Niveaux d'IL-6, d'IL-17 et d'IL-35 dans le liquide créviculaire gingival de patients atteints de parodontite et de témoins sains

L'IL-35 est une molécule de signalisation de nouvelle génération appartenant à la famille des cytokines IL 12. Il est produit par les cellules T-régulatrices (Treg) constituées de la chaîne Α (p35). Des études récentes ont montré que l'IL-35 est une cytokine anti-inflammatoire. Il supprime la réponse immunitaire par l'expansion des Treg et la suppression de la croissance des cellules Th17.

L'interleukine-17 (IL-17) est une cytokine pro-inflammatoire sécrétée par les cellules T-17. C'est un puissant activateur des neutrophiles car il régule l'expression du G-CSF et des récepteurs et des chimiokines. Son niveau accru a été documenté dans la parodontite chronique. En présence de P. gingivalis, une augmentation de l'IL-17 et de l'IL-23 est observée. Bien que l'infection parodontale (P. gingivalis) induit l'IL-17, un rôle protecteur de l'IL-17 contre la résorption osseuse a également été suggéré. IL-17 produit IL-6, IL-8 en affectant les fibroblastes.

L'IL-6 est produite par de nombreuses cellules en réponse au LPS et a des rôles à la fois pro-inflammatoires et anti-inflammatoires. Il est impliqué dans les processus inflammatoires, régénératifs, métaboliques et neuronaux. Le taux d'IL-6 a été étudié dans différentes études sur le sérum, la salive et les fluides du sillon gingival. Des études avec des niveaux accrus d'IL-6 dans le liquide du sillon gingival dans la parodontite chronique et des études avec des diminutions significatives du sérum après un traitement non chirurgical de la parodontite chronique ont été rapportées. Cependant, il existe également des études qui ne montrent pas de différence significative dans les niveaux de diverses cytokines dans la salive des parodontites chroniques et des individus sains.

Les mesures cliniques comprennent l'indice de plaque (PI), l'indice gingival (GI), le saignement au sondage (BOP), la profondeur de sondage (PD), le niveau d'attache clinique (CAL), la position de la marge gingivale (DKK) et les paramètres de mobilité. Les mesures seront enregistrées à partir de six points différents de toutes les dents par le même investigateur avec une sonde parodontale de type Williams (Hu-Friedy, USA).

1. Groupes témoins sains :

   Composé d'individus avec une gencive cliniquement saine sur un parodonte intact qui avaient un score BOP inférieur à 10 % et une PD ≤ 3 mm, n'ont montré aucune perte d'attache ou perte osseuse radiographique.

2. Groupes de parodontite de grade B-C / stade III-IV :

Grade B : taux de progression modéré Une perte osseuse modérée est observée par rapport au biofilm et le % de perte osseuse radiculaire/âge de 0,25 à 1,0 est déterminé comme grade B.

Stade III : Parodontite sévère avec potentiel de perte de dents supplémentaire Composée d'individus avec AL interdentaire ≥ 5 mm, perte osseuse radiographique s'étendant jusqu'au tiers moyen ou apical de la racine, PD ≥ 6 mm et perte de dents due à une parodontite ≤ 4.

Grade C : taux de progression rapide Une perte osseuse rapide est observée par rapport au biofilm et le % de perte osseuse radiculaire/âge > 1,0 est déterminé comme grade C.

Stade IV : parodontite avancée avec perte de dents importante et potentiel de perte de dentition Composé d'individus avec AL interdentaire ≥ 5 mm, perte osseuse radiographique s'étendant jusqu'au tiers moyen ou apical de la racine, PD ≥ 6 mm et perte de dents due à une parodontite de ≥ 5. Nécessité d'une rééducation complexe en raison de : Dysfonctionnement masticatoire, Traumatisme occlusal secondaire (degré de mobilité dentaire ≥2) Défaut sévère de la crête, effondrement de la morsure, dérive, évasement. Moins de 20 dents restantes (10 paires opposées)

Groupe Parodontite :

• 18-65 ans
• Ne pas avoir de maladie systémique (maladies qui n'affectent pas l'état parodontal)
• Non fumeur
• N'ont pas reçu de traitement antibiotique et/ou utilisé de médicaments immunosuppresseurs au cours des 6 derniers mois
• N'avoir reçu aucun traitement parodontal auparavant
• Pas de statut de grossesse et d'allaitement
• Ne pas utiliser de médicaments régulièrement
• Avoir au moins 20 dents
• Ceux qui ont une maladie parodontale de stade B-C stade III-IV selon la classification 2017 des maladies et affections parodontales et péri-implantaires

Groupe sain :

Chez les patients qui ont postulé à la Faculté de médecine dentaire de l'Université d'Istanbul, Département de parodontologie, les personnes en bonne santé parodontale qui ne répondent pas aux critères de la maladie ci-dessus, qui n'ont aucun antécédent de parodontite, seront incluses dans l'étude.

Des échantillons de bandes de papier (Periopaper®, Proflow Inc., Amitiyville, NY, USA) placés dans la crevicule gingivale seront placés dans des tubes eppendorf pour examen en laboratoire au cours de la session 1 semaine après que l'état parodontal exact aura été déterminé par des mesures parodontales. Les échantillons seront prélevés dans les zones avec la profondeur de sondage la plus profonde. Lors de l'obtention d'échantillons de fluide créviculaire gingival, la zone sera isolée avec des tampons de coton, la plaque dentaire microbienne sur la dent sera éliminée avec des boulettes de coton et un processus de séchage à court terme sera effectué avec un désodorisant à une distance de 20 cm à un angle droit. Ensuite, des bandes de papier absorbant standard de 2x8 mm seront placées des régions proximales à l'entrée de la crevicule avec une légère résistance et laissées pendant 30 secondes, puis chaque bande de papier sera placée dans le même tube eppendorf pour chaque patient et stockée à -80 °C. (Congélateur scientifique ultra basse température du Nouveau-Brunswick). Des échantillons seront prélevés sur 4 dents chez chaque patient. En cas de saignement dans la crevicule gingivale lors du prélèvement de l'échantillon, la bande de papier sera jetée. Les échantillons seront isolés de la crevicule gingivale à l'aide de bandes de papier absorbant (Periopaper®, Proflow Inc., Amitiyville, NY, USA) et des analyses biochimiques seront effectuées dans les échantillons par la méthode ELISA conformément aux protocoles inclus dans le trousse.

Les données descriptives obtenues dans l'étude seront données sous forme de moyenne ± écart type (médiane (min-max) pour chaque groupe. Test de l'hypothèse de normalité avec des tests d'hypothèses, les tests d'hypothèses seront analysés avec les tests de Kolmogorov - Smirnov ou Shapiro-Wilk.

Les différences moyennes pour chaque groupe dans les comparaisons pour les deux groupes dans les analyses ; test t dans des groupes indépendants dans les cas où les données montrent une distribution normale, dans les cas où les données ne montrent pas de distribution normale ; Le test U de Mann-Whitney sera utilisé.

Dans plus de deux groupes, One Way ANOVA sera utilisé dans les cas où les données sont normalement distribuées ; Des comparaisons multiples seront faites avec le test de Tukey. Dans les cas où les données ne montrent pas de distribution normale, le test Kruskal-Wallis H sera analysé et des comparaisons multiples seront analysées avec la méthode S-N-K non paramétrique (test de Student Newman-Keuls). La signification statistique sera considérée comme p < 0,05 et dans les deux sens.

Selon la classification des maladies et affections parodontales et péri-implantaires de 2017, une différence moyenne de 11 unités entre les résultats obtenus à partir des biomarqueurs d'interleukine dans le groupe d'individus atteints de parodontite de stade III-IV de grade B-C et les individus sains, et un échantillon minimal pour trouver la taille significative estimée de l'écart type de 15 unités (en supposant une erreur de type I de 5 %, une erreur de type II de 20 % en supposant une puissance de 0,80) : 30 personnes pour chaque groupe. Compte tenu des mauvais échantillons, 30+30 personnes seront prises dans chaque groupe (30 témoins sains, 30 cas de parodontite).