IL-6-, IL-17- og IL-35-nivåer i gingival crevicular væske hos pasienter med periodontitt og friske kontroller

IL-35 er et neste generasjons signalmolekyl som tilhører IL 12 cytokinfamilien. Det produseres av T-regulatoriske celler (Treg) som består av Α-kjeden (p35). Nyere studier har vist at IL-35 er et anti-inflammatorisk cytokin. Det undertrykker immunresponsen gjennom Treg-ekspansjon og undertrykkelse av Th17-cellevekst.

Interleukin-17 (IL-17) er et proinflammatorisk cytokin som skilles ut av T-17-celler. Det er en potent aktivator av nøytrofiler ettersom den regulerer G-CSF og reseptor- og kjemokinekspresjon. Det økte nivået er dokumentert ved kronisk periodontitt. I nærvær av P. gingivalis observeres en økning i IL-17 og IL-23. Selv om periodontal infeksjon (P. gingivalis) induserer IL-17, en beskyttende rolle til IL-17 mot benresorpsjon har også blitt foreslått. IL-17 produserer IL-6, IL-8 ved å påvirke fibroblaster.

IL-6 produseres av mange celler som respons på LPS og har både pro-inflammatoriske og anti-inflammatoriske roller. Det er involvert i inflammatoriske, regenerative, metabolske og nevrale prosesser. IL-6-nivået er undersøkt i forskjellige studier i serum, spytt og gingival sulcusvæsker. Det er rapportert studier med økte IL-6-nivåer i gingivalsporvæsken ved kronisk periodontitt og studier med signifikant reduksjon i serum etter ikke-kirurgisk behandling av kronisk periodontitt. Det finnes imidlertid også studier som ikke viser signifikant forskjell i nivåene av ulike cytokiner i spyttet til kronisk periodontitt og friske individer.

Kliniske målinger inkluderer Plaque Index (PI), Gingival Index (GI), Bleeding on Probing (BOP), Probing Depth (PD), Klinisk festenivå (CAL), Gingival marginposisjon (DKK) og mobilitetsparametere. Målinger vil bli registrert fra seks forskjellige punkter på alle tenner av samme etterforsker med en Williams-type periodontal probe (Hu-Friedy, USA).

1. Friske kontrollgrupper:

   Bestod av individer med klinisk sunn gingiva på intakt periodontium som hadde en BOP-score på mindre enn 10 % og PD≤3 mm, viste ingen tap av feste eller radiografisk bentap.

2. Grad B-C / Stadium III-IV periodontittgrupper:

Grad B: Moderat progresjonshastighet Moderat bentap er observert sammenlignet med biofilm og % rotbeintap/alder 0,25 til 1,0 bestemmes som grad B.

Stadium III: Alvorlig periodontitt med potensial for ytterligere tanntap Bestod av individer med interdental AL ≥5 mm, radiografisk beintap som strekker seg til midten eller apikale tredjedel av roten, PD≥6 mm og tanntap på grunn av periodontitt på ≤4.

Grad C: Rask progresjonshastighet Raskt bentap er observert sammenlignet med biofilm og % rotbentap/alder >1,0 bestemmes som grad C.

Stadium IV: Avansert periodontitt med omfattende tanntap og potensial for tap av tannsett Bestod av individer med interdental AL ≥5 mm, radiografisk beintap som strekker seg til midtre eller apikale tredjedel av roten, PD≥6 mm og tanntap på grunn av periodontitt på ≥ 5. Behov for kompleks rehabilitering på grunn av: Tyggedysfunksjon, Sekundært okklusalt traume (tannmobilitetsgrad ≥2) Alvorlig ryggdefekt, Bittkollaps, drifting, fakling. Mindre enn 20 gjenværende tenner (10 motstående par)

Periodontitt gruppe:

• 18-65 år
• Ikke ha noen systemisk sykdom (sykdommer som ikke påvirker periodontalstatus)
• Ikke-røyker
• Har ikke fått antibiotikabehandling og/eller brukt immundempende medisin de siste 6 månedene
• Har ikke fått noen periodontal behandling før
• Ingen graviditets- og ammestatus
• Bruker ikke medisiner regelmessig
• Å ha minst 20 tenner
• De med grad B-C stadium III-IV periodontal sykdom i henhold til 2017-klassifiseringen av periodontale og periimplantatsykdommer og tilstander

Sunn gruppe:

Hos pasienter som søkte til Istanbul University Fakultet for odontologi, Institutt for periodontologi, vil periodontalt friske individer som ikke oppfyller de ovennevnte sykdomskriteriene, som ikke har en historie med periodontitt på noen måte, bli inkludert i studien.

Prøver av papirstrimler (Periopaper®, Proflow Inc., Amitiyville, NY, USA) plassert i tannkjøttspalten vil bli plassert i eppendorf-rør for laboratorieundersøkelse i økten 1 uke etter at den nøyaktige periodontale status er bestemt ved periodontale målinger. Det vil bli tatt prøver fra områder med den dypeste sonderingsdybden. Under innhenting av tannkjøttprøver vil området isoleres med bomullspads, det mikrobielle tannplakket på tannen fjernes med bomullspellets, og det vil bli utført en kortvarig tørkeprosess med luftfrisker fra en avstand på 20 cm kl. en rett vinkel. Deretter vil standard absorberende 2x8 mm papirstrimler plasseres fra de omtrentlige områdene til inngangen til crevicularen med lett motstand og la stå i 30 sekunder, deretter vil hver papirstrimmel plasseres i samme eppendorf-rør for hver pasient og lagres ved -80 °C. (New Brunswick scientific ultra lav temperatur fryser). Det vil bli tatt prøver fra 4 tenner hos hver pasient. Ved blødning i tannkjøttspalten under prøvetaking, vil papirstrimmelen bli kastet. Prøvene vil bli isolert fra tannkjøttspalten ved hjelp av absorberende papirstrimler (Periopaper®, Proflow Inc., Amitiyville, NY, USA) og biokjemiske analyser vil bli gjort i prøvene ved hjelp av ELISA-metoden i henhold til protokollene inkludert i sett.

Beskrivende data innhentet i studien vil bli gitt som gjennomsnitt ± standardavvik (median (min-maks) for hver gruppe. Testing av normalitetsantagelsen med hypotesetesting, hypotesetesting vil bli analysert med Kolmogorov - Smirnov eller Shapiro-Wilk tester.

De gjennomsnittlige forskjellene for hver gruppe i sammenligninger for de to gruppene i analysene; t-test i uavhengige grupper i tilfeller der data viser normalfordeling, i tilfeller hvor data ikke viser normalfordeling; Mann-Whitney U-test vil bli brukt.

I mer enn to grupper vil One Way ANOVA bli brukt i tilfeller hvor dataene er normalfordelt; Flere sammenligninger vil bli gjort med Tukey-testen. I tilfeller hvor dataene ikke viser normalfordeling, vil Kruskal-Wallis H test bli analysert, og flere sammenligninger vil bli analysert med den ikke-parametriske S-N-K metoden (Student Newman-Keuls Test). Statistisk signifikans vil bli vurdert som p<0,05 og toveis.

I henhold til 2017-klassifiseringen av periodontale og periimplantatsykdommer og tilstander, er det en gjennomsnittlig forskjell på 11 enheter mellom resultatene oppnådd fra interleukin-biomarkører i gruppen av individer med grad B-C stadium III-IV periodontitt og friske individer, og en minimal prøve til finn den estimerte 15-enheter standardavvik signifikant størrelse (forutsatt Type I feil 5%, Type II feil 20% forutsatt Power 0,80): 30 personer for hver gruppe. Med tanke på feil prøver, vil 30+30 personer bli tatt inn i hver gruppe (30 friske kontroller, 30 periodontitttilfeller).