Perfil Metabolômico Baseado em Ressonância Magnética Nuclear em Pacientes com Fibromialgia

1. Nome completo do estudo: Perfil Metabolômico Baseado em Ressonância Magnética Nuclear em Pacientes com Fibromialgia

2. Objetivo e importância do estudo (objetivo principal, objetivos secundários, se houver):

   Determinação e quantificação de metabólitos e atividades enzimáticas por RMN em pacientes com fibromialgia, alterações nos valores de citrato, isocitrato, alfa cetoglutarato, alfa cetoglutarato, succinil CoA, fumarato, malato, glutamato, G-6 PD, fosfogluconato, gliceraldeído 3 P e oxaloacetato, especialmente no metabolismo energético nesses pacientes e a avaliação de sua utilidade clínica será investigada.

3. Benefícios e riscos esperados da pesquisa:

   A fibromialgia é definida como uma síndrome crônica de causa desconhecida, caracterizada por dor generalizada no corpo, fadiga, distúrbios do sono, comprometimento do funcionamento cognitivo e ansiedade, e as possíveis causas incluem fatores genéticos, neurológicos, psicológicos, relacionados ao sono e imunológicos. A doença é 6 a 9 vezes mais comum em mulheres. O diagnóstico da fibromialgia, definida como uma síndrome verdadeira desde a publicação dos critérios de classificação do American College of Rheumatology (ACR) de 1990, é difícil pela subjetividade dos sintomas, pelo fato da avaliação ser baseada no paciente relatórios e a falta de testes diagnósticos objetivos para confirmar o diagnóstico. Os critérios diagnósticos da fibromialgia, descrita pela primeira vez no século XIX e que é a doença reumática mais comum depois da osteoartrite, estão em constante mudança. Além da dificuldade no diagnóstico da doença, a fisiopatologia não é totalmente compreendida e não foi determinado um alvo específico para o tratamento.

   O número de estudos metabolômicos em análises de soro e urina de pacientes com fibromialgia é limitado e, para preencher essa lacuna, usaremos o dispositivo Bruker 500 MHertz NMR com uma equipe experiente para examinar a determinação e quantificação de metabólitos, atividades enzimáticas e especialmente metabolismo energético em Pacientes com fibromialgia. Assim, será investigado se existe predisposição a doenças degenerativas ou proliferativas devido à aceleração ou diminuição do metabolismo energético em pacientes com Fibromialgia. De acordo com nossa revisão de literatura, não há estudos que investiguem enzimas e metabólitos juntos em pacientes com fibromialgia.

   Nos trabalhos publicados de pesquisadores, a RMN é frequentemente usada para análise de estrutura. A RMN quantitativa (qNMR), por outro lado, está em desenvolvimento para expandir a gama de metabólitos que pode detectar em fluidos corporais (para capturar baixas concentrações de substâncias). qNMR começou com estudos muito antigos e subtécnicas estão sendo otimizadas para fornecer alta sensibilidade. Com o desenvolvimento da tecnologia, este espectro irá expandir-se e, no futuro, centenas de metabolitos poderão ser determinados utilizando uma única referência. Embora o equipamento de RMN esteja disponível em um número limitado de universidades em nosso país, determinamos que não há nenhum grupo trabalhando para análise quantitativa como resultado de nossa pesquisa. Nosso objetivo é colocar nosso conhecimento teórico em prática com a experiência e o conhecimento dos professores da Faculdade de Medicina da Universidade Bezmi Alem Vakıf dentro de nosso projeto.

   Como ponto de partida para os nossos estudos de qNMR, escolhemos a doença fibromialgia, onde o número de amostras diárias que chegam ao nosso hospital é bastante elevado. Além disso, descobrimos que os estudos clínicos sobre o assunto são bastante limitados. Nesse sentido, os investigadores são únicos na medida em que fornecerão um perfil metabólico holístico em pacientes com fibromialgia e fornecerão dados em adultos.

   O problema mais importante da técnica de RMN são os altos custos durante a instalação do dispositivo, então com baixos custos operacionais, as análises desejadas podem ser realizadas facilmente e com baixo custo na presença de materiais de referência e software necessários para análise de dados. Nosso objetivo é realizar a quantificação de metabólitos em fluidos corporais no aparelho de RMN, que já foi instalado e está atualmente em operação na Universidade Bezmi Alem Vakıf. Como ponto de partida, escolhemos a doença fibromialgia, para a qual a análise quantitativa por RMN é muito rara na literatura. Em termos de procedimento de preparação/análise de amostras para análises quantitativas de RMN, está previsto estudar soro e urina, que são as primeiras amostras padronizadas de fluidos corporais, e amostras pertencentes à população de pacientes e voluntários saudáveis. De acordo com os picos obtidos no espectro de RMN, será feita a identificação dos metabólitos e a quantificação desses metabólitos será realizada com o software a ser fornecido para o estudo.

4. Tipo, escopo e desenho do estudo planejado:

   Neste estudo prospectivo de dois grupos, a identificação de metabólitos será realizada de acordo com os picos obtidos no espectro de RMN em 50 pacientes com fibromialgia clinicamente diagnosticada e 50 voluntários saudáveis ​​e tem como objetivo realizar a quantificação desses metabólitos com o software a ser fornecido para o estudo.

5. Número de pacientes e voluntários a serem incluídos no estudo, suas qualificações e justificativa para seleção:

   Os investigadores serão conduzidos entre 1º de janeiro de 2024 e 1º de dezembro de 2024 com 50 pacientes com diagnóstico de fibromialgia com idades entre 18 e 65 anos que atendem aos critérios de inclusão e exclusão dos investigadores e 50 voluntários saudáveis. A análise de poder prévio do estudo foi realizada utilizando o programa "G. Programa Power-3.1.9.2". Médias nos cálculos: teste de posto único de Wilcoxon (um caso de amostra) tamanho do efeito 0,50, alfa 0,05, poder 0,90, número de grupos 1, número de medidas: 2, amostra total foi calculada como 38. Um total de 38 pacientes foram planejados para serem incluídos no estudo

6. Parâmetros a serem analisados:

   Medição dos níveis de citrato, isocitrato, alfa cetoglutarato, succinil CoA, fumarato, malato, glutamato, G-6 PD, fosfogluconato, gliceraldeído 3 P e oxaloacetato pela técnica de RMN

7. Onde e por quem os parâmetros serão verificados: O estudo será conduzido pelo Especialista Dr. Hatice Kübra Aşık no ambulatório da Clínica de Medicina Física e Reabilitação do Hospital Privado Beykent. Hatice Kübra Aşık e os testes bioquímicos serão realizados pelo Prof. Yıldız Atamer no Departamento de Bioquímica do Hospital Privado Beykent.

8. Quais dos parâmetros a serem utilizados no estudo são rotineiros para aquele grupo de doenças e quais são específicos do estudo:

   Medição dos níveis de citrato, isocitrato, alfa cetoglutarato, succinil CoA, fumarato, malato, glutamato, G-6 PD, fosfogluconato, gliceraldeído 3 P e oxaloacetato pela técnica de RMN não é rotina para esta doença, mas será estudada neste grupo para fins de pesquisa científica

9. Duração projetada do trabalho, datas de início e término: 1º de março de 2024 - 1º de dezembro de 2024

10. Critérios de inclusão, exclusão e retirada:

    Critérios de inclusão:

    Pacientes do sexo feminino com idade entre 18 e 65 anos Pacientes com queixas clínicas de fibromialgia (dor generalizada, fraqueza, fadiga, problemas de sono, ansiedade, restrição de movimentos, etc.) entre os pacientes que se candidatam ao ambulatório

    Critérios de exclusão:

    Infecções virais ou bacterianas, Doenças sistêmicas (diabetes mellitus, hipertensão, insuficiência renal crônica, hipo-hipertireoidismo) Pacientes em uso de antidepressivos ou medicamentos, Pacientes com resultados laboratoriais anormais (velocidade de hemossedimentação, parâmetros bioquímicos ou sorológicos e testes de função tireoidiana), Fumantes e usuários de álcool. Foram excluídos pacientes com artrite reumática e lúpus eritematoso sistêmico.

    Aqueles que receberam tratamento para tumor

11. Critérios de encerramento do estudo: O estudo está planejado para ser encerrado após a conclusão dos 50 pacientes e 50 voluntários saudáveis ​​necessários para o estudo.
12. Na avaliação dos dados a obter em resultado da investigação métodos estatísticos a utilizar:

IBM SPSS (Pacote Estatístico para Ciências Sociais) Estatísticas para Windows, Versão 25.0. Armonk, NY: IBM Corp. será usada. Na estatística descritiva dos dados serão utilizados valores de média e desvio padrão em testes paramétricos; valores medianos, valores mínimos e máximos serão utilizados em testes não paramétricos.

A distribuição das variáveis ​​será verificada pelo teste de Kolmogorov-Smirnov. O teste t pareado será utilizado para medidas repetidas com distribuição normal, enquanto o teste de Wilcoxon será utilizado para dados com distribuição não normal. Os resultados serão avaliados com intervalo de confiança de 95% e p<0,05 é definido como significância estatística.

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