Mágneses magrezonancián alapuló metabolikus profilozás fibromyalgiás betegekben

1. A tanulmány teljes neve: Nukleáris mágneses rezonancián alapuló metabolikus profilalkotás fibromyalgiás betegekben

2. A vizsgálat célja és jelentősége (elsődleges cél, másodlagos célok, ha vannak):

   Metabolitok és enzimaktivitások meghatározása és mennyiségi meghatározása fibromyalgiás betegekben NMR segítségével, a citrát, izocitrát, alfa-ketoglutarát, alfa-ketoglutarát, szukcinil-CoA, fumarát, malát, glutamát, G-6 PD, foszfoglükonát, glicerinaldehid és különösen a gliceraldehid-3 értékek változása ezeknél a betegeknél az energia-anyagcserében és azok értékelésében klinikai hasznosságát megvizsgálják.

3. A kutatás várható előnyei és kockázatai:

   A fibromyalgiát egy ismeretlen okú krónikus szindrómaként határozzák meg, amelyet széles körben elterjedt testfájdalom, fáradtság, alvászavar, kognitív funkciók és szorongás jellemez, és a lehetséges okok közé tartoznak a genetikai, neurológiai, pszichológiai, alvással kapcsolatos és immunológiai tényezők. A betegség 6-9-szer gyakoribb a nők körében. Az American College of Rheumatology (ACR) 1990-es besorolási kritériumainak közzététele óta valódi szindrómának számító fibromyalgia diagnózisa nehéz a tünetek szubjektivitása miatt, az a tény, hogy az értékelés a betegen alapul. jelentések és a diagnózis megerősítésére szolgáló objektív diagnosztikai tesztek hiánya. A fibromyalgia diagnosztikai kritériumai, amelyet először a 19. században írtak le, és az osteoarthritis után a leggyakoribb reumás betegség, folyamatosan változnak. A betegség diagnosztizálásának nehézsége mellett a fiziopatológia nem teljesen ismert, és a kezelés konkrét célját sem határozták meg.

   A fibromyalgiában szenvedő betegek szérum- és vizeletvizsgálatában a metabolomikai vizsgálatok száma korlátozott, és ennek a hiánynak a pótlására Bruker 500 MHertz NMR készüléket használunk egy tapasztalt csapattal a metabolitok meghatározására és mennyiségi meghatározására, az enzimaktivitásokra és különösen az energiaanyagcserére. Fibromyalgiás betegek. Így azt vizsgálják, hogy a fibromyalgiás betegeknél van-e hajlam a degeneratív vagy proliferatív betegségekre az energia-anyagcsere felgyorsulása vagy csökkenése miatt. Szakirodalmi áttekintésünk szerint nincsenek olyan vizsgálatok, amelyek az enzimeket és a metabolitokat együttesen vizsgálnák fibromyalgiás betegekben.

   A kutatók publikált munkáiban az NMR-t gyakran használják szerkezetanalízisre. A kvantitatív NMR (qNMR) viszont fejlesztés alatt áll, hogy kibővítse a testnedvekben kimutatható metabolitok körét (alacsony koncentrációjú anyagok rögzítésére). A qNMR nagyon régi tanulmányokkal indult, és az altechnikákat optimalizálják, hogy nagy érzékenységet biztosítsanak. A fejlődő technológiával ez a spektrum bővülni fog, és a jövőben több száz metabolitot lehet meghatározni egyetlen referencia segítségével. Bár hazánkban korlátozott számú egyetemen érhető el NMR berendezés, kutatásunk eredményeként megállapítottuk, hogy nincs kvantitatív elemzéssel foglalkozó csoport. Célunk, hogy elméleti tudásunkat a gyakorlatba ültessük be projektünk keretében a Bezmi Alem Vakıf Egyetem Orvostudományi Karának oktatóinak tapasztalataival és tudásával.

   A qNMR vizsgálataink kiindulópontjaként a fibromyalgia betegséget választottuk, ahol meglehetősen magas a napi minták száma, amelyek kórházunkba kerülnek. Ezenkívül azt találtuk, hogy a témával kapcsolatos klinikai vizsgálatok meglehetősen korlátozottak. Ebben az értelemben a kutatók egyedülállóak abban, hogy holisztikus anyagcsere-profilt biztosítanak a fibromyalgiás betegekben, és adatokat szolgáltatnak a felnőttekről.

   Az NMR technika legfontosabb problémája a készülék telepítése során felmerülő magas költségek, majd alacsony üzemeltetési költségek mellett az adatelemzéshez szükséges referenciaanyagok és szoftverek megléte mellett könnyen és alacsony költséggel elvégezhetők a kívánt elemzések. Célunk, hogy a testfolyadékokban lévő metabolitok mennyiségi meghatározását a Bezmi Alem Vakıf Egyetemen már telepített és jelenleg is működő NMR készüléken végezzük. Kiindulópontnak a fibromyalgia betegséget választottuk, amelyre vonatkozóan a kvantitatív NMR analízis nagyon ritka az irodalomban. A kvantitatív NMR-analízisek minta-előkészítése/elemzési eljárása tekintetében a szérum és a vizelet, az első standardizált testfolyadék minták, valamint a betegpopulációhoz és az egészséges önkéntesekhez tartozó minták vizsgálatát tervezzük. Az NMR-spektrumban kapott csúcsok alapján a metabolitok azonosítása és ezeknek a metabolitoknak a mennyiségi meghatározása a vizsgálathoz biztosítandó szoftverrel történik.

4. A tervezett tanulmány típusa, terjedelme és terve:

   Ebben a prospektív, kétcsoportos vizsgálatban a metabolitok azonosítását az NMR-spektrumban kapott csúcsok szerint végezzük 50 klinikailag diagnosztizált fibromyalgiában szenvedő beteg és 50 egészséges önkéntes esetében, és ezen metabolitok mennyiségi meghatározását kívánjuk elvégezni a biztosítandó szoftverrel. a tanulmányhoz.

5. A vizsgálatba bevonandó betegek és önkéntesek száma, képzettségük és a kiválasztás indoklása:

   A vizsgálatokat 2024. január 1. és 2024. december 1. között 50, fibromyalgiával diagnosztizált, 18-65 év közötti, a vizsgálók beválasztási és kizárási kritériumainak megfelelő pácienssel és 50 egészséges önkéntessel végzik. A tanulmány előzetes teljesítményelemzését a "G. Power-3.1.9.2" program. Átlagok a számításokban: Wilcoxon singed-rank teszt (egy mintaeset) hatásméret 0,50, alfa 0,05, teljesítmény 0,90, csoportok száma 1, mérések száma: 2, a teljes mintát 38-ra számoltuk. Összesen 38 beteg bevonását tervezték a vizsgálatba

6. Az elemzendő paraméterek:

   Citrát, izocitrát, alfa ketoglutarát, szukcinil CoA, fumarát, malát, glutamát, G-6 PD, foszfoglükonát, gliceraldehid 3 P és oxálacetát szint mérése NMR technikával

7. Hol és ki ellenőrzi a paramétereket: A vizsgálatot Dr. Hatice Kübra Aşık szakorvos végzi a Beykent Privát Kórház Fizikai Orvostudományi és Rehabilitációs Klinikájának ambulanciáján. Dr. Hatice Kübra Aşık és a biokémiai vizsgálatokat Prof. Dr. Yıldız Atamer végzi a Beykent Magánkórház Biokémiai Osztályán.

8. A vizsgálatban használandó paraméterek közül melyek rutinszerűek az adott betegségcsoportban, és melyek jellemzőek a vizsgálatra:

   A citrát-, izocitrát-, alfa-ketoglutarát-, szukcinil-CoA-, fumarát-, malát-, glutamát-, G-6 PD-, foszfoglükonát-, gliceraldehid-3P- és oxálacetát-szint mérése NMR-technikával ennél a betegségnél nem rutinszerű, de tudományos kutatási célból ebben a csoportban tanulmányozni fogják.

9. A munka tervezett időtartama, kezdési és befejezési dátuma: 2024. március 1. - 2024. december 1.

10. Bevételi, kizárási és visszavonási kritériumok:

    Bevételi kritériumok:

    18-65 éves nőbetegek Fibromialgiás klinikai panaszokkal (elterjedt fájdalom, gyengeség, fáradtság, alvászavarok, szorongás, mozgáskorlátozottság stb.) a járóbeteg-szakrendelésre jelentkező betegek körében

    Kizárási feltételek:

    Vírusos vagy bakteriális fertőzések, Szisztémás betegségek (diabetes mellitus, magas vérnyomás, krónikus veseelégtelenség, hypo-thyreosis) Antidepresszánst vagy gyógyszeres kezelést szedő betegek, Rendellenes laboratóriumi eredményekkel (vörösvértest-ülepedés, biokémiai vagy szerológiai paraméterek és pajzsmirigyfunkciós vizsgálatok), Dohányzók és alkoholfogyasztók, Reumás ízületi gyulladásban és szisztémás lupus erythematosusban szenvedő betegek voltak kizárva.

    Akik daganatos kezelésben részesültek

11. A vizsgálat befejezésének feltételei: A vizsgálatot a vizsgálathoz szükséges 50 beteg és 50 egészséges önkéntes befejezése után tervezzük befejezni.
12. A kutatás eredményeként nyerendő adatok értékelésénél az alkalmazandó statisztikai módszerek:

IBM SPSS (Statistical Package for the Social Sciences) Statistics for Windows, 25.0 verzió. Armonk, NY: IBM Corp. kerül felhasználásra. Az adatok leíró statisztikájában a paraméteres teszteknél az átlag és a szórás értékeket kell használni; medián értékeket, minimum és maximum értékeket kell használni a nem paraméteres tesztekben.

A változók eloszlását Kolmogorov-Smirnov teszttel ellenőrizzük. A normál eloszlású ismételt mérésekhez a páros t-próbát, míg a nem normális eloszlású adatokhoz Wilcoxon tesztet használunk. Az eredményeket 95%-os konfidenciaintervallumban értékeljük, és a p<0,05 statisztikai szignifikanciaként definiálható.

1. Malatji BG, Meyer H, Mason S és mtsai. Kiválasztott betegek és kontrollok NMR metabolomikai vizsgálatai a fibromyalgia szindróma diagnosztikai biomarker profilja alapján. BMC Neurology (2017), 17:88
2. Hsu W-H, Lee C-H, Chao Y-M és mtsai. A szérum és a vizelet ASIC3-függő metabolomikus profilja fibromyalgia egérmodellben Scientific Reports, (2019), 9:12123.
3. Clos-Garcia M, Andrés-Marin N, Fernández-Eulate G és munkatársai. A bél mikrobiom és a szérum metabolom elemzése molekuláris biomarkereket és megváltozott glutamát metabolizmust azonosít a fibromyalgiában. EBioMedicine (2019), 46:499-511.
4. Hackshaw KV, Aykas DP, Sigurdson GT és társai. Metabolikus ujjlenyomat a fibromyalgia és más reumatológiai rendellenességek diagnosztizálására. J. Biol. Chem. (2019), 294(7):2555-2568.
5. Hsu W-H, Han D-S, Ku W-C, et.al. Sng és fájdalom fenotípusok metabolikus és proteomikai jellemzése fibromyalgiában. Eur J Pain, (2022), 26:445-462.
6. Victoria Menzies, Angela Starkweather, Yingwei Yao és mások. Metabolikus különbségek fibromyalgiában szenvedő és nem szenvedő nőknél. Clin Transl. Sci (2020) 13, 67-77.
7. Bal SH, Budak F. Overview of Genomics, Proteomics Concepts and Application Areal Journal of Uludag University Faculty of Medicine, 39 (1)65-69, 2013.
8. Başaran E, Aras S, Cansaran-Duman D. General Outlook and Applications of Genomics, Proteomics and Metabolomics.Turkish Journal of Hygiene and Experimental Biology 2010; 67 (2): 85-96.
9. Dogan HO. Céltalan anyagcsere-elemzés. Sivas Biokémiai Napok, 2016. november 2-5.
10. Marques AP, Santo ASE, Berssaneti AA, Matsutani LA, Yuan SLK. A fibromyalgia prevalenciája: irodalmi áttekintés frissítése. Rev Bras Reumatol. 2017;57(4):356-363.
11. Macfarlane GJ, Kronisch C, Dean LE, Atzeni F, Häuser W, Flub E és mások. Az EULAR felülvizsgált ajánlásai a fibromyalgia kezelésére. Ann Rheum Dis. 2017;76(2):318-328.