IL-6-, IL-17- en IL-35-waarden in de gingivale creviculaire vloeistof van patiënten met parodontitis en gezonde controles

IL-35 is een signaalmolecuul van de volgende generatie dat behoort tot de IL 12-cytokinefamilie. Het wordt geproduceerd door T-regulerende cellen (Treg) bestaande uit de Α-keten (p35). Recente studies hebben aangetoond dat IL-35 een ontstekingsremmend cytokine is. Het onderdrukt de immuunrespons door Treg-expansie en onderdrukking van Th17-celgroei.

Interleukine-17 (IL-17) is een pro-inflammatoir cytokine dat wordt uitgescheiden door T-17-cellen. Het is een krachtige activator van neutrofielen omdat het G-CSF en receptor- en chemokine-expressie reguleert. Het verhoogde niveau is gedocumenteerd bij chronische parodontitis. In aanwezigheid van P. gingivalis wordt een toename van IL-17 en IL-23 waargenomen. Hoewel parodontitis (P. gingivalis) IL-17 induceert, is ook een beschermende rol van IL-17 tegen botresorptie gesuggereerd. IL-17 produceert IL-6, IL-8 door fibroblasten te beïnvloeden.

IL-6 wordt door veel cellen geproduceerd als reactie op LPS en heeft zowel ontstekingsbevorderende als ontstekingsremmende rollen. Het is betrokken bij inflammatoire, regeneratieve, metabolische en neurale processen. Het IL-6-gehalte is onderzocht in verschillende onderzoeken in serum, speeksel en tandvleessulcusvloeistoffen. Studies met verhoogde IL-6-spiegels in de gingivale groefvloeistof bij chronische parodontitis en studies met significante serumdalingen na niet-chirurgische behandeling van chronische parodontitis zijn gerapporteerd. Er zijn echter ook onderzoeken die geen significant verschil laten zien in de niveaus van verschillende cytokines in het speeksel van chronische parodontitis en gezonde individuen.

Klinische metingen omvatten Plaque Index (PI), Gingival Index (GI), Bleeding on Probing (BOP), Probing Depth (PD), Clinical Attachment Level (CAL), Gingival Margin Position (DKK) en mobiliteitsparameters. Metingen zullen worden geregistreerd vanaf zes verschillende punten van alle tanden door dezelfde onderzoeker met een Williams-type parodontale sonde (Hu-Friedy, VS).

1. Gezonde controlegroepen:

   Bestond uit personen met klinisch gezond tandvlees op een intact parodontium die een BOP-score van minder dan 10% en PD≤3 mm hadden, geen aanhechtingsverlies of radiografisch botverlies vertoonden.

2. Graad B-C / Stadium III-IV parodontitisgroepen:

Graad B: matige progressie Er wordt matig botverlies waargenomen in vergelijking met biofilm en % wortelbotverlies/leeftijd 0,25 tot 1,0 wordt bepaald als graad B.

Stadium III: Ernstige parodontitis met mogelijk extra tandverlies Bestond uit personen met interdentale AL ≥5 mm, radiografisch botverlies dat zich uitstrekt tot het middelste of apicale derde deel van de wortel, PD≥6 mm en tandverlies als gevolg van parodontitis van ≤4.

Graad C: Snelle progressie Er wordt snel botverlies waargenomen in vergelijking met biofilm en % wortelbotverlies/leeftijd >1,0 wordt bepaald als graad C.

Stadium IV: Gevorderde parodontitis met uitgebreid tandverlies en kans op verlies van gebit Bestaat uit personen met interdentale AL ≥ 5 mm, radiologisch botverlies dat zich uitstrekt tot het middelste of apicale derde deel van de wortel, PD ≥ 6 mm en tandverlies als gevolg van parodontitis van ≥ 5. Behoefte aan complexe revalidatie vanwege: kauwdisfunctie, secundair occlusaal trauma (tandmobiliteitsgraad ≥2) Ernstig randdefect, instorting van de beet, afdrijven, affakkelen. Minder dan 20 resterende tanden (10 tegenover elkaar liggende paren)

Groep parodontitis:

• 18-65 jaar oud
• Geen systemische ziekte hebben (ziekten die geen invloed hebben op de parodontale status)
• Niet-roker
• U heeft de afgelopen 6 maanden geen antibioticabehandeling gehad en/of geen immunosuppressieve medicatie gebruikt
• Heb nog niet eerder een parodontale behandeling ondergaan
• Geen status zwangerschap en borstvoeding
• Regelmatig geen medicatie gebruiken
• Minstens 20 tanden hebben
• Degenen met graad B-C stadium III-IV parodontitis volgens de classificatie van parodontale en peri-implantaire ziekten en aandoeningen van 2017

Gezonde groep:

Bij patiënten die zich hebben aangemeld bij de Faculteit der Tandheelkunde van de Universiteit van Istanbul, Afdeling Parodontologie, zullen parodontaal gezonde personen die niet voldoen aan de bovenstaande ziektecriteria, die op geen enkele manier een voorgeschiedenis van parodontitis hebben, in het onderzoek worden opgenomen.

Monsters van papieren strips (Periopaper®, Proflow Inc., Amitiyville, NY, VS) die in de gingivale creviculaire zijn geplaatst, worden in eppendorfbuisjes geplaatst voor laboratoriumonderzoek in de sessie 1 week nadat de exacte parodontale status is bepaald door parodontale metingen. Monsters worden genomen uit gebieden met de diepste sonderingsdiepte. Tijdens het nemen van monsters van gingivale creviculaire vloeistof wordt het gebied geïsoleerd met wattenschijfjes, wordt de microbiële tandplak op de tand verwijderd met wattenbolletjes en wordt een kort droogproces uitgevoerd met een luchtverfrisser vanaf een afstand van 20 cm bij een rechte hoek. Vervolgens worden standaard absorberende papieren stroken van 2x8 mm met lichte weerstand van de approximale gebieden naar de ingang van de creviculaire ruimte geplaatst en gedurende 30 seconden gelaten, waarna elke papieren strook voor elke patiënt in dezelfde Eppendorf-buis wordt geplaatst en bij -80 wordt bewaard. ° C. (New Brunswick wetenschappelijke vriezer met ultralage temperatuur). Bij elke patiënt worden monsters genomen van 4 tanden. In geval van bloeding in de tandvleesholte tijdens het afnemen van het monster, wordt de papieren strip weggegooid. De monsters worden met behulp van absorberende papieren stroken (Periopaper®, Proflow Inc., Amitiyville, NY, VS) geïsoleerd uit de gingivale creviculare en biochemische analyses worden uitgevoerd in de monsters met behulp van de ELISA-methode in overeenstemming met de protocollen die zijn opgenomen in de uitrusting.

Beschrijvende gegevens verkregen in het onderzoek zullen worden gegeven als gemiddelde ± standaarddeviatie (mediaan (min-max) voor elke groep. De normaliteitsaanname testen met hypothesetesten. Hypothesetesten worden geanalyseerd met Kolmogorov - Smirnov- of Shapiro-Wilk-testen.

De gemiddelde verschillen voor elke groep in vergelijkingen voor de twee groepen in de analyses; t-toets in onafhankelijke groepen in gevallen waarin de gegevens een normale verdeling laten zien, in gevallen waarin de gegevens geen normale verdeling laten zien; Mann-Whitney U-test zal worden gebruikt.

In meer dan twee groepen wordt One Way ANOVA gebruikt in gevallen waarin de gegevens normaal verdeeld zijn; Er zullen meerdere vergelijkingen worden gemaakt met de Tukey-test. In gevallen waarin de gegevens geen normale verdeling laten zien, wordt de Kruskal-Wallis H-test geanalyseerd en worden meerdere vergelijkingen geanalyseerd met de niet-parametrische SNK-methode (Student Newman-Keuls-test). Statistische significantie wordt beschouwd als p<0,05 en in twee richtingen.

Volgens de classificatie van parodontale en peri-implantaire ziekten en aandoeningen van 2017, een gemiddeld verschil van 11 eenheden tussen de resultaten verkregen van interleukine-biomarkers in de groep personen met graad B-C stadium III-IV parodontitis en gezonde personen, en een minimale steekproef om vind de geschatte significante grootte van de standaarddeviatie van 15 eenheden (uitgaande van Type I-fout 5%, Type II-fout 20% uitgaande van Power 0,80): 30 mensen voor elke groep. Rekening houdend met de verkeerde monsters, zullen 30+30 mensen in elke groep worden opgenomen (30 gezonde controles, 30 gevallen van parodontitis).