Profilazione metabolomica basata sulla risonanza magnetica nucleare nei pazienti con fibromialgia

1. Nome completo dello studio: Profilazione metabolomica basata sulla risonanza magnetica nucleare nei pazienti con fibromialgia

2. Scopo e importanza dello studio (obiettivo primario, obiettivi secondari, se presenti):

   Determinazione e quantificazione dei metaboliti e delle attività enzimatiche mediante NMR in pazienti con fibromialgia, variazioni dei valori di citrato, isocitrato, alfa chetoglutarato, alfa chetoglutarato, succinil CoA, fumarato, malato, glutammato, G-6 PD, fosfogluconato, gliceraldeide 3 P e ossalacetato, in particolare nel metabolismo energetico in questi pazienti e verrà valutata la loro utilità clinica.

3. Benefici attesi e rischi della ricerca:

   La fibromialgia è definita come una sindrome cronica di causa sconosciuta caratterizzata da dolore corporeo diffuso, affaticamento, disturbi del sonno, compromissione del funzionamento cognitivo e ansia, e le possibili cause includono fattori genetici, neurologici, psicologici, legati al sonno e immunologici. La malattia è 6-9 volte più comune nelle donne. La diagnosi di fibromialgia, definita come una vera e propria sindrome sin dalla pubblicazione dei criteri di classificazione dell'American College of Rheumatology (ACR) nel 1990, è difficile a causa della soggettività dei sintomi, del fatto che la valutazione si basa sul paziente rapporti e la mancanza di test diagnostici oggettivi per confermare la diagnosi. I criteri diagnostici per la fibromialgia, descritta per la prima volta nel 19° secolo e che è la malattia reumatica più comune dopo l'artrosi, sono in costante cambiamento. Oltre alla difficoltà nella diagnosi della malattia, la fisiopatologia non è completamente compresa e non è stato determinato un obiettivo specifico per il trattamento.

   Il numero di studi metabolomici nelle analisi del siero e delle urine di pazienti con fibromialgia è limitato e per colmare questa lacuna, utilizzeremo il dispositivo NMR Bruker 500 MHertz con un team esperto per esaminare la determinazione e la quantificazione dei metaboliti, le attività enzimatiche e soprattutto il metabolismo energetico in Pazienti con fibromialgia. Pertanto, verrà studiato se esiste una predisposizione a malattie degenerative o proliferative dovute all'accelerazione o alla diminuzione del metabolismo energetico nei pazienti con fibromialgia. Secondo la nostra revisione della letteratura, non ci sono studi che indagano insieme sia gli enzimi che i metaboliti nei pazienti con fibromialgia.

   Nel lavoro pubblicato dai ricercatori, la NMR viene spesso utilizzata per l'analisi della struttura. La NMR quantitativa (qNMR), d'altra parte, è in fase di sviluppo per espandere la gamma di metaboliti che può rilevare nei fluidi corporei (per catturare basse concentrazioni di sostanze). La qNMR è iniziata con studi molto vecchi e le sottotecniche vengono ottimizzate per fornire un'elevata sensibilità. Con lo sviluppo della tecnologia, questo spettro si espanderà e in futuro sarà possibile determinare centinaia di metaboliti utilizzando un unico riferimento. Sebbene le apparecchiature NMR siano disponibili in un numero limitato di università nel nostro paese, abbiamo stabilito che non esiste alcun gruppo che lavora per l'analisi quantitativa come risultato della nostra ricerca. Il nostro obiettivo è mettere in pratica le nostre conoscenze teoriche con l'esperienza e la conoscenza dei docenti della Facoltà di Medicina dell'Università Bezmi Alem Vakıf all'interno del nostro progetto.

   Come punto di partenza per i nostri studi qNMR, abbiamo scelto la fibromialgia, dove il numero di campioni giornalieri che raggiungono il nostro ospedale è piuttosto elevato. Inoltre, abbiamo riscontrato che gli studi clinici sull’argomento sono piuttosto limitati. In questo senso, i ricercatori sono unici in quanto forniranno un profilo metabolico olistico nei pazienti con fibromialgia e forniranno dati sugli adulti.

   Il problema più importante con la tecnica NMR sono gli alti costi durante l'installazione del dispositivo, quindi con bassi costi operativi, le analisi desiderate possono essere eseguite facilmente ed a basso costo in presenza di materiali di riferimento e software necessari per l'analisi dei dati. Il nostro obiettivo è eseguire la quantificazione dei metaboliti nei fluidi corporei sul dispositivo NMR, che è già stato installato ed è attualmente in funzione presso l'Università Bezmi Alem Vakıf. Come punto di partenza, abbiamo scelto la fibromialgia, per la quale l'analisi NMR quantitativa è molto rara in letteratura. In termini di procedura di preparazione/analisi dei campioni per analisi NMR quantitative, si prevede di studiare siero e urina, che sono i primi campioni di fluidi corporei standardizzati, e campioni appartenenti alla popolazione di pazienti e volontari sani. In base ai picchi ottenuti nello spettro NMR, verrà effettuata l'identificazione dei metaboliti e la quantificazione di questi metaboliti verrà eseguita con il software fornito per lo studio.

4. Tipo, ambito e progettazione dello studio pianificato:

   In questo studio prospettico a due gruppi, l'identificazione dei metaboliti verrà eseguita in base ai picchi ottenuti nello spettro NMR in 50 pazienti con fibromialgia clinicamente diagnosticata e 50 volontari sani e si prevede di eseguire la quantificazione di questi metaboliti con il software fornito per lo studio.

5. Numero di pazienti e volontari da includere nello studio, loro qualifiche e logica della selezione:

   Gli investigatori saranno condotti tra il 1 gennaio 2024 e il 1 dicembre 2024 con 50 pazienti con diagnosi di fibromialgia di età compresa tra 18 e 65 anni che soddisfano i criteri di inclusione ed esclusione dei ricercatori e 50 volontari sani. L'analisi di potenza preventiva dello studio è stata eseguita utilizzando il test "G. Programma Power-3.1.9.2". Medie nei calcoli: test dei ranghi singoli di Wilcoxon (un caso campione) dimensione dell'effetto 0,50, alfa 0,05, potenza 0,90, numero di gruppi 1, numero di misure: 2, il campione totale è stato calcolato come 38. Si prevedeva di includere nello studio un totale di 38 pazienti

6. Parametri da analizzare:

   Misurazione dei livelli di citrato, isocitrato, alfa chetoglutarato, succinil CoA, fumarato, malato, glutammato, G-6 PD, fosfogluconato, gliceraldeide 3 P e ossalacetato mediante tecnica NMR

7. Dove e da chi verranno controllati i parametri: lo studio sarà condotto dallo specialista Dr. Hatice Kübra Aşık nell'ambulatorio della clinica di medicina fisica e riabilitazione dell'ospedale privato di Beykent. La Dott.ssa Hatice Kübra Aşık e i test biochimici saranno eseguiti dal Prof. Dott. Yıldız Atamer presso il Dipartimento di Biochimica dell'Ospedale privato di Beykent.

8. Quali dei parametri da utilizzare nello studio sono di routine per quel gruppo di malattie e quali sono specifici dello studio:

   La misurazione dei livelli di citrato, isocitrato, alfa chetoglutarato, succinil CoA, fumarato, malato, glutammato, G-6 PD, fosfogluconato, gliceraldeide 3 P e ossalacetato mediante tecnica NMR non è di routine per questa malattia ma sarà studiata in questo gruppo per scopi di ricerca scientifica

9. Durata prevista dei lavori, date di inizio e fine: 1 marzo 2024 - 1 dicembre 2024

10. Criteri di inclusione, esclusione e ritiro:

    Criteri di inclusione:

    Pazienti di sesso femminile di età compresa tra 18 e 65 anni Pazienti con disturbi clinici di fibromialgia (dolore diffuso, debolezza, affaticamento, problemi del sonno, ansia, limitazione dei movimenti, ecc.) tra i pazienti che si sono rivolti all'ambulatorio

    Criteri di esclusione:

    Infezioni virali o batteriche, Malattie sistemiche (diabete mellito, ipertensione, insufficienza renale cronica, ipoipertiroidismo) Pazienti che assumono antidepressivi o farmaci, Pazienti con risultati di laboratorio anomali (velocità di eritrosedimentazione, parametri biochimici o sierologici e test di funzionalità tiroidea), Fumatori e Sono stati esclusi gli utilizzatori di alcol, i pazienti con artrite reumatica e lupus eritematoso sistemico.

    Coloro che hanno ricevuto cure per il tumore

11. Criteri di conclusione dello studio: si prevede che lo studio verrà terminato dopo il completamento dei 50 pazienti e dei 50 volontari sani necessari per lo studio.
12. Nella valutazione dei dati da ottenere a seguito della ricerca i metodi statistici da utilizzare:

IBM SPSS (pacchetto statistico per le scienze sociali) Statistics per Windows, versione 25.0. Armonk, NY: verrà utilizzata IBM Corp. Nella statistica descrittiva dei dati verranno utilizzati valori di media e deviazione standard nei test parametrici; i valori mediani, i valori minimo e massimo verranno utilizzati nei test non parametrici.

La distribuzione delle variabili sarà verificata mediante il test di Kolmogorov-Smirnov. Il test t per dati appaiati verrà utilizzato per misurazioni ripetute con distribuzione normale, mentre il test di Wilcoxon verrà utilizzato per dati distribuiti non normalmente. I risultati saranno valutati con un intervallo di confidenza del 95% e p<0,05 è definito come significatività statistica.

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