Un nuevo parámetro LIT/N que predice la supervivencia en pacientes de UCI con COVID-19

Descripción detallada:

Se sabe que la infección por COVID-19 desencadena un trastorno inflamatorio multisistémico que puede provocar un espectro de síntomas clínicos (Dhama et al. 2020). Aproximadamente el 20 % de los pacientes presentan una falla multisistémica aguda, incluido el SDRA, acompañada de un proceso inflamatorio intenso que pone en peligro la vida (Wang et al. 2020; Wu et al. 2020; Yang et al. 2020). Sin embargo, en casos graves de COVID-19, el recuento de linfocitos disminuye progresivamente, mientras que el recuento de neutrófilos aumenta gradualmente (Li et al. 2020). Hasta la fecha, cuatro metanálisis han informado que los pacientes con infección grave por COVID-19 tienen un NLR más alto que aquellos con infección no grave por COVID-19 (Zheng et al. 2020, Chan & Rout. 2020; Ghahramani et al. 2020; Lagunas-Rangel et al. 2020). No hay un nivel de umbral objetivo absoluto informado para cuando NLR progresa de casi normal a moderado a severo.

Los neutrófilos funcionan mediante una serie de mecanismos diferentes que incluyen quimiotaxis, fagocitosis, liberación de especies reactivas de oxígeno (ROS) y proteínas granulares y la producción y liberación de citoquinas (Selder et al. 2017; Hellebrekers et al. 2018). Los neutrófilos están sujetos a una regulación ambiental compleja y esto puede resultar en diferencias significativas en la producción de ROS (Panday et al. 2015 y Nguyen et al. 2017). Veenith y otros han demostrado previamente que la producción de ROS en COVID-19 es disfuncional (Veenith et al 2022, proceso de publicación). A pesar de la inmensa cantidad de estudios que proporcionan evidencia de una respuesta inmune innata in vivo desregulada en algunos pacientes con COVID-19, se hizo evidente que la medición de la capacidad funcional retenida de los leucocitos (principalmente neutrófilos) para producir ROS en respuesta al forbol-12-miristato- El 13-acetato (PMA) en muestras de sangre total podría proporcionar un método de detección rápido de 10 minutos para determinar objetivamente el inicio o la aparición de COVID-19 grave y monitorear la progresión y el tratamiento de COVID-19. Un modelo matemático predictivo ayudaría al diagnóstico y tratamiento tempranos de COVID-19 y permitiría a los médicos priorizar a los pacientes. Por lo tanto, el análisis de la producción de ROS en respuesta a PMA en la comparación de la neumonía por COVID-19 con sujetos sanos puede revelar esta hipótesis.

Método:

El estudio se realizó con la aprobación del comité de ética en el Hospital de la Unidad de Cuidados Intensivos (UCI) La población de pacientes estuvo compuesta por pacientes que ingresaron en la UCI debido a neumonía por COVID-19; la población voluntaria sana estaba formada por trabajadores sanitarios del hospital. El análisis se realizó en muestras clínicas o mediante un ensayo de punción digital de voluntarios sanos. La producción de ROS en respuesta a PMA se analizó dentro de los 30 minutos posteriores a la recolección. El diagnóstico de estado de COVID se confirmó mediante la prueba de reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Junto con una variedad de pruebas hematológicas convencionales y observaciones clínicas, la prueba LIT se realizó todos los días o cada dos días hasta la muerte o el alta de la UCI.

Recopilación de datos:

Los pacientes fueron seguidos desde su ingreso a la UCI hasta el día del exitus o alta de la UCI. Todos los datos se recopilaron prospectivamente en formularios de estudio estandarizados. Las variables de datos recopiladas al ingreso incluyeron las características demográficas, diagnóstico, comorbilidades, fecha de positividad de la prueba PCR, síntomas de COVID-19, gravedad de COVID-19 (según la clasificación de la organización mundial de la salud (OMS)), tipo de tratamiento, uso de ventilación y tipo de ventilación, relación presión arterial parcial de oxígeno/fracción de oxígeno inspirada (PaO2/FiO2), uso de antibióticos, proteína C reactiva (PCR), conteo de neutrófilos, conteo total de leucocitos. Al ingreso, se evaluó la gravedad del paciente con APACHE II y la puntuación SOFA (Severity of Organ Failure Assessment Assessment). Durante la estancia en la UCI, los pacientes fueron evaluados para el desarrollo de sepsis o shock séptico. También se registraron los signos vitales el día de la prueba LIT. También se evaluaron los parámetros de resultado de la unidad de cuidados intensivos, como la duración de la ventilación mecánica, la duración de la estancia en la UCI, la duración de la hospitalización y la mortalidad. La PCR, el recuento de neutrófilos y el recuento total de leucocitos se realizaron el día de la prueba de LIT en los voluntarios sanos.

Mediciones de producción de ROS por luminómetro:

La producción de ROS se midió de acuerdo con el método descrito anteriormente [25-27]. Brevemente, se añadieron 10 μl de muestras de sangre recién obtenida (obtenida por punción digital o venopunción) a 100 microlitros de solución salina tamponada con fosfato (PBS) que contenía forbol 12-miristato 13-acetato (PMA; Sigma) y luminol. La solución se incubó durante 10 minutos a 37,5 °C. La quimioluminiscencia se cuantificó después de 10 minutos usando un luminómetro portátil 3MTM (Clean-Trace, NG3) en unidades relativas de luz (RLU). Se trazaron las puntuaciones de LIT como un correlato de la función de neutrófilos para cada paciente (muestreado todos los días o cada dos días) y cada voluntario sano (muestreado solo una vez).

La generación anormalmente alta (hiperproducción) o baja (hipoproducción) de ROS se asoció con resultados clínicos adversos. Esto plantea la posibilidad de que la relación LIT™/recuento de neutrófilos (LIT/N) se utilice como herramienta clínica predictiva.