem Vakıf -yliopiston lääketieteellisen tiedekunnan opettajien kokemuksella ja tiedolla projektissamme.

   Valitsimme qNMR-tutkimusidemme lähtökohtana fibromyalgiataudin, jossa päivittäin sairaalaan saapuvien näytteiden määrä on melko korkea. Lisäksi havaitsimme, että aihetta koskevat kliiniset tutkimukset ovat melko rajallisia. Tässä mielessä tutkijat ovat ainutlaatuisia, koska ne tarjoavat kokonaisvaltaisen metabolisen profiloinnin fibromyalgiapotilailla ja tarjoavat tietoja aikuisista.

   NMR-tekniikan suurin ongelma on korkeat kustannukset laitteen asennuksen aikana, jolloin alhaisilla käyttökustannuksilla halutut analyysit voidaan suorittaa helposti ja edullisesti data-analyysiin tarvittavien vertailumateriaalien ja ohjelmistojen läsnä ollessa. Pyrimme suorittamaan kehon nesteiden metaboliittien kvantifioinnin NMR-laitteella, joka on jo asennettu ja joka on tällä hetkellä käytössä Bezmi Alem Vakıfin yliopistossa. Valitsimme lähtökohdaksi fibromyalgiasairauden, jonka kvantitatiivinen NMR-analyysi on kirjallisuudessa hyvin harvinainen. Kvantitatiivisten NMR-analyysien näytteenvalmistuksen/analyysimenettelyn osalta on tarkoitus tutkia seerumia ja virtsaa, jotka ovat ensimmäiset standardoidut ruumiinnestenäytteet sekä potilaspopulaatioon ja terveisiin vapaaehtoisiin kuuluvia näytteitä. NMR-spektrissä saatujen piikkien mukaan metaboliitin tunnistus tehdään ja näiden metaboliittien kvantifiointi suoritetaan tutkimukseen toimitettavalla ohjelmistolla.

4. Suunnitellun tutkimuksen tyyppi, laajuus ja suunnittelu:

   Tässä prospektiivisessa kaksiryhmätutkimuksessa metaboliittien tunnistus suoritetaan NMR-spektrissä saatujen huippujen mukaisesti 50 potilaalla, joilla on kliinisesti diagnosoitu fibromyalgia, ja 50 terveellä vapaaehtoisella, ja tarkoituksena on suorittaa näiden metaboliittien kvantitointi toimitettavalla ohjelmistolla. opiskelua varten.

5. Tutkimukseen osallistuvien potilaiden ja vapaaehtoisten lukumäärä, heidän pätevyytensä ja valinnan perusteet:

   Tutkijat suoritetaan 1.1.2024-1.12.2024 välisenä aikana 50 potilaalle, joilla on fibromyalgiadiagnoosi iältään 18-65 ja jotka täyttävät tutkijoiden mukaanotto- ja poissulkemiskriteerit sekä 50 tervettä vapaaehtoista. Tutkimuksen aiempi tehoanalyysi suoritettiin käyttämällä "G. Power-3.1.9.2" ohjelma. Keskiarvot laskelmissa: Wilcoxon singed-rank testi (yksi näytetapaus) vaikutuskoko 0,50, alfa 0,05, teho 0,90, ryhmien lukumäärä 1, mittausten lukumäärä: 2, kokonaisnäytteeksi laskettiin 38. Tutkimukseen suunniteltiin ottavan yhteensä 38 potilasta

6. Analysoitavat parametrit:

   Sitraatin, isositraatin, alfaketoglutaraatin, sukkinyyli-CoA:n, fumaraatin, malaatin, glutamaatin, G-6 PD:n, fosfoglukonaatin, glyseraldehydi 3P:n ja oksaloasetaatin pitoisuuksien mittaus NMR-tekniikalla

7. Missä ja kuka parametrit tarkastaa: Tutkimuksen suorittaa erikoislääkäri Hatice Kübra Aşık yksityisen Beykent-sairaalan fyysisen lääketieteen ja kuntoutusklinikan poliklinikalla. Tohtori Hatice Kübra Aşık ja biokemialliset testit suorittaa Prof. Dr. Yıldız Atamer yksityisen Beykent-sairaalan biokemian osastolla.

8. Mitkä tutkimuksessa käytettävät parametrit ovat rutiineja kyseiselle sairausryhmälle ja mitkä ovat tutkimukselle ominaisia:

   Sitraatin, isositraatin, alfaketoglutaraatin, sukkinyyli-CoA:n, fumaraatin, malaatin, glutamaatin, G-6 PD:n, fosfoglukonaatin, glyseraldehydi 3P:n ja oksaloasetaatin mittaaminen NMR-tekniikalla ei ole rutiinia tälle taudille, mutta sitä tutkitaan tässä ryhmässä tieteellisiin tutkimustarkoituksiin

9. Työn arvioitu kesto, alkamis- ja päättymispäivät: 1.3.2024 - 1.12.2024

10. Sisällyttämis-, poissulkemis- ja peruuttamiskriteerit:

    Sisällön kriteerit:

    18-65-vuotiaat naispotilaat Potilaat, joilla on kliinisiä fibromyalgiavaivoja (laajuinen kipu, heikkous, väsymys, unihäiriöt, ahdistuneisuus, liikkumisrajoitukset jne.) poliklinikalle hakeutuvien potilaiden joukossa

    Poissulkemiskriteerit:

    Virus- tai bakteeri-infektiot, Systeemiset sairaudet (diabetes, hypertensio, krooninen munuaisten vajaatoiminta, kilpirauhasen vajaatoiminta) Potilaat, jotka käyttävät masennuslääkkeitä tai lääkitystä, Potilaat, joiden laboratoriotulokset ovat poikkeavia (erytrosyyttien sedimentaationopeus, biokemialliset tai serologiset parametrit ja kilpirauhasen toimintakokeet), tupakoitsijat ja alkoholin käyttäjät, nivelreumaa ja systeemistä lupus erythematosusta sairastavat potilaat olivat poissuljettu.

    Ne, jotka saivat hoitoa kasvaimeen

11. Tutkimuksen lopetuskriteerit: Tutkimus on tarkoitus lopettaa, kun tutkimukseen tarvittavat 50 potilasta ja 50 tervettä vapaaehtoista on saatu päätökseen.
12. Tutkimuksen tuloksena saatavien tietojen arvioinnissa on käytettävä tilastollisia menetelmiä:

IBM SPSS (Statistical Package for the Social Sciences) -tilastot Windowsille, versio 25.0. Armonk, NY: IBM Corp.:ta käytetään. Aineiston kuvaavassa tilastossa parametrisissä testeissä käytetään keski- ja keskihajonnan arvoja; mediaaniarvoja sekä minimi- ja maksimiarvoja käytetään ei-parametrisissa testeissä.

Muuttujien jakauma tarkistetaan Kolmogorov-Smirnov-testillä. Paritettua t-testiä käytetään toistuviin mittauksiin normaalijakauman kanssa, kun taas Wilcoxon-testiä käytetään ei-normaalijakautuneille tiedoille. Tulokset arvioidaan 95 %:n luottamusvälillä ja p < 0,05 määritellään tilastolliseksi merkitsevyydeksi.

1. Malatji BG, Meyer H, Mason S, et ai. Valittujen potilaiden ja kontrollien NMR-metabolomiikkatutkimukset, jotka perustuvat fibromyalgiaoireyhtymän diagnostiseen biomarkkeriprofiiliin. BMC Neurology (2017), 17:88
2. Hsu W-H, Lee C-H, Chao Y-M, et ai. Seerumin ja virtsan ASIC3-riippuvainen metabolominen profilointi fibromyalgia-hiirimallissa Scientific Reports, (2019), 9:12123.
3. Clos-Garcia M, Andrés-Marin N, Fernández-Eulate G, et ai. Suoliston mikrobiomi- ja seerumin metabolomianalyysit tunnistavat molekyylibiomarkkereita ja muuttuneen glutamaattiaineenvaihdunnan fibromyalgiassa. EBioMedicine (2019), 46:499-511.
4. Hackshaw KV, Aykas DP, Sigurdson GT, et ai. Metaboliset sormenjäljet ​​fibromyalgian ja muiden reumatologisten häiriöiden diagnosointiin. J. Biol. Chem. (2019), 294(7):2555-2568.
5. Hsu W-H, Han D-S, Ku W-C, et. ai. Sng- ja kipufenotyyppien metabolinen ja proteominen karakterisointi fibromyalgiassa. Eur J Pain, (2022), 26:445-462.
6. Victoria Menzies, Angela Starkweather, Yingwei Yao ym. Aineenvaihduntaerot naisilla, joilla on ja ei ole fibromyalgiaa. Clin Transl. Sei (2020) 13, 67-77.
7. Bal SH, Budak F. Genomics, Proteomics Concepts and Application Areal Journal of Uludagin yliopiston lääketieteellinen tiedekunta, 39 (1) 65-69, 2013.
8. Başaran E, Aras S, Cansaran-Duman D. General Outlook and Applications of Genomics, Proteomics and Metabolomics.Turkish Journal of Hygiene and Experimental Biology 2010; 67 (2): 85-96.
9. Dogan HO. Kohdistamaton aineenvaihduntaanalyysi. Sivas Biochemry Days, 2.-5.11.2016.
10. Marques AP, Santo ASE, Berssaneti AA, Matsutani LA, Yuan SLK. Fibromyalgian esiintyvyys: kirjallisuuskatsauksen päivitys. Rev Bras Reumatol. 2017;57(4):356-363.
11. Macfarlane GJ, Kronisch C, Dean LE, Atzeni F, Häuser W, Flub E, et ai. EULARin tarkistetut suositukset fibromyalgian hoitoon. Ann Rheum Dis. 2017;76(2):318-328.