Un nouveau paramètre LIT/N qui prédit la survie des patients COVID-19 en soins intensifs

Description détaillée:

On sait que l'infection au COVID-19 déclenche un trouble inflammatoire multisystémique qui peut entraîner un éventail de symptômes cliniques (Dhama et al. 2020). Environ 20 % des patients présentent une défaillance multisystémique aiguë, y compris le SDRA, accompagnée d'un processus inflammatoire intense, qui met la vie en danger (Wang et al. 2020 ; Wu et al. 2020 ; Yang et al. 2020). Cependant, dans les cas graves de COVID-19, le nombre de lymphocytes diminue progressivement, tandis que le nombre de neutrophiles augmente progressivement (Li et al. 2020). À ce jour, quatre méta-analyses ont rapporté que les patients atteints d'une infection COVID-19 sévère ont un NLR plus élevé que ceux avec une infection COVID-19 non sévère (Zheng et al. 2020, Chan & Rout. 2020 ; Ghahramani et al. 2020 ; Lagunas-Rangel et al. 2020). Il n'y a pas de niveau de seuil objectif absolu rapporté pour le moment où la NLR progresse de proche de la normale à modérée à sévère.

Les neutrophiles fonctionnent en utilisant un certain nombre de mécanismes différents, notamment la chimiotaxie, la phagocytose, la libération d'espèces réactives de l'oxygène (ROS) et de protéines granulaires, ainsi que la production et la libération de cytokines (Selder et al. 2017 ; Hellebrekers et al. 2018). Les neutrophiles sont soumis à une régulation environnementale complexe, ce qui peut entraîner des différences significatives dans la production de ROS (Panday et al. 2015 et Nguyen et al. 2017). Veenith et et tous ont précédemment démontré que la production de ROS dans COVID-19 est dysfonctionnelle (Veenith et al 2022, processus de publication). Malgré l'immense nombre d'études fournissant des preuves d'une réponse immunitaire innée in vivo dérégulée chez certains patients COVID-19, il est devenu évident que la mesure de la capacité fonctionnelle conservée des leucocytes (principalement des neutrophiles) à produire des ROS en réponse au phorbol-12-myristate- Le 13-acétate (PMA) dans les échantillons de sang total pourrait fournir une méthode de détection rapide en 10 minutes pour déterminer objectivement l'apparition ou l'apparition d'un COVID-19 sévère et surveiller la progression et le traitement du COVID-19. Un modèle mathématique prédictif aiderait au diagnostic et au traitement précoces du COVID-19 et permettrait aux cliniciens de hiérarchiser les patients. Par conséquent, l'analyse de la production de ROS en réponse au PMA dans la comparaison de la pneumonie COVID-19 avec des sujets sains peut révéler cette hypothèse.

Méthode:

L'étude a été menée avec l'approbation du comité d'éthique à l'hôpital de l'unité de soins intensifs (USI). La population de patients était composée de patients admis à l'USI en raison d'une pneumonie au COVID-19 ; la population de volontaires en bonne santé était composée de travailleurs de la santé de l'hôpital. L'analyse a été effectuée sur des échantillons cliniques ou via un test par piqûre au doigt de volontaires sains. La production de ROS en réponse au PMA a été analysée dans les 30 minutes suivant la collecte. Le diagnostic de statut COVID a été confirmé à l'aide d'un test de réaction en chaîne par polymérase (PCR). Avec une gamme de tests hématologiques conventionnels et d'observations cliniques, le test LIT a été effectué tous les jours ou tous les deux jours jusqu'au décès ou à la sortie de l'USI.

Collecte de données:

Les patients ont été suivis depuis leur admission à l'USI jusqu'au jour de la sortie ou de la sortie de l'USI. Toutes les données ont été collectées de manière prospective sur des formulaires d'étude standardisés. Les variables de données recueillies à l'admission comprenaient les caractéristiques démographiques, le diagnostic, les comorbidités, la date de positivité du test PCR, les symptômes de la COVID-19, la gravité de la COVID-19 (selon la classification de l'Organisation mondiale de la santé (OMS)), le type de traitement, l'utilisation de la ventilation et type de ventilation, rapport pression artérielle partielle en oxygène/fraction d'oxygène inspiré (PaO2/FiO2), utilisation d'antibiotiques, protéine C réactive (CRP), nombre de neutrophiles, nombre total de leucocytes. À l'admission, la gravité du patient a été évaluée avec APACHE II et le score SOFA (Severity of Organ Failure Assessment). Pendant le séjour aux soins intensifs, les patients ont été évalués pour le développement d'une septicémie ou d'un choc septique. Les signes vitaux le jour où le test LIT a été effectué ont également été enregistrés. Les paramètres de résultat de l'unité de soins intensifs tels que la durée de la ventilation mécanique, la durée du séjour en USI, la durée de l'hospitalisation et la mortalité ont également été évalués. La CRP, la numération des neutrophiles et la numération leucocytaire totale ont été effectuées le jour où le test LIT a été effectué sur les volontaires sains.

Mesures de production de ROS par luminomètre :

La production de ROS a été mesurée selon la méthode décrite précédemment [25-27]. En bref, des échantillons de 10 μl de sang fraîchement obtenu (obtenu par piqûre au doigt ou par ponction veineuse) ont été ajoutés à 100 microlitres de solution saline tamponnée au phosphate (PBS) contenant du phorbol 12-myristate 13-acétate (PMA; Sigma) et du luminol. La solution a été incubée pendant 10 minutes à 37,5°C. La chimiluminescence a été quantifiée après 10 minutes à l'aide d'un luminomètre portatif 3MTM (Clean-Trace, NG3) en unités de lumière relative (RLU). Les scores LIT en tant que corrélat de la fonction des neutrophiles pour chaque patient (échantillonné tous les jours ou tous les deux jours) et chaque volontaire sain (échantillonné une seule fois) ont été tracés.

Une génération anormalement élevée (hyperproduction) ou faible (hypoproduction) de ROS a été associée à des résultats cliniques indésirables. Cela soulève la possibilité que le rapport LIT™/nombre de neutrophiles (LIT/N) soit utilisé comme outil clinique prédictif.